水飞蓟宾对代谢综合征患者葡萄糖代谢率与脂肪因子的影响

1、水飞蓟宾对代谢综合征患者葡萄糖代谢率与脂肪因子的影响     【关键词】  代谢综合征;高胰岛素正常血糖钳夹试验;葡萄糖代谢率;水飞蓟宾;脂肪因子【摘要】  目的 探讨代谢综合征(ms)患者葡萄糖代谢率(m)与血浆抵抗素(resistin)、脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)水平变化及水飞蓟宾(silibinin)的治疗作用。方法 筛选15例ms病例和20例健康对照组。采用高胰岛素正常血糖钳夹技术检测m，评估胰岛素抵抗(ir)程度;采用eilsa法检测血浆resistin、adiponectin与lept

2、in浓度;检测空腹胰岛素(fins)、血糖、血脂等生化指标; ms患者给予水飞蓟宾70 mg口服，一日3次，治疗12 w，于治疗结束后重复检测m、血浆resistin、adiponectin与leptin浓度。结果 ms组腰围(wc)、体重指数(bmi)、空腹血糖(fpg)、2 h血糖(2 h pg)、fins及甘油三酯(tg)等均显著高于对照组，高密度脂蛋白胆固醇(hdlc)明显低于对照组(p均<0.05)。高胰岛素正常血糖钳夹试验稳态时(120150 min)，ms组m显著低于对照组(p<0.01)。两组血浆resistin水平无显著差异(p>0.05);ms组血浆lep

3、tin水平显著高于对照组，adiponectin水平显著低于对照组(p均<0.05)。与治疗前相比，治疗12 w后ms组tg、2 h pg及fins明显降低(p均<0.05)，bmi、wc有所降低，但与治疗前比较无显著差异(p>0.05)，fpg、hdlc、tc及ldlc 等与治疗前比较无显著差异(p>0.05)。治疗前后m分别为(4.24±1.42)和(6.16±1.58) mg·kg-1·min-1，治疗12 w后，ms组m明显升高(p<0.05)。治疗前后ms组血浆resistin，adiponectin，leptin

4、水平等无显著变化(p均>0.05)。结论 水飞蓟宾治疗后能减轻ir，ms患者ir改善不依赖于体重的减轻。水飞蓟宾治疗后ir改善未伴有血浆resistin、adiponectin、leptin水平的明显变化;提示水飞蓟宾治疗减轻ms患者ir的机制可能并非通过影响resistin、adiponectin、leptin等脂肪因子途径，而可能主要与其抗氧化应激机制及减轻脂毒性作用有关。 3 讨 论本研究结果提示，ms患者的胰岛素敏感性降低可能与血浆adiponectin水平降低及leptin水平升高有关。本研究未观察到ms患者伴有血浆resistin水平的明显变化，也未发现其胰岛素敏感

5、性变化与resistin水平的相关性，提示临床ms患者resistin与ir关系的复杂性及可能存在异质性，有待深入研究。本研究结果提示水飞蓟宾对ms患者临床特征的改善主要表现为降tg作用，也有轻度降低血糖和空腹胰岛素的作用，其临床特征的改善并不伴随体重的减轻。研究表明，氧化应激与胰岛细胞功能障碍有关，抗氧化应激药物治疗可以降低2型糖尿病患者的血糖7。本研究水飞蓟宾治疗后ms人群的2 h pg降低可能部分与其抗氧化应激，改善胰岛细胞功能有关。水飞蓟宾降低ms人群的tg作用机制目前尚不能明确，是否也与ppar、ampk通路的激活有关?本研究结果提示其水飞蓟宾增强胰岛素敏感性的作用可能不依赖于体重的

6、减轻，其机制可能与其抗氧化应激机制有关。lirussi等4研究发现，2型糖尿病伴有慢性酒精性肝病患者给予水飞蓟宾口服治疗后，其空腹血糖和血浆甘油三酯水平明显下降，同时homair明显减轻，脂质过氧化程度明显减轻，提示水飞蓟宾增强胰岛素敏感性的作用与其抗氧化应激作用有关。matsuda等研究证实8，水飞蓟素可以抑制细胞因子诱导的胰岛细胞、巨噬细胞等细胞内的nfb、p38 mapk和jnk/sapk等信号通路。nfb、p38 mapk和jnk/sapk等信号通路是氧化应激机制的主要信号通路，因此其研究结果提示水飞蓟素的抗氧化应激作用与其抑制细胞内nfb、p38 mapk和jnk/sapk等信号通路

7、有关。本研究结果未观察到水飞蓟宾治疗对血浆resistin、adiponectin、leptin等有影响。这可能有以下几个原因：一方面，这说明ir相关影响因素的复杂性。ir的发生机制非常复杂，多种遗传和环境因素均参与了ir发生。ir发生机制涉及炎症、氧化应激、脂肪因子、糖毒性、脂毒性及内皮功能损伤等多种病理生理机制9。虽然有诸多文献报道10resistin、adiponectin及leptin等脂肪因子与ir具有密切关系，但是本研究并未发现水飞蓟宾治疗后ms患者的胰岛素敏感性增强伴有resistin、adiponectin及leptin等脂肪因子的显著变化;提示水飞蓟宾减轻ms患者ir的作用并

8、非通过影响以上脂肪因子的途径，而是可能与抗氧化应激和减轻脂毒性有关。同时，水飞蓟宾增强胰岛素敏感性的作用并不依赖于体重的减轻，这也提示体内脂肪因子水平可能与脂肪组织的变化有更直接的联系。另一方面，水飞蓟宾对临床特征的改善与治疗时间长短有一定关系。治疗4 w后并未发现其对血糖、fins、血脂及血压等指标有显著影响，治疗8 w后发现tg降低，而治疗12 w后才开始出现2 h pg和fins水平减低。本研究总观察时间为12 w，结果未观察到水飞蓟宾对resistin、adiponectin及leptin等脂肪因子的显著变化，可能与时间尚不够长有一定关系。水飞蓟宾目前已广泛用于脂肪肝的治疗，显示出较好

9、的疗效，而ms人群脂肪肝的患病率可高达70%，因此ms患者用水飞蓟宾治疗可能在这方面更多获益，此外，水飞蓟宾不良反应轻微，依从性较好。因此，水飞蓟宾治疗ms是一个值得深入研究的方向。以后更大样本量和更长时间的研究，同时结合研究胰岛素信号通路和炎症作用通路的变化，可能会更深入阐明水飞蓟宾对ms人群胰岛素敏感性与脂肪因子的作用及其机制。1 对象与方法1.1 研究对象根据2005年adf关于ms定义的全球共识标准5，选择ms病例15例，年龄3660岁，男8例，女7例。已明确诊断为糖尿病者除外，其他排除标准包括：孕妇或哺乳期女性;手术或其他应激情况下的患者;合并严重肝、肾功能损害者;合并严重心脑血管病

10、患者;合并甲状腺疾病患者;合并各种急性感染性疾病患者。对照组选择糖耐量、血脂、血压及肝肾功能均正常的健康志愿者20例，男11例，女9例，年龄3660岁，年龄、性别等与ms组相匹配。1.2 药物治疗采用自身对照研究方法，15例ms患者给予水飞蓟宾胶囊(商品名：水林佳，天津天士力制药股份有限公司生产，批准文号：国药准字h20040299)70 mg口服治疗，一日3次，疗程12 w。所有研究对象均给予同样的生活方式干预，包括饮食控制和运动。饮食方案由本院固定营养师统一制定，主要依据中国居民膳食指南推荐的原则，结合不同个体具体情况制定适合、基本可行的方案。运动控制主要为轻到中度的有氧运动，每天晚餐后散

11、步1 h或慢跑半小时，每周至少运动5 d;或者打羽毛球、乒乓球、游泳、跳操等运动每次1 h，每周12次。治疗期间每2 w复查1次肝功能，如出现肝功能持续升高至正常值2倍以上者，立即终止试验。1.3 高胰岛素正常血糖钳夹试验 所有受试者均于治疗前和治疗12 w后进行高胰岛素正常血糖钳夹试验6。操作方法：试验前3 d，受试对象每日进食至少250 g碳水化合物饮食，维持体重稳定。试验前一晚8点钟后禁食，试验当天上午8点钟排空小便后平静卧床。分别于两侧上肢建立静脉通道，一侧上肢置于温度为(45±3)的恒温套中以获得动脉化静脉血样，输注生理盐水以维持取血，另一侧用于输注20%葡萄糖液和胰岛素溶

12、液。在钳夹试验开始10 min内输注负荷量胰岛素溶液(novolin r，40 u/ ml，丹麦novo公司)，使血浆胰岛素水平迅速升高，随后140 min内以40 mu·m-2·min-1速率持续输注，在此期间，每5 min测定一次动脉化的静脉血葡萄糖。结合defronzo的体表面积推荐值，根据负反馈原则，调整葡萄糖液输注率，使血糖值维持于目标水平5 mmol/l。钳夹期间每10 min取血测定胰岛素，每30 min取血标本测c肽和皮质醇。计算钳夹过程中120150 min(稳态期)的m，作为评价ir程度的指标。所有血样均离心分离血清，-20保存待测胰岛素、c肽及皮质醇。

13、试验结束后留取小便测定尿糖浓度。1.4 生化指标测定采用酶化学发光法测定胰岛素、c肽及皮质醇，试剂盒购自美国dpc公司。受试者取上午8时空腹及高胰岛素正常血糖钳夹试验中各时点的外周静脉血，离心分离血清标本，-20冻存，同批测定。采用葡萄糖氧化酶法测定血糖。受试者均于上午8时抽取空腹外周静脉血，抽血后即刻测定。血脂测定：甘油三酯(tg)、总胆固醇(tc)、高密度脂蛋白胆固醇(hdlc)及低密度脂蛋白胆固醇(ldlc)采用全自动生化分析仪测定。受试者均于上午8时抽取空腹外周静脉血，离心分离血清标本，-20冻存，同批测定。1.5 血浆脂肪因子测定受试者空腹取外周静脉血2 ml，离心3 000 r/m

14、in，5 min，取血浆于-80冻存同批待测。resistin、adiponectin、leptin的测定采用酶联免疫吸附法(elisa)，试剂盒购自phoenix pharmaceuticals.inc(美国)，严格按说明操作。1.6 统计学方法采用spss11.0统计软件包，数据以x±s表示，检验资料的正态性，不呈正态分布的资料进行正态性转换进行分析。两组间均数比较采用独立样本t检验，治疗前后均数比较采用配对样本t检验。2 结 果2.1 ms组与对照组临床资料与实验指标比较两组tc及ldlc无显著差异，ms组腰围(wc)、体重指数(bmi)、空腹血糖(fpg)、2 h血糖(2 h

15、 pg)、空腹胰岛素(fins)、tg等均显著高于对照组，hdlc明显低于对照组(p均<0.05)。高胰岛素正常血糖钳夹试验稳态时(120150 min)，ms组m显著低于对照组(p<0.01)。ms组与对照组血浆resistin水平无显著差异(p>0.05);ms组血浆leptin水平显著高于对照组，adiponectin水平显著低于对照组(p均<0.05)。见表1。表1 对照组及ms组治疗前后临床资料与实验指标比较2.2 ms组治疗前后临床特征变化治疗4 w后，其fpg、2 h pg、fins、tg、tc、hdlc、ldlc、bmi及wc等均无显著变化。治疗8 w后

16、，其tg与治疗前相比明显降低(p<0.05)，fpg、2 h pg、fins、tc、hdlc、ldlc、 bmi及wc等无显著变化(p>0.05)。治疗12 w后，tg、2 h pg及fins等与治疗前相比明显降低(p均<0.05)，bmi和wc有所降低，但与治疗前比较无显著差异(p>0.05)，fpg、hdlc、tc及ldlc 等与治疗前比较无显著变化。见表1。2.3 ms组治疗前后m变化2例患者退出，13例治疗前后m分别为(4.24±1.42)和(6.16±1.58)mg·kg-1· min-1，治疗前后差异显著(p<0

17、.05)，见表1。2.4 ms组治疗前后血浆脂肪因子变化与治疗前比较，治疗12 w后其血浆resistin、adiponectin及leptin水平均无显著性变化(p>0.05)，见表1。2.5 不良反应治疗期间，无明显不良反应发生，均能坚持服药治疗，分别于治疗4、8及12 w复查肝、肾功能均无明显异常。由于代谢综合征(ms)病因及发病机制仍未完全明了，目前尚无理想的治疗方法。新近研究认为，胰岛素抵抗(ir)、脂肪因子与氧化应激是其重要的致病环节1。既往研究表明2，3，ms患者的ir程度与血浆脂联素(adiponectin)、瘦素(leptin)及白介素18(il18)等脂肪因子水平变化

18、有关。水飞蓟宾是一种天然植物提取物，其主要药理机制是抗氧化应激，目前广泛用于各种肝病的治疗。水飞蓟宾通过抗氧化应激机制治疗肝脏损害的作用很明确，而有关其对胰岛素敏感性的临床研究报道甚少。在2型糖尿病(t2dm)合并慢性肝病患者中，水飞蓟宾治疗可以降低血糖，减轻ir4。水飞蓟宾对ms人群的胰岛素敏感性有无影响?其机制是否也与某些脂肪因子的变化有关?目前国内外鲜有报道。本研究采用评估ir的“金标准”高胰岛素正常血糖钳夹技术检测ms患者葡萄糖代谢率(m)，探讨水飞蓟宾对ms患者ir与adiponectin、resistin及leptin水平的影响。【参考文献】4 lirussi f，beccarello a，zanette g,et al.silybinbetacyclod