乳痛消结颗粒中4味药材的薄层色谱鉴别

1、乳痛消结颗粒中4味药材的薄层色谱鉴别 作者：侯娟 张兰桐 袁志芳 刘江 牛玉凤 【关键词】 丹参 白芍药 淫羊藿 当归 分离和提纯 色谱法 薄层乳痛消结颗粒是本院经多年临床实践研制出来的治疗乳腺增生病的有效方药，由昆布、丹参、白芍药、当归、淫羊藿等15味中药组成，具有软坚散结、疏肝解郁、活血调经、理气止痛、助阳通络之功。为控制其质量，对方中丹参、白芍药、淫羊藿、当归进行了薄层色谱鉴别。1 材料与方法1.1 仪器与试药1.1.1 仪器 薄层色谱展开缸P-1型（上海信谊仪器厂）；硅胶G薄层板（烟台市化学工业研究所）。1.1.2 试药 丹参酮A对照品（中国药品生物制品检定所，批号766-9204）；

2、芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110736-200320）；淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110737-200312）；乙醚、无水乙醇、50%乙醇、95%乙醇等试剂均为化学纯；丹参、白芍药、淫羊藿、当归对照药材由石家庄乐仁堂中药饮片厂提供；乳痛消结颗粒为本院制剂室自制。1.2 薄层色谱鉴别1.2.1 当归的鉴别1.2.1.1 供试品溶液制备 取乳痛消结颗粒10 g，研细，加乙醚10 mL，振摇，放置数小时，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。1.2.1.2 对照药材溶液制备 取当归药材2 g，加乙醚5 mL，按1.2.1.1制备法制成对照药材

3、溶液。1.2.1.3 阴性对照溶液制备 取按工艺制备缺当归的阴性品10 g，按1.2.1.1制备法制成阴性对照溶液。1.2.1.4 鉴别 吸取上述3种溶液各10 L，分别点样于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（91）为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外灯（365 nm）下检视。1.2.2 丹参的鉴别1.2.2.1 供试品溶液制备 取乳痛消结颗粒10 g，研细，加乙醚10 mL，振摇，放置数小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。1.2.2.2 对照药材溶液制备 取丹参对照药材1 g，加乙醚5 mL，按1.2.2.1制备法制成对照药材溶液。1.2.2.3 对照品

4、溶液制备 取丹参酮A对照品，加乙酸乙酯制成2 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。1.2.2.4 阴性对照溶液制备 取按工艺制备缺丹参的阴性品10 g，按1.2.2.1制备法制成阴性对照溶液。1.2.2.5 鉴别 吸取上述4种溶液各5 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯（191）为展开剂，展开，取出，晾干。1.2.3 白芍药的鉴别1.2.3.1 供试品溶液制备 取乳痛消结颗粒10 g，研细，加入中性氧化铝柱（200目，10 g，内径20 mm）上，用50%乙醇100 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加95%乙醇1 mL溶解，作为供试品溶液。1.2.3.2 对照药材溶液制备 取白芍药对

5、照药材2 g，加乙醇10 mL，超声提取20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加95%乙醇溶解至1 mL，作为对照药材溶液。1.2.3.3 对照品溶液制备 取芍药苷对照品，加95%乙醇制成1 mg/mL溶液，作为对照品溶液。1.2.3.4 阴性对照溶液制备 取按工艺制备缺白芍药的阴性品10 g，按1.2.3.1制备法制成阴性对照溶液。1.2.3.5 鉴别 吸取上述4种溶液各10 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（405100.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。 1.2.4 淫羊藿的鉴别1.2.4.1 供试品溶液制备 取乳痛消结颗

6、粒2 g，研细，加水少量溶解，加至聚酰胺小柱（5 g，40目，内径20 mm）上，先后用水、95%乙醇各100 mL洗脱，水液弃去，收集95%乙醇洗脱液，蒸干，残渣用乙醇溶解成1 mL，作为供试品溶液。1.2.4.2 对照药材溶液制备 取淫羊藿对照药材2 g，加95%乙醇10 mL，超声提取20 min，滤过，滤液加至聚酰胺小柱上，按1.2.4.1制备法制成对照药材溶液。1.2.4.3 对照品溶液制备 取淫羊藿苷对照品，加95%乙醇制成每2 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。1.2.4.4 阴性对照溶液制备 取按工艺制备缺淫羊藿的阴性品2 g，按1.2.4.1制备法制成阴性对照溶液。1.2.4

7、.5 鉴别 吸取上述4种溶液各10 L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（1.311）10以下放置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，加热数分钟，置紫外灯（365 nm）下检视。2 结果2.1 当归的鉴别 供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显有相同的蓝色荧光斑点。而阴性样品在相应位置上无干扰。见图1(封3)。2.2 丹参的鉴别 供试品色谱中，在与丹参酮A对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点，而阴性样品在相应位置上无干扰。见图2(封3)。2.3 白芍药的鉴别 供试品色谱中，在与芍药苷对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝紫色斑点，而阴性样品在

8、相应位置上无干扰。见图3(封3)。2.4 淫羊藿的鉴别 供试品色谱中，在与淫羊藿苷对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。而阴性样品在相应位置上无干扰。见图4(封3)。3 讨论 上述实验均在文献13的基础上，通过反复摸索，比较改进后确立。方法专属性强，重现性好，可作为该制剂的质量控制指标。丹参与白芍药的定性鉴别均先将制剂进行前处理然后采用中华人民共和国药典方法操作，所得色谱图清晰，分离良好。淫羊藿的定性鉴别采用先过聚酰胺柱，将其中的叶绿素等杂质洗去，再聚集淫羊藿苷等黄酮类成分，点样于硅胶G薄层板上，用醋酸丁酯-甲酸-水为展开剂，得到的图谱清晰而且各成分分离良好。当归的提取溶剂曾使用甲醇、石油醚及乙醚，后经反复比较确定了乙醚作为提取溶剂。【参考文献】 1 聂明华,黄淑君.抗栓益寿口服液中丹参等3种中药的专属性鉴别