液相的故障及维护

1、系统清洗1：使用 10%的硝酸溶液作为流动相，0. 5ml 流速清洗系统三-四小时（不接色谱柱）然后用纯水清洗系 统三个小时左右，充分洗掉硝酸.2:使用异丙醇冲洗系统 3 个小时左右（不能与硝酸混合使用，否则会发生爆炸）怎样确定和解决故障解决 HPLC 存在的故障应该从判断故障所在开始。 木于册将从五个方而帮助您快速找到故障所在。1压力异常1漏液1谱图问题1进样阀问題1其它由气味、现象和声音可以判断的问题 C将问题解决后请将方法记录下來，以备将來参考。前期维护许筝液相色谱的故障通过日常维护一般都是可以避免的。例如：定期的更换柱塞杆密対可以避免柱塞杆密 封的磨损以及由此产生的相关的故障。第七部分

2、列出了很女液相色谱的常见故障以及预防描施及建议。针 对特定品牌的液相色谱.这些建议需婆灵活运用.这样它就可以成为实验室日常维护:作中的一部分。压力异常操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方 法。没有压力显示.没有流动相流动原因解决方法1、电源问题1、接通电源.开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3.控制器设定不正确或设定失败3、a.采収恰当的设定b、修理或更换控制器4.柱塞杆折断4、见换柱塞杆5.泵头内有空气5.溶剂脱气.启动泵抽出空气6.流动相不足6、a补充流动相b、更换入口濾头7、单向阀损坏7、更换单向阀8、漏液8、拧紧或更换于紧接头流动

3、相流动正常.但没有斥力显示原因解决方法1、仪表损坏1、更换仪表2、压力传感器损坏2、更换压力传感器压力持续佩舟原因解决方法1、流速设定过高1、调整流速设定2、柱前筛板堵塞2、a.在允许情况下反冲色谱柱 b、更换筛板C、更换色谱柱3.流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀3、a.使用恰当的流动相b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当4.选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏5、清洗或更换进样阀6、柱温过低6、提商温度7、控制器失常7、修理或更换控制器8、保护柱阻塞8、晴洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞9淸洗或更换在线过滤器压力持续偏低原 W解决方法lx 流速设定过低K 调整流速2、系统漏液2.确定漏液位幫并维修3、

4、色谱柱选择不当3、选择恰当的色谱柱4.柱温过高4、降低温度5、控制器失常5、维修或更换控制器压力不断上升原因解决方法1、见列表 CK 见列表 C压力降为零原因解决方法1、见列表 A. B1、见列表 A、B压力不断下降但不回零原因解决方法1、见列表 DK 见列表 D压力波动原因解决方法1、泵中有气体lx a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2、单向阀损坏2、更换单向阀3、泵密封损坏3、更换泵密封4.脱气不充分4、a.溶剂脱气b、改变脱气方法（使用在线脱气法等）5.系统漏液5、确定漏液位宜并维修6、使用梯度洗脱6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动漏液通常可以通过拧紧或更换管路接头來解决漏液的问题。但值

5、得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和 塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题.就必须将接头取下.检查是否损坏（例如. 卡套损坏、密封表而有杂质）：损坏的接头应该更换掉。接头处漏液原因解决方法lx 接头松动1.拧紧2、接头磨损2、更换3、接头过紧3. a、拧松，再重新拧紧b.更换4.接头被污染4. a、拆下清洗b.更换5、部件不匹配5.使用同一品牌的配件泵漏液原因解决方法1、单向阀松动1、a.拧紧讯向阀（不必拧的过紧）b、更换单向阀2、接头松动2.拧紧接头（不必拧的过紧）3.混合器密封损坏3、a、更换混合器密封b.更换混合器4、泵密封损坏冬维修或更换泵密封件5.压力传感器损坏

6、5、维修或见换压力传感器6.脉冲阻尼器损坏6更换脉冲阻尼器7、比例阀损坏7、a、检査隔膜，如果漏液立即更换b.检査手紧接头损坏的立即更换8、放空阀的损坏8、a、拧紧放空阀b.更换放空阀进样阀漏液原因解决方法lx 转子密封损坏1、重新安装或更换进样阀2、定址环阻塞2.更换定址环3.进样口密封松动3、调整4.进样针头尺寸不合适仁使用恰当的进样针5.废液管中产生虹吸5、保持废液管高于废液液 ifii6.废液管阻塞6.更换或銃通废液管色谱柱漏液原因解决方法lx 尾端接头松动K 拧紧接头2、卡套内有填料2、拆下.淸洗卡套.重新安装3.筛板厚度不合适3.使用合适的筛板（参考下表）筛板选择抬导物质粒径筛板孔

7、径3-4u0. 5u5-20u2u检测器漏液原因解决方法1、流通池垫片损坏1、a、避免过大的背景压力（斥力降）b.更换垫片2、流通池窗破碎2、更换窗口3、手紧接头漏液3、拧紧或更换4、废液管阻塞4、更换废液管5、流通池阻塞5、重新安装或更换谱图问题液相色谱系统的许女问题都能在谱图上反映岀來。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决：而其 他的问題必须通过修改操作程序來解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关健。 峰拖尾原因解决方法lx 筛板阴塞K a.反冲色谱柱b.更换进口筛板 s 更换色谱柱2、色谱柱塌陷2.填充色谱柱3.干扰峰3. a、使用更长的色谱柱b.改变流动相或更换色

8、谱柱4、流动相 pH 选择错误K 涮整 pH 值。对于碱性化合物.低 pH 值见有利于 得到对称峰5.样品与填料表而的溶化点发生反应图5. a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b.更改色谱柱峰前延原因解决方法lx 柱温低K 升商柱温2、样品溶剂选择不恰当2、使用流动相作为样品溶剂3、样品过载3.降低样品含虽4.色谱柱损坏仁见 Al、A2峰分叉原因解决方法1、保护柱或分析柱污染图lx 取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞.拆下來清洗。如果问题仍然存在. 可能是柱子被强保留物质污染，运用适片的再生措 施。如果问题仍然存在.入口可能被阻塞.更换筛板 或更换色谱柱。2、样品溶剂不溶

9、于流动相2.改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶 剂。峰变形原因解决方法1、样品过载K减少样品载址早出的峰变形原因解决方法lx 样品溶剂选择不恰半lx a.减少进样体积b、运用低极性样甜溶剂早出的峰拖尾程度大于晚出的峰原因解决方法lx 柱外效应K 冬调整系统连接（使用更短、内径更小的管路b.使用小体积的流通池K增加时脱尾更严重原因解决方法lx 二级保留效应，反相模式1、a.加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、U!换一支柱子2、二级保留效应，正相模式2、a.加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）C、加入水（或多官能团化合物）d

10、、试用另一种方法3、二级保留效应，离子对3.加入三乙胺（或碱性样品）酸性或碱性化合物的峰拖尾原因够决方法1、缓冲不合适1 a.使用浓度 50-100mM 的缓冲液b、使用 Pka 等于流动相 PH 值的缓冲液额外的峰原因解决方法lx 样品中有其他组份1、正常2.前一次进样的洗脱峰2、a.増加运行时间或梯度斜率b、提高流速3x 空位或鬼峰3. a.检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂C、减少进样体积保留时间波动原因解决方法1、温控不当K 调好柱温2、流动相组分变化2.防止变化（蒸发.反应等）3.色谱柱没有平衡3.在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱保留时间不断变化原因解决方法lx 流

11、速变化1、重新设定流速2、泵中有气泡2、从泵中除去气泡3、流动相选择不恰当3、a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相基线漂移原因解决方法1、柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基 线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低 灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。）1、 控制好柱子和流动相的温度.在检测器之前使用 热交换器图2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂 移大于温度导致的漂移。）2、使用 HPLC 级的溶剂.岛纯度的盐和添加剂。流动 相在使用前进行脱气使用中使用氨气。3.流通池被污染或有气体3、 用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。 如有需要，可以用 1N 的硝酸。（不要用盐酸）4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂， 产生噪音基线）1、取岀阻塞物或更换管子。参考检测器于册更换流 通池窗。5、流动相配比不当或流速变化5、更改配比或流速为避免这个问题可定期检査流 动相组成及流速。6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时6、用中等强度的溶剂进行冲洗.见改流动相时，在 分析前用 10-20 倍体枳的新流动相对柱子进行冲洗。人流动相污染、变质或由低品质溶剂配成7、检查流动相的组成。使用禹品质的化学试剂及 HPLC