免疫增殖病及检验

1、第二十七章免疫增殖病及检验1. 免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念和分类和分类2. 单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病的概念的概念3. 常见的常见的单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病4. 本周蛋白本周蛋白、M蛋白的概念蛋白的概念5. 单克隆丙种球蛋白病的单克隆丙种球蛋白病的检测检测本章要点目录 概述1单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征2单克隆丙种球蛋白病的检测方法3 免疫增殖病（immunoproliferative disease）是免疫系统异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要临床表现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，因此通过异常免疫球蛋白的检测，可以为该类疾病的诊断提供重要依据，检测异常

2、免疫球蛋白已经成为临床免疫检验的重要检测内容。前 言第一节 概述免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生（包括良性或恶性）所致的一组疾病。免疫增殖病的分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病T细胞细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（20）淋巴母细胞瘤淋巴母细胞瘤部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤Sezary综合征综合征蕈样霉菌病蕈样霉菌病B细胞细胞慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤重链病和轻链病重链病和轻链病Burkitt淋巴瘤淋巴瘤其他多数淋巴细胞瘤其他多数淋巴细胞瘤传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症免疫增殖病的

3、分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病裸细胞裸细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（80）部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤组织组织-单核细胞单核细胞急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病急性组织细胞增多症急性组织细胞增多症其他（分类不统一）其他（分类不统一）毛细胞白血病毛细胞白血病其他霍奇金病其他霍奇金病免疫球蛋白病的概念 由于B细胞或浆细胞异常增殖所引起的免疫球蛋白的异常增加，从而导致机体病理损伤的免疫增殖病。 分类分类单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）第二节 单克隆丙种球蛋白病的

4、临床免疫学特征 突出突出特点特点：患者血清存在异常增多的单克隆患者血清存在异常增多的单克隆免疫球蛋白免疫球蛋白 M M蛋白（蛋白（monoclonal proteinmonoclonal protein）：单克隆免单克隆免疫球蛋白理化性质十分均一，但是多无免疫活疫球蛋白理化性质十分均一，但是多无免疫活性性，可以是可以是IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE或或IgDIgD，也可，也可以是以是或或轻链中的任何一型。轻链中的任何一型。 本周蛋白（本周蛋白（Bence-Jone proteinBence-Jone protein）：M M蛋白蛋白的轻链分子量较小，容易从尿中排出，的轻

5、链分子量较小，容易从尿中排出，最早最早由由Bence-JonesBence-Jones测知。测知。一、多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（multiple myelomamultiple myeloma）是）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高趋势，男性多发，男女比约为趋势，男性多发，男女比约为2:12:1，平均发病，平均发病年龄是年龄是46.546.5岁。岁。临床表现： 骨痛 贫血 感染 高

6、黏血症表现 肾功能损害 患者骨破坏所致头颅肿患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出物及眼球突出特点：特点： 血清中有大量单克隆血清中有大量单克隆M M蛋白或尿中有大量本周蛋蛋白或尿中有大量本周蛋白白 免疫球蛋白含量明显降低免疫球蛋白含量明显降低 骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤瘤 原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松类 型发生率（%）本周蛋白尿阳性（%）临床特点IgG506050 70典型症状IgA20 2550 70高黏综合征较多见IgD1 290骨髓外病变多见，溶骨病变多见，44%淀粉样变IgE0.01少见 非 分 泌

7、型1 5无溶骨病变较少，神经系统损害较多见 不同类型的多发性骨髓瘤特点不同类型的多发性骨髓瘤特点 二、原发性巨球蛋白血症 原发性巨球蛋白血症（原发性巨球蛋白血症（macroglobulinemiamacroglobulinemia）是以分泌是以分泌IgMIgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病，好发于老年男性。病，好发于老年男性。 主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。实验室检查：实验室检查： 血清中血清中患者血清患者血清IgMIgM水平往往超过水平往往

8、超过300mg/dl300mg/dl 血清分离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难血清分离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征以泳动，集中于原点是该病的电泳特征 骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的浆细胞样淋巴细胞明显增多的浆细胞样淋巴细胞明显增多 有些有些IgMIgM分子具有冷球蛋白的特征分子具有冷球蛋白的特征 有约有约4040的病人可出现本周蛋白尿的病人可出现本周蛋白尿三、良性单克隆丙种球蛋白病 良 性 单 克 隆 丙 种 球 蛋 白 病 （良 性 单 克 隆 丙 种 球 蛋 白 病 （ b e n i g n b e

9、 n i g n monoclonal gammopathymonoclonal gammopathy）是指血清中出现高水）是指血清中出现高水平免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。平免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。一般无临床症状，往往因其它疾病就诊时发现一般无临床症状，往往因其它疾病就诊时发现血中有血中有M M蛋白，但其并不呈进行性增加，在少部蛋白，但其并不呈进行性增加，在少部分正常老年人群中也可出现上述情况。分正常老年人群中也可出现上述情况。 三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别诊断病的鉴别诊断 恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别恶性与良性单克隆丙

10、种球蛋白病的鉴别 四、冷球蛋白血症 冷球蛋白（冷球蛋白（cryoglobulincryoglobulin）：）：指温度低于指温度低于30 30 时易自发形成沉淀，加温后又可溶解的免疫时易自发形成沉淀，加温后又可溶解的免疫球蛋白球蛋白 冷球蛋白血症：冷球蛋白血症：当血中含有冷球蛋白时称为当血中含有冷球蛋白时称为冷球蛋白血症冷球蛋白血症特点：特点： 多多见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病病和某些免疫增殖病 患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度黏度、红细胞凝集、血栓形成等病理红细胞凝集、血栓形成等病理表现

11、表现。 常见症状常见症状有有雷诺现象（即寒冷性肢端紫绀）、雷诺现象（即寒冷性肢端紫绀）、皮肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节皮肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、痛、肾损害、神经系统病变（如肾损害、神经系统病变（如感觉麻木感觉麻木、运、运动障碍动障碍等等）以及肝以及肝、脾等器官损害。脾等器官损害。五、淀粉样变性 淀粉样变性（淀粉样变性（amyloidosisamyloidosis）是组织器官中是组织器官中有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以小动脉、肾小球、肝、脾

12、和肾上腺最为常见。小动脉、肾小球、肝、脾和肾上腺最为常见。第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法 血清蛋白区带电泳血清蛋白区带电泳 免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白的分类鉴定免疫球蛋白的分类鉴定 本周蛋白检测本周蛋白检测 冷球蛋白检测冷球蛋白检测一、血清蛋白区带电泳 血清区带电泳是测定血清区带电泳是测定M M蛋白的一种定性实验，蛋白的一种定性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。 M M蛋白在电泳时出现于蛋白在电泳时出现于 区代中，不同类区代中，不同类型的型的M M蛋白的电泳后所处位置。蛋白的电泳后所处位置。二、免疫球蛋白定量检测

13、免疫球蛋白定量测定较常用的方法有免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩单向扩散法散法与与免疫比浊法免疫比浊法，前者较为简便，后者更为，前者较为简便，后者更为准确迅速。准确迅速。 恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白的显著增高。球蛋白的显著增高。 在良性丙种球蛋白病的血清标本中，在良性丙种球蛋白病的血清标本中，M M蛋白的蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高 三、免疫球蛋白的分类鉴定 免疫电泳免疫电泳 免疫选择电泳免疫选择电泳 免疫免疫固定固定电泳电泳免疫电泳：免疫电泳： 免疫电泳是将免疫电泳是将琼脂糖电

14、泳琼脂糖电泳和和免疫双向扩散免疫双向扩散相结相结合的一项技术。合的一项技术。 血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的的抗血清进行免疫扩散，阳性样本的M M蛋白将在适蛋白将在适当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、当的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及沉淀弧的形状可以对电泳位置及沉淀弧的形状可以对M M蛋白作出判定。蛋白作出判定。 正常及某些患者免疫电泳图谱正常及某些患者免疫电泳图谱 上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋

15、白a：抗正常人血清；：抗正常人血清；b：抗：抗IgG血清；血清；c：抗：抗IgA血清；血清；d：抗：抗IgM血清血清e：抗：抗血清；血清；f：抗：抗血清血清A：IgA/型骨髓瘤；型骨髓瘤； B：IgG/型骨髓瘤；型骨髓瘤； C：IgG重链病重链病免疫选择电泳：免疫选择电泳： 制备含抗制备含抗或或血清的薄层琼脂板，打孔并加入血清的薄层琼脂板，打孔并加入待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉待测标本进行火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，加入抗某类免疫球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散

16、后，根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。根据沉淀弧形成的情况，进行分析鉴定。免疫选择电泳图谱示意图免疫选择电泳图谱示意图 琼脂中含抗琼脂中含抗及抗及抗抗血清，示例孔中为血清标本，抗血清，示例孔中为血清标本，槽中为抗槽中为抗IgA重链抗血清重链抗血清 A：正常人；：正常人；B：重链病；重链病；C：IgA骨髓瘤骨髓瘤免疫固定电泳：免疫固定电泳： 免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反应相结合的定性实验。应相结合的定性实验。 与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，敏性，M M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界蛋白在免疫固

17、定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清 球蛋球蛋白区带则比较弥散。白区带则比较弥散。 IgG/型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱四、本周蛋白检测3.直接定量分析直接定量分析尿液透析浓缩尿液透析浓缩50倍后进行倍后进行2.免疫固定电泳免疫固定电泳1.本周蛋白定性检查(筛查)溶解溶解(+)90 沉淀沉淀标本5060 五、冷球蛋白检测 冷球蛋白冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在是血清中的一种特殊蛋白质，在44时自发沉淀时自发沉淀，加温至，加温至3737时又可溶解时又可溶解，故常，故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进

18、行测定。利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进行测定。 取患者外周血，分离出血清置取患者外周血，分离出血清置44冰箱冰箱中，一中，一般在般在2424h h72h72h出现沉淀出现沉淀，若，若1 1周仍不出现沉淀者周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。方可判断为阴性。 如形成沉淀，如形成沉淀，再置再置3737温育使其复溶温育使其复溶，也可，也可将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析将冷沉淀物离心洗涤后做定性与定量分析异常免疫球蛋白检测的应用原则异常免疫球蛋白检测的应用原则 凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应凡检出无法解释的免疫球蛋白异常增高，都应建议做进一步的检查。建议做进一步的检查。初筛实验：初筛实验

19、：区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测区带电泳分析、免疫球蛋白定量检测或尿本或尿本- -周蛋白定性。周蛋白定性。确证实验：确证实验：免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋免疫电泳、免疫固定电泳、免疫球蛋白亚型定量和血清及尿中轻链等检测。白亚型定量和血清及尿中轻链等检测。免疫增殖性疾病免疫增殖性疾病是指由于淋巴细胞发生恶性转化是指由于淋巴细胞发生恶性转化所导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多所导致的一组疾病。免疫球蛋白的多克隆增殖多为良性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。为良性；单克隆增殖多呈恶性发展趋势。浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整结构浆细胞异常增殖产生大量无正常功能及完整结构的异常免疫球蛋白

20、，可导致相应器官的功能障碍。的异常免疫球蛋白，可导致相应器官的功能障碍。免疫球蛋白异常增殖病的免疫检测方法有：血免疫球蛋白异常增殖病的免疫检测方法有：血清区带电泳；免疫电泳；免疫固定电泳；清区带电泳；免疫电泳；免疫固定电泳；血清免疫球蛋白定量等。血清免疫球蛋白定量等。一般应采用一般应采用两种以上两种以上的检测方法互相印证。的检测方法互相印证。 小 结小 结免疫球蛋白病的概念 由于B细胞或浆细胞异常增殖所引起的免疫球蛋白的异常增加，从而导致机体病理损伤的免疫增殖病。 分类分类单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）单克隆免疫球蛋白病（单一克隆、恶性）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）多克隆免疫球蛋白病（全面、良性或继发）第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法 血清蛋白区带电泳血清蛋白区带电泳 免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白的分类鉴定免疫球蛋白的分类鉴定 本周蛋白检测本周蛋白检测 冷球