细胞表面分子的检测与分析_第1页
细胞表面分子的检测与分析_第2页
细胞表面分子的检测与分析_第3页
细胞表面分子的检测与分析_第4页
细胞表面分子的检测与分析_第5页
已阅读5页，还剩33页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析一、新鲜实体组织样本的制备一、新鲜实体组织样本的制备n 酶消化法。 常用的酶类试剂：胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胶原蛋白酶等n 机械法。1、剪碎法 2、网搓法 3、研磨法n 化学处理法。 常用试剂：0.2%EDTA 0.25%胰酶+0.2%EDTA注意注意：除消化过程外，其余步骤最好在4度环境下操作，提高 细胞活性。细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析四、贴壁细胞单细胞悬液的制备 （1）将

2、培养细胞用0.04EDTA或0.25胰酶消化37分钟， 至光镜下见到贴壁细胞变圆还没有漂浮为止，弃消化 液，加PBS； （2）用吸管将细胞从瓶壁上轻轻吹打下来，移入离心管中； （3）离心，1000r/min，5min； （4）加PBS洗两遍； （5）PBS重悬，将细胞吹打均匀； （6）荧光标记。细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析 口诀：横平竖直细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析 溶血，即裂解红细胞。它是流式细胞术分析白细胞的

3、先决条件。溶血不好，白细胞群不能很好分开，溶血好坏直接影响检测结果。因此，必须对溶血过程进行严格控制。 细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析淋巴细胞淋巴细胞单核细胞单核细胞粒细胞粒细胞这三群细胞分别由具有不同功能的细胞组成这些细胞数量不等，甚至非常稀少这些细胞表达不同的标记物，是用来区分它们的基础细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析1.取新鲜抗凝血100ul，置于FCM测量管中；2.直接标记法：加入带荧光标记抗人的单克隆抗体 10ul，充分混匀，4闭光孵育2030min; 3.加入溶血剂A液600ul, 轻轻振荡15s, 加入溶血剂B液260ul, 轻轻振荡15s， 加入溶血剂C液100ul, 振荡10s,上机检测。 ACK溶血剂:加入2mlACK溶血剂，充分混匀，反应5min, 1000r/min离心5min，去上清；重复一遍，用PBS洗涤1遍，收集细胞上机检测。细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与分析细胞表面分子的检测与

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论