薄层扫描法测定恒益调脂口服液中大黄酚的含量

1、薄层扫描法测定恒益调脂口服液中大黄酚的含量摘要采用薄层扫描法测定该制剂中大黄酚含量。测定方法灵敏度高，分离效果好，加样回收率1015，同板变异系数148，异板变异系数299，符合制剂分析要求。关键词薄层扫描法；恒益调脂口服液；大黄酚中号R927.2文献标识码:A文章编号:1006-8783(2000)01-0035-02 恒益调脂口服液由何首乌、决明子、枸杞子等六味药组成。据文献报道1，何首乌、决明子均含大黄酚。为了控制该药质量，采用薄层扫描法测定该制剂中大黄酚含量，报告如下。1实验仪器与材料日本岛津 CS-9000型双波长薄层扫描仪；定量点样毛细管( Dranmord USA)。硅胶G(青岛

2、海洋化工厂)；所用溶剂和试剂均为分析纯；大黄酚对照品(中国药品生物制品检定所)；恒益调脂口服液(珠海恒益保健品有限公司)。2方法2.1溶液的配制对照品溶液：准确称取干燥至恒重的大黄酚对照品20 mg，置20 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，超声处理3 min至完全溶解，得质量浓度为010 mgmL的对照品溶液。供试品溶液：取恒益调脂口服液100 mL，放置24 h后，精密吸取上清液10 mL，置锥形瓶中，加入1 mL浓盐酸，水浴加热30 min，立即冷却，移至分液漏斗中，残渣加水10 mL洗涤，水液并入分液漏斗中再分别用16、16、16、16、20 mL乙酸乙酯洗涤残渣并萃取5次，合并乙酸乙

3、酯液，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至5 mL。阴性对照溶液：取厂方提供的已配制好的阴性液，按2.1项下“供试品溶液”提取步骤，蒸干，加甲醇溶解制成阴性对照液。2.2薄层色谱条件薄层板：硅胶G(加=0.5% CMC；105 活化1 h，置干燥器中备用)；展开剂2：石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(1551)；置10 下分层，取上层液；日光下观察，色谱见1。2.3测定波长的选择取大黄酚对照品及供试品溶液各2 L，点于硅胶G薄层板上，展开，置薄层扫描仪中，在波长370700 nm中进行光谱扫描，结果选定样品波长S=435 nm，参比波长R=545 nm。1薄层色谱2.4扫描条件双波长反射法锯齿扫描，

4、S=435 nm，R=545 nm；背景校正：ON；灵敏度：中；狭缝：94 mm04 mm；Sx=3。2.5标准曲线制备分别吸取大黄酚对照液1、3、6、9、12 L，点于同一硅胶G薄层板上，依法展开测定，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y12364959X+6275.66， r0.9986，结果在010120 gL范围内，线性关系良好。2.6稳定性考察在硅胶G板上点2 L供试液，展开后每隔30 min扫描1次，持续2 h，峰面积积分值分别为：195793.1、189407.8、187954.0、187254.1、191537.4，RSD228，所以大黄酚在2 h内

5、稳定。2.7精密度试验准确吸取大黄酚对照液5 L，点于同一薄层板上，依法展开，测定，同板平均变异系数为148，异板平均变异系数为299，上述结果表明 RSD均5，符合薄层扫描法的精密度要求。2.8加样回收率试验在供试品溶液中加入大黄酚对照品，制成加样回收试验液，分别吸取供试品溶液，加样回收溶液交叉点于同一薄层板上，依法展开，测定，结果平均回收率为101.51%,RSD为3.23%，见表1。表1加样回收率试验结果m(加入量)/mgm(测得量)/mg回收率/%10110.104695.120110.1141103.730110.1127102.540110.1144104.050110.11251

6、02.243样品含量测定吸取供试品2 L点于硅胶G薄层板上，展开，测定，用外标两点法测定，计算大黄酚的含量，结果见表2。表2样品含量测定结果批号(大黄酚)/mg*mL-1RSD/%123495092401754017170167101714198950927014690145701539014882434讨论4.1本实验以大黄酚为测定指标，采用双波长薄层扫描法，方便、简单易行，且杂质成分干扰少，准确度高，回收率达101、51。4.2决明子、何首乌均含有蒽醌及其苷类，本文采用的方法测定的大黄酚是游离与水解后产生的大黄酚的总和。4.3实验中曾比较乙醚与乙酸乙酯萃取结果，乙醚分层快，但所提量较乙酸乙酯少，故选用乙酸乙酯作为萃取溶剂。4.4展开剂在常温下分层，极性较大，大黄酚始终在展开前缘，影响测定结果，如在10 下分层则可降低大黄酚Rf值，提高测定准确度。朱沛韶（广东省药品检验所，广东广州 510180）陈浩桉（广东省药品检验所，广东广州 510180）何书华（广州中医药大学实习生）参