强直性脊柱炎B27检测试剂盒(磁性酶联免疫法)

1、强直性脊柱炎B27检测试剂盒（磁性酶联免疫法）使用说明书【产品名称】通用名称：强直性脊柱炎B27检测试剂盒（磁性酶联免疫法）英文名称：HLA-B27 Assay Kit （Enzyme-Linked Immunomagnetic ）【包装规格】 48人份/盒、96人份/盒【简 介】 HLA-B27与强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）强相关。AS在我国的患病率为0.3%，其中90%-98%的患者HLA-B27阳性。所以，B27的检测对排除AS的诊断有辅助作用。本试剂盒提供含有抗HLA-B27抗体的磁性微珠，特异性针对人白细胞抗原B27。【预期用途】 本产品主要用于

2、强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）的辅助诊断。【检验原理】 病人全血样本（EDTA-K3抗凝）与HRP标记的抗细胞抗体同时加入含有HLA-B27磁性微珠的微孔中。若白细胞上有HLA-B27抗原，经短时孵育，磁性微珠与白细胞结合，此时HRP标记的抗体连接到细胞上。洗涤后，微珠、细胞和酶被保留下来。若白细胞上没有B27抗原，通过洗涤，细胞和酶均被清洗掉。之后加入酶底物液显色，450nm读取光密度值。【主要组成成份】 本试剂盒包含以下10种成分：组 份含 量48人份/盒96人份/盒HLA-B27抗体包被板条68孔128孔酶稀释液13 ml16 mlHRP标记的抗细胞抗

3、体160 ul1120 ul20倍浓缩洗液110 ml120 ml底物液A13 ml16 ml底物液B13 ml16 ml终止液13 ml16 ml阴性对照品1300 ul1600 ul阳性对照品1300 ul1600 ul微孔板板架1个1个【储存条件及有效期】 试剂盒储存于2-8可保存一年。【适用仪器】 适用于任何半自动、全自动免疫分析仪器及手工操作。【样本要求】 本产品仅使用EDTA-K3抗凝的全血标本，已污染的、已溶血的、已凝结的血液样本可能引起不一致的测试结果，应避免使用。不能立即使用的全血样本应静置保存于2-8C，不超过3天使用。【另外需要的材料和设备】1. EDTA-K3抗凝管2.

4、 可调微量移液枪0.5-10ul，20-200ul，八道加样枪和枪头3. 磁架4. 振荡器5. 计时器 6. 能够测量波长为450nm的微孔板读数仪7. 去离子水【检验方法】1. 取出所有试剂和血样，平衡至室温。2. 病人样本编号，将病人样本、阳性对照、阴性对照安排到微孔中。并记录。3. 取出所需微孔，其余放回密封袋中封好，放入冰箱。4. 按照需使用量将HRP标记的抗细胞抗体与酶稀释液按1：50比例稀释（体积比）。5. 充分混匀后，加50ul每一微孔中，轻拍架板，使磁性微珠分散。6. 将抗凝管（EDTA-K3）颠倒混匀数次， 按记录单中的安排每孔加入50ul血样。用加样枪吹打5-6次，使磁性微

5、珠和血液样本充分混匀。各加50uL阳性、阴性对照到相应微孔中。7. 于室温下反应10分钟，期间轻拍框架边缘数次，使试剂和样本维持均匀混合。8. 反应时制备洗液，底物液。洗涤按每孔1500ul，用去离子水20倍稀释。9. 将板架放于磁板上2分钟，用加样枪吸出孔内液体。10. 每孔加入250ul洗液。利用加入时的冲击力使磁性微珠分散，如发现有聚团，请用加样枪吹散。将板架放于磁板上，2分钟。11. 用加样枪在远离磁珠的微孔侧壁吸弃上清。取下并轻拍板架，使磁性微珠分散。12. 重复10、11步骤共5-6次。13. 每孔加入底物A液、B液的混合液100uL。轻拍框架边缘使之充分混合后，室温，避光，15分

6、钟观察结果。14. 如需测量OD值，每孔加入50uL终止液。15. 将板架放于磁板上，使磁性微珠吸于板条侧壁。16. 轻轻取下板架，在波长450nm下，读取吸光度值（OD）。【参考值（参考范围）】1. 阳性：样本 OD值0.7。2. 阴性：样本 OD值0.4。【检验结果的解释】OD值在0.4-0.7，请重复实验，必要时用其它方法验证。【产品性能指标】批内差异：15%批间差异：15准确性：检测阴性和阳性对照吸光度，测试结果应在其允许范围内【注意事项】1. 酶和酶稀释液在加入微孔前一定要充分混匀。2. 把带有标本的板架放在磁板上时，一定要等散开的磁珠被磁板吸附到底部，然后再抽出清洗液。3. 抽出清

7、洗液后，把板架从磁板上取下，用手轻轻撞击板架边缘数次，看到磁珠散开后，再加入清洗液，每次清洗皆如此重复。4. 建议初次操作该试剂的实验人员，每次实验清洗次数不少于8次。5. 如果实验结果需读取OD值，微孔内的磁珠一定要放到磁板上聚集后再放置酶标仪上，否则，微孔内散开的磁珠会影响酶标仪读取的结果。【参考文献】1. 王娜，刘玉珂等，HLAB27检测对强直性脊柱炎的诊断价值，河南科技大学学报医学版，2006年 24卷 4期，起止页码：271-2722. Neumuller J. Schwartz DW, DauberE. Mayr WR: Evluation of four monoclonal a

8、ntibodies against HLA-B27 typing with flow cytometry(FC): comparison with the classic icrolymphocytotoxic test (MLCT). Cytometry,1996 Sep 15:26(3):209-153. .Lingenfelter B, fuller TC, Hartung L, Hunter J. Wittwer C: HLA-B27 scrcening by flow cytometry. Cytometry. 1995 Jun15:22(2):146-94. Reydnlds WM

9、. Evans PR. Lanc AC. Howell WM. Wilson PJ. Wong R. Smith JL: Autonmated HLA-B27 testing using the FACSPrep/FACScan system. Cytometry 1994 Jun 15. 18(2):109-155. Hulstaert F, Albrecht J. Hannet I. Lancaster P, Buchner L, Kunz J, Falkenrodt A, Tongio M, De Keyser F, veys EM. Noens L, Mir N, Costello C

10、. Becker R, Strauss k: An optimized method for routine HLA-B27 screening using flow cytometry. Cytometry. 1994 Mar 15; 18(1):21-96. Janssen WC, Rouwen JA, Hoffmann JJ: Improved flow cytometric method for HLA-B27 typing . Ann-Clin-Biochem. 1992 Nov;29(Pt6):663-7【全球销售及售后服务企业】广州固康生物科技有限公司医疗器械经营许可证号：粤012726地址：广州科学城揽月路80号科技创新基地D区第三层302-304单元邮编：510663电话真-mail: info【生产企业】深圳市康乃格生物技术有