怀牛膝总皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用的实验研究

1、怀牛膝总皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用的实验研究         10-08-18 16:28:00     作者：余佳文 周大兴    编辑：studa20【摘要】  研究怀牛膝总皂苷（ABS）对垂体后叶素诱发的大鼠急性心肌缺血的影响。方法72只大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、复方丹参滴丸组以及ABS高、中、低剂量组，采用尾静脉注射垂体后叶素（Pit）建立大鼠急性心肌缺血模型，观察各给药组注射Pit后心电图的变化，并检测血

2、清中超氧化物歧化酶（SOD）活力，丙二醛（MDA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）含量。结果ABS能够明显影响急性心肌缺血的心电图变化，抑制CK、LDH、MDA的升高及SOD活力的降低。结论ABS能够显著对抗急性心肌缺血，其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。 【关键词】  怀牛膝总皂苷；急性心肌缺血；实验研究          怀牛膝为中医临床治疗心血管疾病的重要药物。前期研究中发现，怀牛膝总皂苷（ABS）有直接舒张血管平滑肌的作用并对去甲肾上腺素引起的大鼠血管平滑肌收缩有显著的抑制作用1

3、。本研究采用Pit静脉注射致大鼠急性心肌缺血模型，观察大鼠心电图以及血清心肌酶谱和抗氧化指标的检测，探讨ABS对急性心肌缺血的作用及作用机制，结果报告如下。1  材料1.1  药品与试剂 中药怀牛膝：浙江省宁波中药饮片厂提供，批号20060414。复方丹参滴丸：天津天士力制药股份有限公司，批号：20080424；垂体后叶素：南京新百药业有限公司  批号：080301；戊巴比妥钠：德国分装，批号：WS20080810；肌酸激酶试剂盒：南京建成生物工程研究所  批号：20090622；乳酸脱氢酶试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622

4、；超氧化物歧化酶试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622丙二醛试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：20090622.1.2  实验仪器 RM6240B型多道生理信号采集处理系统（成都仪器厂）；UNIVERSAL320R型高速冷冻离心机（德国Hettich）；BIORAD  MODEL  680型酶标仪（BIO-RAD）。1.3  实验动物 健康雄性SD大鼠，体重（300±20）g，由浙江中医药大学实验动物中心提供，实验动物合格证号：SYXK（沪）2008-0058，分笼饲养，自由饮水进食。2  方法

5、    将雄性SD大鼠适应性饲养2周，2周后各鼠均以3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉后四肢连接导联心电图，分别尾静脉注射0.5U/kg（1U/4ml）Pit，5s内注射完毕，记录心电图，剔除对Pit不敏感大鼠，主要表现为心率、J点抬高或降低（结果以J点变化的绝对值表示）均无显著变化者，取敏感大鼠72只，饲养1周。SD大鼠随机分为6组，每组12只，分别为正常对照组、模型组、复方丹参滴丸组（270mg/kg），ABS高、中、低（1.25g/kg、1.0g/kg、0.75g/kg）剂量组，正常对照组与模型组灌胃生理盐水10ml/kg，其余各组分别按体重剂量灌服相应药液。除

6、正常对照组外，各组大鼠在灌胃后2h，按上述方法麻醉连接心电图，各组大鼠尾静脉注射0.5U/kg Pit溶液，复制大鼠急性心肌缺血模型，正常对照组尾静脉注射相同体积的生理盐水，注射完毕后观察心电图，造模20min后取下心电导联线，记录各时间点心电图变化。造模后1h，打开大鼠腹腔，下腔静脉采血5ml，于高速冷冻离心机3000r/min，离心15min后，取血清，保存于-20冰箱内待测。统计学处理：结果以x±s表示，应用SPSS13.0软件包进行统计，采用单因素方差分析。     10-08-18 16:28:00    

7、; 作者：余佳文 周大兴    编辑：studa203  实验结果3.1  ABS对大鼠急性心肌缺血心电图的影响 表1。表1  ABS对大鼠急性心肌缺血心电图的影响（略）    与正常对照组比较，*P0.05，*P0.01，*P0.001；与模型组比较，#P0.05，#P0.01，#P0.001结果显示，缺血模型组与正常对照组比较，缺血后各时间点J点较正常组均有显著性差异（P0.001，P0.01），提示模型组造模成功。表1可见ABS高、中剂量组对心肌缺血后心电图J点的变化有

8、显著的改善作用，低剂量组对其改善作用较弱，提示ABS对心肌缺血具有一定的保护作用。3.2  ABS对大鼠急性心肌缺血心率的影响 表2.表2  ABS对大鼠急性心肌缺血心率的影响（略）与正常对照组比较，*P0.05，*P0.01，与模型组比较，*P0.001；#P0.05结果提示，ABS各剂量组能够显著改善心肌缺血后大鼠心率的降低。3.3  ABS对大鼠急性心肌缺血CK、LDH含量的影响 表3.表3  怀牛膝总皂苷对急性心肌缺血大鼠血清CK、LDH活性的影响（略）与正常对照组比较，*P0.001；与模型组比较#P0.05，# 

9、 #P0.01，#P0.001结果显示：ABS高、中剂量组能够显著降低缺血后血清CK、LDH的活力，对心肌缺血有一定的保护作用。3.4  ABS对大鼠血清SOD、MDA的影响 由表4结果显示，ABS高、中剂量组血清MDA水平显著低于模型组，SOD活力显著高于模型组。表4  怀牛膝总皂苷对急性心肌缺血大鼠血清SOD活性及MDA含量的影响（略）    与正常对照组比较，*P0.01；与模型组比较#P0.05，#P0.01，#P0.0014  讨论    近年来大量研究发现氧自由基生成及脂质过氧化反应增强是心肌缺血损伤的主要机制之一。心肌缺血时，心肌组织自由基生成增多，氧自由基损伤心肌细胞膜结构中的磷脂和不饱和脂肪酸，使其发生脂质过氧化，造成氧化损伤。实验结果可见，ABS能够显著改善急性心肌缺血引起的心电