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文档简介
1、课时规范练36 基因工程、单项选择题1.(2019天津滨海新区模拟)下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图(J表示剪切点、切出的断面为黏性末端)。限制酶1:-;口二c限制酶 2: -f.p:丁一限制酶3:- g'u.c,限制酶4:cclcLg请指出下列哪项表述是正确的?()A.在使用限制酶的同时还需要解旋酶B.限制酶1和3剪出的黏性末端相同C.限制酶1、2、4识别的序列都是由4个脱氧核甘酸组成D.限制酶1和2切出的DNA片段可通过T4DNA连接酶拼接2.(2019辽宁高考模拟)近年诞生的 CRISPR/Cas9基因编辑技术可进行基因定点编辑。CRISPR/Cas9系统主要包
2、括 Cas9(核酸内切酶)和向导RNA,其原理是由向导 RNA引导Cas9到一个特定的基因位点进行切割。(上述过程见下图)。下列相关叙述正确的是 ()口别序列jD向导RJSAJ-mS(DNAA.CRISPR/Cas9的组成物质是在核糖体上合成的B.向导RNA的合成需要逆转录酶的参与C.基因的定点编辑过程只涉及碱基A U、G C互补配对D.切割后形成的每个 DNA片段均含有两个游离的磷酸基团3.(2019北京四中高二期末)如图所示,两个核酸片段在适宜条件下,经过X酶的催化作用,发生下列变 化,则X酶是()田A-C-GA-ATTC-G.T *I I I+I I I.g-c-T-T-A-ACA-,h
3、 *-其事 A-C-G-i L-A-*'-T-C<3一 *.+ T GC1T AAG C-AA.DNA连接酶B.RNA聚合酶C.DNA聚合酶D.限制性核酸内切酶4 .(2019福建高二期末)研究者将苏云金芽抱杆菌(Bt)的Cry1Ab基因导入水稻细胞培育成抗螟虫的克螟稻,克螟稻与普通水稻杂交,子代抗螟虫与不抗螟虫的比例为1 : 1。下列有关叙述正确的是(),但没有表达A.Cry 1Ab基因虽已整合到克螟稻细胞的染色体上B.获取CrylAb基因需使用限制酶和 DNA连接酶C.克螟稻和普通水稻仍然属于同一个物种D.克螟稻降低了农药的使用量,害虫不会出现抗药性5 .(2019北京高三期
4、末)下列现代生物科技相关知识的叙述,正确的是()A.单倍体育种不属于生物工程范畴B.细胞融合技术与动物杂交原理和意义都相同C.生态工程可以彻底解决人类面临的各种环境问题D.基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物6 .(2019江苏高二期末)下列关于蛋白质工程的说法,正确的是()A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子C.对蛋白质的改造是通过直接改造相应mRNA来实现的D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的二、不定项选择题7 .(2019天津高二期末)如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部
5、分过程示意图淇中PstI、Smail、EcoRI、Apa I为四种限制性核酸内切酶。下列说法正确的是()含抗原抗原革因ftr L Sma 1. EcoR 1 Apa I抗卡那烈 索基因因的DMAA.图示对质粒和目的基因切割用到了两种限制酶B.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来C.表达载体构建时需要用到限制酶Sma ID.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构8 .下列关于 DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是A.向鸡血溶液中加蒸储水搅拌,可见玻璃棒上有白色絮状物B.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂C.DNA在2 mol/L的NaCl溶液中溶解
6、度较高D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热后变蓝三、非选择题,其编码的酶可使除草剂草丁瞬失去9 .(2019山东德州一模)Bar基因存在于青麻、黑麦草等生物体内毒害作用。培育转 Bar基因大豆,对于控制豆田杂草有重要意义。为了把Bar基因导入大豆细胞,需将Bar基因才1入pUc18质粒中构建中间表达载体,然后与Ti质粒重组为重组表达载体系统。如图为 pUc18质粒的结构示意图,回答下列问题。加4等制原点如E; A半乳精背肺病因,耳毋码的 A中乳糖甘得所以将培养基中 的X-gal水解.使皆翰呈需色. 否则翻落呈白色盘节青瞪累抗性基因不能利用黑麦草与大豆进行有性杂交的方法让大豆获得Bar基因,原
7、因是 (2)构建中间表达载体时,为了便于筛选出含有 Bar基因的重组质粒,需将Bar基因插入pUc18质粒的 中形成重组质粒并导入大肠杆菌,然后在添加 的培养基上培养大肠杆菌,菌落呈白色的即为含中间表达载体的大肠杆菌。(3)中间表达载体需插入 Ti质粒的 中才能将Bar基因整合到植物细胞的染色体DNA上,原I(4)可通过 法直接将重组表达载体导入大豆细胞的原生质体。导入Bar基因的原生质体需 ,经脱分化形成 ,再进一步分化才能获得转Bar基因大豆植株。10 .(2019湖南娄底二模)肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人 员利用基因工程技术将let-7基因导
8、入肺癌细胞实现了在细胞内表达。该基因工程技术基本流程如图1。日碰 空造因o肿解组典块% %© 西第原代蚌界导人/做t培养肺癌班胸图1请回答下列问题。获取let-7基因后可采用 技术进行扩增,进行过程时,将let-7基因与载体重组,需要的两 类酶是 和。载体上 RNA聚合酶识别和结合的部位称为。(2)进行过程时,如出现贴壁生长现象,可用 酶处理,以利于传代培养。(3)从细胞水平上,研究人员知道let-7基因成功表达的依据是_。(4)进一步研究发现,let-7基因能影响癌基因 RAS的表达,其影响机理如图2。据图分析,可通过方法,以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可
9、能是由细胞中 (填RASmRNA”或RAS蛋白”)含量减少引起的。课时规范练36 基因工程1.B使用限制酶是为了切割目的基因和运载体,不需要解旋酶解开双螺旋 小项错误;限 制酶1和3切出的黏性末端相同,都是一CTAG,B项正确;限制酶1、2识别的序列都是 由4个含GATC碱基的脱氧核甘酸组成,限制酶3、4识别的序列是由6个脱氧核甘酸 组成,依次是GGATCC和CCGCGG,C项错误;限制酶1和2切割形成的DNA片段的黏 性末端不同,前者是一CTAG,后者是一CATG,不能配对,不能通过T4DNA连接酶拼接,D 项错误。2 .D根据题意晌导RNA可携带识别序列,与目标DNA的特定位点结合,并进行
10、切割, 该识别序列与a链的互补链互补配对。CRISPR/Cas9系统主要包括Cas9微酸内切酶) 和向导RNA,前者是在核糖体上合成的,后者是通过转录形成的,具场所不是核糖体,A项 错误;向导RNA可通过转录形成,其合成不需要逆转录酶 出项错误;向导RNA和目标 DNA互补配对过程中,涉及的配对方式有 A U、GC、TA、CG,C项错误;由于 DNA分子是双链结构,因此切割后形成的每个DNA分子的片段中均含有2个游离的磷 酸基团,D项正确。3 .A 据图分析 该酶将两个DNA片段连接为一个DNA片段,为DNA连接酶,A项正 确;RNA聚合酶是连接游离的核糖核甘酸形成 RNA的酶,B项错误;DN
11、A聚合酶主要是 连接DNA片段与单个脱氧核甘酸之间的磷酸二酯键,在DNA复制中起作用,C项错误; 限制酶能识别特定的脱氧核甘酸序列,并在特定位点进行切割,但不能将DNA片段连接 起来,D项错误。4 .C克螟稻能抗螟虫,说明Cry1Ab基因已整合到克螟稻细胞的染色体上并成功表达 ,A 项错误;获取Cry1Ab基因需使用限制酶,但不需要DNA连接酶,B项错误;克螟稻和普通 水稻能够杂交并产生可育后代,所以仍然属于同一个物种。项正确;基因突变是不定向 的用此害虫也会出现抗药性,D项错误。5 .D单倍体育种需要采用植物组织培养技术,因此属于生物工程范畴小项错误;细胞融 合技术的原理是细胞膜具有一定的流
12、动性,而动物杂交的原理是基因重组,B项错误;生 态工程只能解决人类面临的部分环境问题 。项错误;基因工程的出现使人类有可能按照 自己的意愿定向改造生物,D项正确。6 .B蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础 ,通过基因 修饰或基因合成,对现有蛋白质进行基因改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生 产和生活的需要。由概念可知,蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因进行操作,A项错误;蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 ,B项正确;对 蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的 ,C项错误;蛋白质工程的流程 和天然蛋白质合成的过程是不完全相同
13、的,D 项错误。7 .ABD 根据题意和图示分析可知:图示表示基因表达载体的构建过程,含抗原基因的DNA分子中含有PstI、Smal、EcoR I三种限制性核酸内切酶的识别序列,其中Sma I的识别序列位于目的基因上;质粒中含有PstI、Smal、EcoR I、Apal四种限制性 核酸内切酶的识别序列。为防止酶切后单个含目的基因的DNA 片段自身连接成环状,图示对质粒和目的基因切割用到了两种限制酶,A项正确;抗卡那霉素基因作为标记基因,主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞 E项正确;限制酶Smal的识别序列位于 目的基因上,因此表达载体构建时不能用限制酶 Smal ,应用限制酶PstI、Eco
14、RI ,C项 错误;基因表达载体一般包括目的基因(抗原基因)、标记基因(抗卡那霉素基因)、启动子和终止子,D 项正确。8 .BCD 向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可使细胞破裂,释放DNA,DNA 溶于蒸馏水,观察不到白色絮状物。9 .答案:(1)黑麦草与大豆之间存在生殖隔离(2)lac Z 氨苄青霉素和X-gal(3)T-DNA T-DNA 可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA 上(4)显微注射再生出细胞壁愈伤组织解析:(1)由于黑麦草与大豆之间存在生殖隔离,因此不能利用黑麦草与大豆进行有性杂交的方法让大豆获得Bar 基因。(2)根据图中信息可知,lacZ基因编码3半乳糖甘酶,&
15、;半乳糖甘酶可以将培养基中的 X-gal 水解,使菌落呈蓝色,否则菌落呈白色。因此,构建中间表达载体时,为了便于筛选出含有Bar基因的重组质粒,需将Bar基因插入pUc18质粒的lacZ基因中形成重组质粒并 导入大肠杆菌,然后在添加氨苄青霉素和X-gal 的培养基上培养大肠杆菌,菌落呈白色的即为含中间表达载体的大肠杆菌。(3)Ti 质粒上的T-DNA 可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据这一特点,如果将目的基因插入到Ti 质粒的 T-DNA 上 ,通过农杆菌的转化作用 ,就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA 上。(4)可通过显微注射法直接将重组表达载体导入大豆细
16、胞的原生质体。导入Bar 基因的原生质体需再生出细胞壁,经脱分化形成愈伤组织,再进一步分化才能获得转Bar基 因大豆植株。10 .答案:(1)PCR 限制性核酸内切酶(或限制酶) DNA 连接酶 启动子(2)胰蛋白(3)发现肺癌细胞的增殖受到抑制(4)从细胞中提取RNA进行分子杂交 RAS蛋白解析:(1)PCR技术可在体外大量扩增目的基因;过程表示基因表达载体的构建,该过程 中首先需要用限制性核酸内切酶(简称限制酶)对载体进行切割,其次还需要用DNA 连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA; 启动子是一段特殊的DNA 序列 ,是 RNA 聚合酶识别和结合的位点,RNA 聚合酶结合到该位点,可驱动转录过程。(2)动物细胞培养过程中,用胰蛋白酶处理,使细胞分散开来。根据题中信息 肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RA
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