微波辅助提取-高效液相色谱法测定蔬果中的Vc含量2011版

1、 关系（A=38228c/mg L-1-16642， R2=0.9988） 。与校准曲线对比后得出，小西红柿、桔子、西红 柿的 Vc 含量分别为 24.96mg/100g、12.31mg/100g、6.754mg/100g。 3.2.2 系统误差分析。Vc标准溶液的用1mol/L乙酸配制，Vc在酸性环境 (pH3.44.5溶液中比在 碱性溶液中较为稳定4，但仍有部分被氧化的可能，这会造成标准溶液实际所含的Vc量低于标识 值，从而导致测定值偏高。另一方面，在样品预处理过程中，部分Vc会被空气中的氧气氧化破 坏，从而导致测定值偏低。 3.2.3 液相色谱法中常用的定性方法有保留值定性和与结构表征检

2、测器联用；常用的定量方法有 归一法、校准曲线法、内标法和标准加入法等。本实验采用校准曲线法定量，优点是绘制好校准 工作曲线后测定工作就变得相当简单， 可直接从校准工作曲线上读出含量， 因此特别适合于大量 样品的分析。不足的是，校准曲线法受分析色谱条件的影响很大，容易出现很大的误差，因此实 验时要特别注意色谱条件的控制。 3.2.4 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液-固吸附色谱法、 液-液分配色谱法 （正相与反相） 、 离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。高效液相色谱分析方法的建立，应考虑两个 方面的因素：选择合适色谱柱。色谱柱是液相色谱分析的核心组件；根据分析对象的性质选取 合适

3、的色谱柱，如正相色谱柱、反相色谱柱、离子交换色谱柱等。流动相。在选择溶剂时，溶 剂的极性是选择的重要依据。 选择流动相时应注意的几个问题。 a.尽量使用高纯度试剂作流动相， 防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。b. 避免流动相与固定相发生作用而使 柱效下降或损坏柱子。 c. 试样在流动相中应有适宜的溶解度， 防止产生沉淀并在柱中沉积。 d. 流 动相同时还应满足检测器的要求。 3.2.5 物质的提取方法可以采用传统索氏抽提法， 如从茶叶中提取咖啡碱。 索氏抽提法需经提取、 纯化、 分析等诸多步骤， 耗时长， 正逐步被一些快速、 低溶剂消耗、 自动化的技术所代替。 其中， 微波辅助

4、提取技术是诸多技术中发展较快的一项技术。 由于微波具有穿透到物质内部的本领， 能 做到被加热的物体里外同时加热，这就大大缩短了加热时间。微波的这种加热速度快、均匀特点 使得使用微波辅助提取技术时， 消耗时间比传统方法明显减少了， 同时成品消耗、 原料、 工作量、 试剂量等都有显著的减少5，故本实验使用微波辅助提取法提取水果样品中的Vc，以缩短实验时 间并提高分析速度和效率。 3.2.6 常用的色谱法主要有气相色谱法和液相色谱法。其中气相色谱需要在高温下进行，流动相 为有限的几种“惰性”气体，主要适用于沸点较低、反应活性较差、热稳定性很好的物质，因此蔬 果中 Vc 不能选用气相色谱进行分析。 本

5、实验采用高效液相色谱法，该方法具有检测灵敏度高、检测速度快、分辨率高、试样用量少等 优点，适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。本实验是为了测定水果中Vc的含 量， 由于Vc的熔点为190192， 很难挥发， 又在水果中含量比较低， 适宜使用液相色谱法分析。 3.3 结论 微波辅助提取-高效液相色谱法测定蔬果中的 Vc 含量，具有试剂用量少、灵敏度高、操作简 单、分析速度快、结果准确等特点，是一种合理有效的检测方法。 4. 参考文献 1 郑集，陈钧辉. 普通生物化学(第三版M. 北京：高等教育出版社. 1998， 236-239 2 陈六平，邹世春. 现代化学实验与技术. 北京：科学出版社，2007 3 孙义. 水果和蔬菜中维生素C含量的测定方法综述. 天津化工，2008，22(3:58-59 4