鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论课件

1、鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定受体蛋白的鉴定指导教师指导教师： 某某某某某某 副教授副教授本本 科科 生：生： 某某某某某某专专 业业： 动物医学动物医学 汇汇 报报 内内 容容v一一 研究目的与意义研究目的与意义v二二 实验方法与技术实验方法与技术v三三 实验结果与讨论实验结果与讨论鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论一、研究目的与意义一、研究目的与意义v1、禽流感概述、禽流感概述 鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论HA+Sialic ac

2、id Gal - GlcNAc-Host cellHost cell一、研究目的与意义一、研究目的与意义v2、研究禽流感病毒受体的意义、研究禽流感病毒受体的意义 鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论二、实验方法与技术二、实验方法与技术鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论方法与技术方法与技术一、一、CEFCEF的培养的培养取材取材分离分离纯化纯化培养培养鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论二、病毒的增殖二、病毒的增殖 方法与技术方

3、法与技术接种病毒接种病毒回收尿囊液回收尿囊液纯化分装纯化分装鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论方法与技术方法与技术三、膜蛋白提取三、膜蛋白提取Mem-PERMem-PER真核生物膜蛋白提取试剂盒真核生物膜蛋白提取试剂盒鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论方法与技术方法与技术四、四、VOPBA分析分析 利用利用VOPBA方法对已提取的方法对已提取的CEF细胞膜蛋细胞膜蛋白进行鉴定。具体操作如图所示：白进行鉴定。具体操作如图所示：鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病

4、毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论SDS-PAGE电泳电泳蛋白转印蛋白转印丽春红染色丽春红染色病毒叠加病毒叠加封闭封闭PVDF膜膜抗体孵育抗体孵育DAB显色鉴定显色鉴定结果结果鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论三、实验结果及讨论三、实验结果及讨论1、SDS-PAGE电泳结果电泳结果 泳道泳道1，2：鸡胚成纤维细胞膜蛋白；泳道：鸡胚成纤维细胞膜蛋白；泳道M：蛋白预染：蛋白预染Marker 1 2 MkD832516.532.56247.5175鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论2

5、、VOPBA结果结果 鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒疑似受体条带鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒疑似受体条带 三、实验结果及讨论三、实验结果及讨论16.5 25 32.547.58317562 M 1 2 3R1R2R5R6R3R4R8R7鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定的论体蛋白的鉴定的论3、结论、结论 本次实验成功得到了本次实验成功得到了 条疑似禽流感受体的条疑似禽流感受体的蛋白条带，初步鉴定了在蛋白条带，初步鉴定了在CEF膜上的禽流感膜上的禽流感病毒受体，为进一步研究打下了基础。病毒受体，为进一步研究打下了基础。 由于方法的局限性，所得到了蛋白条带还由于方法的局限性，所得到了蛋白条带还需进一步分离纯化，才能确认为禽流感病毒需进一步分离纯化，才能确认为