血库标准操作规程

1、市A人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 004版本/修改状态B/0第1页共1页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01卡式ABO、抗D血型鉴定标准操作程序1.目的：检测受检者红细胞外表有无 A或B、D抗原。2适用围：适用于本科日常工作中ABO正定型、抗D血型鉴定试验。3职责：输血科全体工作人员。4.溯源：见操作说明书。5操作程序：本实验用“博迅生物技术 XX公司提供的coombs卡。适用抗原抗体反响与 凝胶分子筛技术相结合检测红细胞 A、B、D抗原，适用于抗凝血。5.1 实验原理：这是抗原抗体反响与凝

2、胶分子筛技术相结合的产物。通过调节葡聚糖凝胶的浓 度来控制分子筛孔径大小，使分子筛只允许游离分子通过，从而到达别离凝集 红细胞和游离红细胞的目的。即将红细胞和血清加在凝集的上部反响离心以 后，凝集红细胞将受到凝胶的阻碍而停顿在凝集的上部或凝胶中，那么证明发生凝集反响为阳性，反之判断凝集反响为阴性。5.2 实验试剂：5.2.1 Coombs#每份标本用4孔。6.测定步骤：6.1 在A、B、D孔分别参加已配制的3%病人红细胞悬液25ul或1滴。6.2 离心，定时9分钟。6.3 结果判断见原理。6.4 考前须知：6.4.1 结果不明显时，或有拖尾现象，应用试管法核查，并核查何种疾病的病人标 本，找出

3、原因6.4.2 实验前应将卡离心。. word.zl-市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 005版本/修改状态B/0第1页共1页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01Rh血型鉴定标准操作程序i.目的：检测待检红细胞上有无D抗原。2适用围：适用于本科急诊Rh血型鉴定试验。3职责：输血科全体工作人员。4 .溯源：全国临床检验操作规程第三版。5 .操作程序：本实验用“博迅生物技术 XX公司提供的RhDIgM血型定型试剂盒单 抗隆抗体检测红细胞上有无 D抗原。6 .实验原理：用的标准血清抗D检测待检红

4、细胞上有或无 D抗原。临床上凡带有D抗 原者，称为Rh阳性。不带D抗原者，称为Rh阴性。7 .试剂：抗D标准血清。8 .操作：8.1.1 取小13c管1支，力口 2d抗D血清，再加2d 35%红细胞悬液。8.1.2 900G离心 15 秒。9.结果观察：假设有凝集，那么说明受检者红细胞上有 D抗原，Rh阳性。假设无凝集，那么说明受检者红细胞上无 D抗原，Rh阴性。9.1 考前须知：抗D标准血清应保存于28c冰箱。市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 006版本/修改状态B/0第1页共1页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-2

5、0实施日期2013-01-01ABO血型反定型鉴定标准操作程序1、目的：检测受检者血清中有无抗A,抗B抗体2、适用围：适用于本科日常工作中 ABO血型反定型3、职责：输血科全体工作人员。4、溯源：全国临床检验操作规程（第三版）.5、操作程序：（试管法）本实验用博迅生物技术XX公司提供的人ABO反定型红细胞试剂盒。5.1 实验原理：用的红细胞检测受检者血清中有无抗 A,抗B抗体,根据血清中有 无抗A,抗B抗体将血型分为A型.B型.博迅生物技术XX公司AB型及O型4种.5.2 试剂组成：A.B.O红细胞5.3 测定步骤：5.3.1 将抗凝血离心5.3.2取小试管3支.分别标上A.B.O5.3.3在

6、上述小试管中分别参加 A.B.O红细胞悬液2d和已离心好的受检者血清2d.5.3.4 900G离心15秒，观察结果.5.3.5结果观察受检者血型-受检者血清+试验红细胞A细胞B细胞O细胞A型一+一B型+一一O型+一AB型一一一注：+ :凝集；-：不凝集5.3.6考前须知：如果凝集很微弱或结果不明显，应重复做市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 007版本/修改状态B/0第1页共2页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01凝聚胺配血标准操作程序1.目的：为规凝聚胺试验的技术操作，保证试验结果准确，依

7、据？输血实验室管理程序？4.1.81条款的要求制定本规程。2适用围：适用于医疗机构输血科采用凝聚胺法进展血型血清学试验。3.职责：医疗机构输血科技术人员负责凝聚胺法血型血清学试验。4 .溯源：见试剂操作说明书。5 .操作程序:本实验用“天一生物技术研究所提供的聚凝胶胺试剂盒。6.1 原理：凝聚胺法是利用低离子介质（LIM）来降低介质的离子强度，进而减少红细 胞之间距 ,以促进红细胞和血清（血浆 ）中的抗体及生物特异性结合,接着参加凝聚胺（Polybrene）使红细胞间发生非特异性凝集，最后参加重悬液 （resupending）!之中和凝聚胺（Polybrene所引发的非特异性凝集，倘假设没有

8、凝集发生,那么判定为阴性;假设有凝集,那么得知存在特异性之抗原抗体反响 ,那么判为阳性。6.2 .试剂盒组成:8.1 LIM （low lonic trength medium）氐离子介质溶液 8.2. POLYBRENCE 凝聚胺8.3 RESUSPENDING 重悬液8.4 POSITIVE CONTROL 阳性对照6.3穿插配血实验:6.3.1 取小试管2支标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2d,加供血者35%红细胞 悬液（洗涤或不洗涤均可）2d次侧管反之6.3.2 各力口 LIM0.7ml,混合均匀后，再各加polybrene溶液2d,并混合均匀。6.3.4 1000G离心15秒，然后

9、把上清液倒掉不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。6.3.5 轻轻摇动试管，目侧红细胞有无凝集。如无凝集，那么必要重做。6.3.6 最后参加resuspending2d轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在10930秒凝集散开，代表是由polybrene引起的非特异性凝集配血结果相对；如凝集不散开,那么为红细胞抗原抗体结合的特异性反响,配血结果不相对。如反响可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。7. 考前须知 :7.1 假设病人血清含肝素高那么应参加双倍量的 POLYBRENE 液中和肝素。7.2 试剂使用前,应恢复室温再做。7.3 由于某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素,而导致假阳性的结果

10、出现。假设有疑心,建议在最后滴入RESVSPENDING 液时 ,将试管立即置入37水浴中,轻轻转动试管混合,并在 30秒观察结果。. word.zl-. word.zl-市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 008版本/修改状态B/0第1页共2页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01手工配血系统穿插配血试验标准操作程序1.目的：为规微柱凝胶卡在血型血清学试验中的应用，保证试验结果的准确性和有效性，依据？俞血实验室管理程序？4.1.81条款的要求制定本规程。2适用围：适用于输血科采用微柱凝胶卡进

11、展血型血清学试验。3职责：医疗机构输血科技术人员负责微柱凝胶卡在血型血清学试验中的应用。4.溯源：见操作说明书5操作程序：本实验用“博迅生物技术XX公司提供的bs卡1.1 原理：本实验是抗原抗体反响与凝胶分子筛技术相结合的产物。 通过调节葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小， 使分子筛只允许游离分子通过， 从而到达别离凝集红细胞和游离红细胞的目的。 血清和红细胞发生凝集的受到凝胶阻碍的而停顿在微管的上端， 反之那么红细胞沉在微管的底部， 通过有无凝集而判断穿插配血试验可否配合。1.2 试验准备：凝胶卡处理：实验前，将新的 bs 卡离心。使微柱壁上端粘有的凝胶离心下来。1.3 实验步骤：1.3.

12、1 平行向后撕拉Diana Gel bs卡上端的锡纸膜，直至所需孔完全露出为止。1.3.2 在主侧孔悬空参加献血员1%红细胞悬液50ul,病人血浆25ul1.3.3 在次侧孔悬空参加病人1 %红细胞悬液50ul,献血员血浆25ul。1.3.4 在病人自身对照孔参加病人1 %红细胞悬液50ul,病人血浆25ul。1.3.5 在Diana孵育器37c下孵育15分钟。1.3.6 将卡放到Dianafuge离心机中1100转/9分钟离心。1.3.7 离心完毕后在白色背景前观察结果。7 .结果判定：100的红细胞沉在微管的底部。+/-100的红细胞沉在微管的下端1/3 之。1+80的红细胞沉在微管的下端

13、2/3之。2+80的红细胞沉在微管的上端2/3之。3+80的红细胞沉在微管的上端1/3之。. word.zl-4+ 凝集的细胞全部处于微管的顶部8 . 注意：8.1 红细胞悬液不能超过1，防止假阳性。8.2 配制红细胞悬液时加样枪头应沿壁插到管底吸取压积红细胞，防止吸入白细胞和血小板，防止假阳性。8.3 受检血样要充别离心，防止纤维蛋白影响结果判断。. word.zl-市第一人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 009版本/修改状态B/0第1页共2页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01血型抗体效价检

14、测标准操作程序1 .目的：为规红细胞血型抗体效价测定的技术操作，依据？俞血实验室管理程序 方目关条款的要求制定本规程。2 .适用围：适用于医疗机构输血科测定IgG抗-A抗-B及IgG或IgM类红细胞不 规那么抗体效价，用以评估胎-母血型不适宜妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血 性疾病HDN的风险程度及其他临床需要。3职责：医疗机构输血科技术人员负责红细胞血型抗体效价的测定。5 .溯源：见全国临床检验操作规程第三版6操作程序：本实验用“博迅生物技术XX公司提供的谱细胞.6.1 原理：将血清经倍比稀释后与选定的红细胞进展反响，观察反响结果，以肉眼观察到“1 +的最后一个凝集管作为终点，终点血清稀释倍数

15、的倒数为抗体效价，此过程称为效价滴定。这是一种半定量的方法。7实验步骤7.1 倍比稀释：排列 10只小试管并编号，从第2 管开场每管加生理盐水0.1ml，第1、第2管各加待检血清0.1ml,第2管混匀后移出0.1ml转至第3管，第3管混匀后移出0.1ml转至第4管，以同样操作稀释至第10管，从第10管中吸出 0.1 弃去，或暂时保存在另一试管中，以备必要时作进一步稀释。这样从第1管到第10管的血清稀释度依次是1:1, 1:2,14,1:5127.2 向上述各试管中分别参加2%红细胞悬液0.1ml,混匀。7.3 处理并观察结果：一般情况下，盐水凝集试验可立即离心后观察，或置室温1 小时观察结果。

16、冷凝集素效价要置4 1 小时后观察结果。酶法、胶体介质法、抗球蛋白法等根据方法本身进展孵育或离心后观察结果。7.4 某些血清里存在同一特异性IgG 和 IgM 抗体， 常用巯基试剂处理法将两者区分。7.5 结果判定 ：0. 无凝集，无溶血，全是游离细胞，用显微镜观察+/- 微小凝集块，肉眼很难看清，背景浑浊，用显微镜观察1+ 很小的凝集块，肉眼可见，背景不透明，游离细胞较多。2+ 许多小凝块，肉眼可见，大小均匀，背景根本透明，有游离细胞。3+ 数个大凝块，背景透明，无游离细胞。4+ 一个大凝块，背景透明，无游离细胞。7.6 注意 ：8.1 在稀释过程中，习惯上是不更换吸管的。这与更换吸管的结果

17、将不一样。8.2 假设血清要分别和几种红细胞作用，要将血清做总稀释，然后分别移同样实. word.zl-验量到几个试管中，可以减小误差。8.3 试验结果可能出现前带现象。应适当增加稀释倍数方可防止。8.4 同一份血清重复滴定，结果可能不同，假设只有稀释度的差异且前后 1 管之差，属于正常误差围。. word.zl-市A人民医院临床输血质量管理体系技术性规程文件编号zjsdyrmyysxkCBT/ SOP 010版本修改状态B/0第1页共2页编制者伟审核者鹏批准者蔡玲发布日期2012-12-20实施日期2013-01-01不规那么抗体筛选及鉴定标准操作程序1 .目的：为规红细胞不规那么抗体筛选、

18、鉴定的技术操作，保证检测结果及临床输血 平安有效，依据？俞血实验室管理程序方目关条款的要求制定本规定。2 .适用围：适用于医疗机构输血科筛选及鉴定红细胞不规那么抗体。3 .职责：输血科技术人员负责红细胞不规那么抗体的筛选及鉴定。4 .溯源:全国临床检验操作规程（第三版）.5 .操作程序：本实验用“博迅生物技术XX公司提供的bs卡和“博迅生物 技术XX公司提供的谱细胞，对不规那么抗体筛选试验阳性患者， 作抗体鉴定 试验，确定其特异性。5.1 实验原理：本实验是抗原抗体反响与凝胶分子筛技术相结合的产物。用的标准谱细胞与患者血浆消反响后，观察在凝胶分子的位置，判断有无相应抗体。5.2 试剂盒组成：5.2.1 谱细