填充色谱柱的柱效测定

1、实验2-2 填充色谱柱的柱效测定一、目的要求（1）了解气相色谱仪的基本结构、工作原理与操作技术；（2）学习色谱柱的柱效测定方法；（3）掌握有效塔板数及有效塔板高度的计算方法。 二、基本原理色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标，混合物能否在色谱柱中得到分离，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分离效能愈好。是实际工作中，使用有效塔板数n有效及有效塔板高度H有效来表示柱效更为准确，更能真实反应色谱柱分离的好坏，它们的计算公式为：n有效

2、9;'tRtR2=5.54()=16()2 YYH有效=L/n有效 tR= tR- tM式中tR为组分的调整保留时间，tR为组分的保留时间，tM为空气的保留时间，Y为色谱峰的峰底宽度，L为色谱柱的长度。由于各组分在固定相和流动相之间分配系数不同，因而同一色谱柱对各组分的柱效也不相同，所以在报告n有效时，应注明对何种组分而言。三、实验仪器和试样气相色谱仪、色谱柱、氮气钢瓶、皂膜流量计、微量进样器、甲苯和邻二甲苯的混合试剂（1：1）。四、实验条件（实验条件应根据使用的仪器种类及色谱柱条件做相应调整）1、色谱柱2、流动相 氢气3、柱温 1104、气化温度 1505、检测温度 1106、量程：

3、检测器电流110mA7、进样量：4mL五、实验步骤1、根据实验条件，将色谱仪按仪器操作步骤调节至可进样状态，将仪器上的电路和气路系统达到平衡，色谱工作站或记录仪上基线平直时，即可进样。2、为测定死时间，吸取10Ul空气进样，用色谱工作站或记录仪记录空气的色谱数据。3、吸取4Ul混合试样进样，用色谱工作站或记录仪记录色谱数据，并重复两次。4、实验完成后，以乙醚抽洗微量进样器数次，按仪器操作步骤中的有关细节关闭仪器。六、数据记录及处理柱长L=0.6m ,空气保留时间及死时间tM=0.093min1、邻二甲苯tR1=0.703-0.093=0.61 Y1=0.918-0.470=0.448所以n有效

4、1=16（tR/Y1）2=21.786H有效1=0.6/21.786=0.028同理计算得到n有效2=27.002 H有效2=0.022n有效3 =32.555 H有效3=0.018有效所以邻二甲苯的有效塔板数n=27.114 =1/3（21.786+27.002+32.555）平均有效塔板高度H有效=1/3（0.028+0.022+0.018）=0.0232、甲苯tR1=0.282-0.093=0.189 Y1 =0.636-0.215=0.421tR2=0.222-0.093=0.129 Y2 =0.514-0.153=0.361tR3=0.238-0.093=0.145 Y3 =0.612-0.190=0.422n有效1=16（tR/Y1）2=3.225H有效1=L/ n有效1=0.6/3.225=0.186同理计算n有效2=2.043 H有效2=0.294n有效3 =1.889 H有效3=0.318所以甲苯的平均有效塔板数n有效=1/3（3.225+2.043+1.889）=2.386平均有效塔板高度H有效=1/3(0.186+0.294+0.318)=0.