罗红霉素含量的荷移光谱法测定

1、罗红霉素含量的荷移光谱法测定    【关键词】  罗红霉素 7 7 8 8?菜那杌?对二次甲基苯醌 荷移反应 分光光度法    Spectrophotometric determination of roxithromycin     ABSTRACT  The charge transfer interactions between roxithromycin and 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ) were inv

2、estigated by spectrophotometry. The apparent molar absorptivity of TCNQ complex is 1.57×104 L/(mol?cm) at 743nm, and 2.93×104 L/(mol?cm) at 844 nm; the result obeys Beers law in the concentration range of 055 mg/L. The relative standard deviation of the method is 1.0% (n=6). The compositio

3、n of complex of roxithromycin with 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane is 12. This proposed method has been applied to the determination of roxithromycin in tablets with satisfactory results.    KEY WORDS  Roxithromycin;  7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ);  Charge?tr

4、ansfer reaction;  Spectrophotometry     荷移反应是指由富电子和缺电子物质形成电荷转移络合物的反应，基于某些物质生成的荷移络合物具有特定的颜色、最大吸收波长等特性，可测定物质的含量。利用荷移光谱法可测定药物19、尼古丁10、有机溶剂中微量水11，12含量等，由于此法简便、快速，试剂稳定，重现性好，因此在药物分析上有广泛的应用前景。罗红霉素为大环内酯类抗生素，主要作用于革兰阳性菌、厌氧菌、衣原体等。目前测定罗红霉素的方法有效价法13、伏安法14、SP法15、HPLC法16等， 但未见文献报道以7，7，8，8?

5、菜那杌?对二次甲基苯醌(TCNQ)为荷移试剂测定罗红霉素。本文应用分光光度法研究了TCNQ与罗红霉素的荷移反应，确定了利用该反应测定罗红霉素含量的分析方法，并成功地用于药物中罗红霉素含量的测定，与药典法对照，测定结果准确。    1  实验部分    1.1  主要试剂与仪器    TCNQ(Sigma公司产品)丙酮溶液： 5.0×10-3mol/L；标准罗红霉素(罗红霉素对照品，购自中国药物生物制品检定所)：1.0×10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、无水乙醇、丙酮

6、、氯仿等有机试剂均为分析纯。罗红霉素片(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号05011251；江苏亚邦爱普森药业有限公司，批号0411129)。实验用水均为二次蒸馏水。    UV?2401PC型紫外可见分光光度计(日本岛津)；HHS?21?Ni型恒温水浴(北京靖卫科学仪器厂)。    1.2  实验方法    准确移取一定量罗红霉素(1.0×10-4mol/L丙酮溶液)于10ml比色管中，加入5.0×10-3mol/L TCNQ丙酮溶液2.00ml。用丙酮稀释至刻度，摇匀后于30

7、反应20min，冷却至室温，用对应试剂空白为参比，用1cm比色皿分别在743和842nm处测吸光度。    2  结果与讨论    2.1  罗红霉素吸收光谱    按1.2实验方法配制溶液，以相应的试剂空白为参比，绘制吸收光谱。试验表明，罗红霉素与TCNQ形成的络合物分别在波长743、844nm处有两个吸收峰，试剂在此波长范围内吸收较小，罗红霉素在此波长范围内无吸收(Fig.1)。    2.2  反应温度的影响  

8、0; 分别在1060恒温一定时间后测量荷移络合物的吸光度，研究温度对荷移反应的影响。试验表明，反应的最佳温度为30。    2.3  反应时间的影响    控制反应温度为30，分别选择反应时间为1050min，测定溶液吸光度，研究反应时间对生成络合物的影响。试验表明，最佳时间为20min。络合物在室温下放置，120min内溶液的吸光度稳定。    2.4  试剂用量的影响    改变试剂用量，研究试剂用量对反应的影响。实验表明，随着试剂用量的增加，荷移络合

9、物的吸光度增大，当试剂用量达到一定时，溶液的吸光度基本保持不变，说明荷移反应趋于完全。适宜试剂用量为2.00ml。    2.5  溶剂的影响    分别用甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等作溶剂，研究溶剂对反应的影响。实验表明，以丙酮作溶剂为好，其荷移络合物吸光度最大且稳定。    2.6  方法的重现性    移取6份罗红霉素进行测定，测定结果的相对标准偏差为1.0%，说明方法重现性较好。    2.7  络合物组成的

10、测定    应用等摩尔连续变化法和平衡移动法测得罗红霉素与TCNQ反应生成的荷移络合物的组成比均为12(Fig.2，Fig.3)。    2.8  反应机理    TCNQ是缺电子试剂，罗红霉素是一种富电子物质，其氮原子上的孤对电子能够与7，7，8，8?菜那杌?对二次甲基苯醌形成n?拨行秃梢坡绾衔铮?根据测得络合物组成比为12，推测其形成机理见Fig.4。百事通     C (Roxithromycin)+(TCNQ)=1.0×10-3mol/L 

11、;   Fig.2    The determination of the comples formation by    the continous variation method of equivalent mole    C (Roxithromycin)=1.0×10-4mol/L;    C (TCNQ)=1.0×10-3mol/L    Fig.3    The

12、determination of the comples formation by    the equilibrium movement methodFig.4           2.9  标准曲线    按实验确定的最佳条件配制溶液并进行反应，在各自的最大吸收波长下测定荷移络合物的吸光度，将测得的数据作统计处理，绘制工作曲线，得到回归方程及线性范围，结果见Tab.1。    3 

13、样品的测定    3.1  样品的准备    取不同厂家生产的罗红霉素各10片(标示量均为每片150mg)，精确称量后研磨混匀，然后准确称取总量的十分之一，用丙酮溶解，过滤，弃去不溶物。滤液于100ml容量瓶中定容备用。    3.2  样品的测定    取适量上述制备好的样品试液于10ml比色管中，按实验方法在max处进行测定，另按药典方法测定相同药物制剂含量，并用标准加入法作回收率实验。结果表明制剂中辅料对测定基本无影响(Tab.2)。 【参

14、考文献】  1 Feng Y, Zhao F L, Tong S Y. The charge transfer reaction between chlorpheniraminum and 7,7,8,8?tetracyanoquinodemethane J. Chin J Anal Chem(分析化学),2003,31(11):13272 Wang M, Liu Z Y, Cui C Y. Determination of pipemidic acid by charge?transferred spectral method J. Chin J Anal Chem(分析化学),2

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