变应性鼻炎大鼠模型的建立_宋建明

1、文章编号1671-587(201206-1152-04收稿日期2012-05-06基金项目福建省莆田市科技局科研基金资助课题(2010G 06;莆田学院创新实验项目资助课题(2010P 11352作者简介宋建明(1988-,男,福建省莆田市人,医学本科,主要从事变应性鼻炎的发病机制方面的研究。通信作者张敏(T e l E -m a i l :z m 5995s i n a .c o m 变应性鼻炎大鼠模型的建立宋建明1,黄秀清1,林燕惠1,张敏2(1.莆田学院医学院临床医学系,福建莆田351100;2.莆田学院医学院生理学教研室,福建莆田351100摘要目的:建立变

2、应性鼻炎(A R W i s t a r 大鼠模型,探讨呼吸道变应性炎症的发病机制,为临床治疗A R 提供实验依据。方法:将30只W i s t a r 大鼠随机分成模型组、正常组和地塞米松(D E X 组,每组10只。模型组大鼠经腹腔注射卵清蛋白(O V A 变应原,鼻腔滴入O V A 鼻内激发;正常组大鼠以生理盐水替代O V A ;D E X 组大鼠激发成A R 后再用D E X (0.2m L ·k g -1后肢肌肉注射,观察大鼠行为学症状;采用H E 染色和免疫组织化学染色法检测大鼠鼻黏膜组织学变化、嗜酸性粒细胞计数及其鼻黏膜免疫球蛋白E (I g E 的吸光度(A 值。结果

3、:模型组大鼠均出现鼻痒、喷嚏和流清涕等A R 的临床特征,大鼠鼻黏膜可见大量的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润,黏膜水肿增厚、腺体增生、分泌旺盛和鼻黏膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。正常组大鼠仅轻度抓鼻,且喷嚏少。D E X 组W i s t a r 大鼠小血管无明显扩张,黏膜厚度较模型组明显降低,炎性细胞浸润程度减轻。模型组和D E X 组大鼠嗜酸性粒细胞计数及其A 值均高于正常组(P <0.05,D E X 组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数及A 值均低于模型组(P <0.05。结论:成功建立O V A 变应原致敏的A R W i s t a r 大鼠模型。关键词变应性鼻炎;疾病模型,动

4、物;卵清蛋白;嗜酸性粒细胞;免疫球蛋白E 中图分类号R 765.21文献标志码A E s t a b l i s h m e n t o f a l l e r gi c r h i n i t i s m o d e l s o f r a t s S O N G J i a n -m i n g 1,HU A N G X i u -q i n g 1,LI N Y a n -h u i 1,Z HA N G -M i n 2(1.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l M e d i c i n e ,C o l l e g e o f M e d

5、i c a l S c i e n c e s ,P u t i a n U n i v e r s i t y ,P u t i a n 351100,C h i n a ;2.D e p a r t m e n t o f P h y s i o l o g y ,C o l l e g e o f M e d i c a l S c i e n c e s ,P u t i a n U n i v e r s i t y,P u t i a n 351100,C h i n a A b s t r a c t :O b j e c t i v e T o e s t a b l i s

6、h a l l e r g i c r h i n i t i s (A R m o d e l s o f W i s t a r r a t s ,a n d t o d i s c u s s t h e p a t h o g e n e s i s o f a l l e r g i c i n f l a m m a t i o n o f r e s p i r a t o r y t r a c t ,a n d t o p r o v i d e b a s i s f o r c l i n i c a l t r e a t m e n t o f A R.M e t h

7、 o d s 30W i s t a r r a t s w e r e r a n d o m l y d i v i d e d i n t o m o d e l g r o u p (n =10,n o r m a l g r o u p (n =10a n d d e x a m e t h a s o n e (D E X g r o u p (n =10.T h e r a t s i n m o d e l g r o u p w e r e i m m u n i z e d i n t r a p e r i t o n e a l l y w i t h o v a l

8、b u m i n (O V A ,f o l l o w e d b y i n t r a n a s a l a d m i n i s t r a t i o n o f O V A ;a n d t h e r a t s i n n o r m a l g r o u p w e r e a d m i n s t r a t e d w i t h s a l i n e i n s t e a d o f O V A ;t h e r a t s i n D E X g r o u p w e r e c h a l l e n g e d i n t o A R ,t h e

9、 n t h e y w e r e i n j e c t e d w i t h 0.2m L ·k g -1d e x a m e t h a s o n e m u s c l e o f h i n d l e g s .T h e b e h a v i o r a l s y m p t o m s ,h i s t o l o g i c a l c h a n g e s o f n a s a l m u c o s a ,t h e n u m b e r o f e o s i n o p h i l e g r a n u l o c y t e s a n

10、 d t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f I g E w e r e d e t e c t e d b y H E s t a i n i n g a n d i m m u n o h i s t o c h e m i c a l m e t h o d s .R e s u l t s T h e A R s y m p t o m s ,s u c h a s n a s a l i t c h i n g ,s n e e z i n g ,a n d r h i n o r r h e a o f t h e r a t s i n

11、 m o d e l g r o u p w e r e o b s e r v e d .T h e r e w e r e a l o t o f h i s t o l o g i c a l c h a n g e s ,s u c h a s e o s i n o p h i l e g r a n u l o c y t e s ,l y m p h o c y t e s ,e d e m a o f t h e m u c o s a ,g l a n d h y p e r p l a s i a ,s t r o n g s e c r e t i o n ,a n d

12、c i l i a d e s t r u c t i o n o n n a s a l s u r f a c e o f t h e r a t s i n m o d e l g r o u p .T h e r e w e r e o n l y m i l d g r a s p i n g n o s e a n d a s m a l l a m o u n t o f s n e e z i n g o f t h e r a t s i n n o r m a l g r o u p .T h e s m a l l b l o o d v e s s e l s o f

13、t h e r a t s i n D E X g r o u p h a d n o s i g n i f i c a n t e x p a n s i o n ,t h e m u c o s a l t h i c k n e s s w a s l o w e r t h a n t h a t i n m o d e l g r o u p a n d t h e d e g r e e o f i n f l a m m a t o r y c e l l i n f i l t r a t i o n w a s a l l e v i a t e d .T h e n u

14、m b e r s o f e o s i n o p h i l e g r a n u l o c y t e s a n d t h e i r A v a l u e s o f t h e r a t s i n D E X g r o u p a n d m o d e l g r o u p w e r e h i g h e r t h a n t h o s e i n n o m a l g r o u p (P <0.05.T h e n u m b e r o f 2511第38卷第6期2012年11月吉林大学学报(医学版J o u r n a l o f J i

15、 l i n U n i v e r s i t y (M e d i c i n e E d i t i o n V o l .38N o .6N o v .2012e o s i n o p h i l eg r a n u l o c y t e sa n di t sAv a l u eo ft h er a t si nD E Xg r o u pw e r el o w e rt h a nt h o s ei nm o d e lg r o u p(P<0.05.C o n c l u s i o nT h eA Rr a tm o d e li n d u c e db

16、yO V Ai se s t a b l i s h e ds u c c e s s f u l l y.K e yw o r d s:a l l e r g i cr h i n i t i s;d i s e a s em o d e l,a n i m a l;o v a l b u m i n;e o s i n o p h i l eg r a n u l o c y t e s;i m m u n o g l o b u t i n变应性鼻炎(a l l e r g i cr h i n i t i s,A R是发生在鼻黏膜的变态反应性疾病,是主要由I g E介导的I型变态反应。

17、A R是变应原致敏激发产生一系列生化反应,导致黏膜的各种病理改变,包括毛细血管通透性增高、黏膜水肿、多形核细胞和单核细胞浸润的一种慢性鼻黏膜炎症性疾病。近几十年来,由于人们生活方式的改变和环境污染的加重,该病的发病率呈现逐年上升的趋势1。A R发病机制十分复杂,国内外众多学者对A R的研究2-4均是通过实验性动物模型实现的。豚鼠是最早被用来建立变应性模型的动物,早在1988年T a n a k a等5就利用甲苯二异氰酸酯建立豚鼠A R模型。本研究以W i s t a r大鼠为研究对象,通过注射卵清蛋白(o v a l b u m i n,O V A变应原致敏,观察大鼠行为学表现和组织学的改变,

18、旨在制备实验性A R模型,为进一步探讨呼吸道变应性炎症的发病机制及临床研究提供基础。1材料与方法1.1动物、主要试剂及仪器30只健康W i s t a r 大鼠购自福建医科大学实验动物中心,S P F级, 56周龄,体质量120150g,随机分为正常组、模型组和地塞米松(d e x a m e t h a s o n e,D E X组,每组10只。实验动物分笼饲养,饲以标准颗粒饲料,在空调动物房饲养,饲养房避免过敏原存在,早晚12h间断照明,温度保持在1825。O V A (美国S i g m a公司;氢氧化铝、10%水合氯醛(北京化学试剂公司;D E X注射液、I g E(美国R&D

19、公司;S P二步法试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司;D A B显色试剂(北京中杉金桥生物技术有限公司;光学显微镜(上海仪圆光学仪器有限公司;可调移液器(芬兰F i n n p i p e t t e D i g i t a l公司;5m L注射器、电子天平(英国A1003P h a r m a c i aB i o t e c h公司。1.2动物分组及给药6-7基础致敏过程:模型组,0.3m gO V A加15m gA l(O H3混于1m L 生理盐水中,按大鼠体质量隔日行腹腔注射,共14d;正常组,以等量生理盐水替代O V A混悬液,按大鼠体质量隔日行腹腔注射,共14d;D E X组,

20、基础致敏的方法和步骤同模型组。激发阶段:模型组,以0.1g·L-1O V A每日滴鼻维持过敏状态,共7d;正常组,用生理盐水代替O V A 每日滴鼻,共7d;D E X组,用0.1g·L-1O V A 每日滴鼻,同时用0.2m L·k g-1D E X后肢肌肉注射,共7d。1.3大鼠A R模型成功判定标准通过激发实验,模型大鼠会出现打喷嚏、挠鼻、抓脸和鼻溢等症状。赵秀杰等8在给药后30m i n内对上述症状建立了评分系统。鼻痒:轻度为1分,轻擦鼻几次;重度为2分,抓挠鼻、面不止,到处擦磨。喷嚏: 13个为1分,410个为2分,11个以上为3分。清涕:流到鼻前孔为1

21、分,过鼻前孔为2分,流涕满面为3分。以叠加法记录总分,总分超过5分即为建模成功。1.4A S标本制备大鼠末次激发24h后,用10%水合氯醛(300m g·k g-1行腹腔注射,麻醉后将大鼠心脏放血处死,迅速打开鼻背,剥去上颌骨部皮肤,沿右侧鼻中隔外侧前庭壁剪断,向上翻开暴露鼻中隔和双侧鼻腔,取双侧鼻中隔黏膜,固定于10%中性甲醛溶液中过夜后,先后放在20%和30%蔗糖溶液中分别过夜,然后制成切片,进行免疫组织化学染色。1.5免疫组织化学染色观察各组大鼠嗜酸性粒细胞采用S P法染色,切片经常规脱蜡、水化, 3%H2O2室温10m i n,微波抗原修复10m i n,冷却,P B S冲洗

22、,非免疫血清封闭20m i n,P B S冲洗,加一抗(I g E12004过夜;滴加生物素化二抗室温静置20m i n,P B S冲洗,滴加100L 新配制的D A B液,显微镜下观察,显色约2m i n、双蒸馏水冲洗、苏木精复染、脱水、透明和封片,光镜下观察各组大鼠嗜酸性粒细胞计数及其I g E的吸光度(A值。1.6免疫组织化学法测定I g E吸光度(A值采用免疫组织化学法检测各组大鼠反应切片中选取的形态典型的对应切面,所得图像经S i m p P C I图像分析系统分析。在不同鼻黏膜切片间测量相同解剖结构区,每一解剖区各测5个点,每个测量点测量的像素量(即被测量面积保持一致。以上每个解剖

23、区测量值总和的平均值即为鼻黏膜结构区域的最终A值,通过A值间接反映大鼠鼻黏膜表面3511宋建明,等.变应性鼻炎大鼠模型的建立I g E的表达水平。1.7统计学分析采用S P S S10.0统计软件进行数据分析。各组大鼠行为学评分、鼻黏膜嗜酸性粒细胞计数及其I g E的A值以x±s表示,组间比较采用单因素方差分析。2结果2.1各组大鼠行为学表现模型组10只W i s t a r 大鼠打喷嚏均多于11个,持续抓鼻,脸部布满鼻分泌物,总评分>5分。D E X组大鼠致敏期和激发第1次开始出现明显的抓鼻、打喷嚏和流鼻涕症状,总评分>5分,激发后期,症状逐渐缓解;D E X组大鼠的鼻

24、喷嚏平均次数较模型组的鼻喷嚏平均次数明显减少。正常组10只W i s t a r大鼠仅有轻度抓鼻,且喷嚏少,总评分<5分。各组大鼠症状评分变化见表1。表1各组大鼠行为学症状评分T a b.1T h eb e h a v i o rs y m p t o ms c o r e so fr a t si nv a r i o u sg r o u p s(n=10,x±sG r o u pS y m p t o ms c o r e(t/d1234567N o m a l0.40±0.510.59±0.650.60±0.661.00±1.02

25、0.70±0.780.80±0.781.10±0.89 M o d e l4.98±0.57*5.60±0.54*5.00±1.29*6.20±0.66*6.60±0.76*7.00±0.83*7.10±0.99* D E X4.97±0.46*4.89±0.88*4.40±1.10*3.96±0.98*3.78±0.76*3.12±0.87*3.17±0.21*P<0.05c o m p a r e dw i t hn

26、 o m a lg r o u p;P<0.05c o m p a r e dw i t hm o d e lg r o u p.2.2各组大鼠鼻黏膜组织学表现模型组大鼠鼻黏膜组织中有大量嗜酸性粒细胞和其他炎性细胞浸润,上皮细胞有脱落,杯状细胞化生、肥大,黏膜间质水肿增高,腺体增生肥大、分泌旺盛且鼻黏膜表面纤毛破坏等。正常组大鼠鼻黏膜上皮完整,呈柱状排列,未见嗜酸性粒细胞和其他炎症细胞浸润。D E X组大鼠小血管无明显扩张,黏膜厚度较模型组明显降低,炎性细胞浸润程度减轻。见图1 (插页三。2.3各组大鼠嗜酸性粒细胞计数和鼻黏膜I g E表达平均A值模型组和D E X组大鼠嗜酸性粒细胞计数

27、和A值均高于正常组(P<0.05;D E X组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数和A值低于模型组(P<0.05。见表2和图2(插页三。表2各组大鼠鼻黏膜嗜酸性粒细胞计数和I g E表达A值T a b.2T h en u m b e r so fe o s i n o p h i l eg r a n u l o c y t e sa n dA v a l u e so fI g Eo fr a t si nv a r i o u sg r o u p s(n=10,x±sG r o u pN o.o fe o s i n o p h i l eg r a n u l c o y

28、 t e sAv a l u eo fI g EN o m a l0.45±0.5622.46±1.46M o d e l11.78±2.24*39.56±4.58*D E X7.12±2.12*25.34±4.43*P<0.05c o m p a r e dw i t hn o m a lg r o u p;P<0.05c o m p a r e d w i t hm o d e lg r o u p.3讨论建立有效可行的大鼠A R模型,可以更有效地研究该疾病的发病机制,克服人体实验的局限性。目前国内外制备A R模型尚未

29、统一和标准化,造模使用的致敏原、免疫佐剂致敏和激发的方法、途径和试剂等也不完全相同。致敏原有真菌性抗原致敏9、豚草花粉变应原致敏10等。本实验中模型组大鼠经O V A长期刺激,产生过敏反应,使鼻部黏膜炎症长期存在,促进了I g E的合成并使组织内嗜酸性粒细胞的数量增加11-13,表现为鼻黏膜组织中有大量嗜酸性粒细胞和其他炎性细胞浸润,上皮细胞脱落,杯状细胞化生、肥大,黏膜间质水肿加重,腺体增生肥大、分泌旺盛,鼻黏膜表面纤毛破坏等,鼻黏膜部的I g E的A值高于正常组。D E X 组大鼠中,D E X可抑制白细胞的黏附,降低免疫蛋白超家族黏附分子1/黏合素分子1(I C AM-1/ L F A-

30、1间相互作用,使A R的症状得到一定的缓解,同时D E X防止或抑制细胞介导的免疫反应,减少嗜酸性细胞的数目,使D E X组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数低于模型组,与模型组和正常组比较,D E X组大鼠的症状较轻,同时大鼠鼻黏膜部I g E的含量较模型组大鼠降低。通过动物疾病模型来研究人类疾病,可以观察到无法在患者身上进行实验的各种致病因素对人体的作用,同时还可克服人类疾病发生、发展缓慢,潜伏期长,发病原因多样,经常伴有各种其他疾病等因素的干扰,可以用单一的病因,在短时间内复制出典型的动物疾病模型。动物模型是研究人类各种疾病的发生、发展规律和疾病防治的重要工具之一。4511吉林大学学报(医学版

31、第38卷第6期2012年11月参考文献1K n i p p i n g S ,H o l z h a u s e n H J ,R i e d e r e r A ,e t a l .I m m u n o e l e c t r o n m i c r o s c o p i c f i n d i n g s i n p a t i e n t s w i t h a l l e r g i c r h i n i t i s J .L a r y n g o r h i n o o t o l o gi e ,2002,81(12:861-865.2顾之燕.呼吸道炎症反应J .中华耳鼻咽

32、喉科杂志,2001,36(5:397-399.3张罗,周炎,韩德民,等.变应性鼻炎研究进展(一:发病机制J .耳鼻咽喉头颈外科杂志,2003,10(5:316-320.4佘文煜,董震.实验性变应性鼻炎鼻黏膜组织的特点J .中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2006,41(1:48-53.5T a n a k a K ,O k a m o t o Y ,N a g a y a Y ,e t a l .A n a s a l a l l e r g yn o d e l d e v e l o p e d i n t h e g u i n e a p i g b y i n t r a n a s a

33、l a p p l i c a t i o n o f 2,4-T o l u e n e d i s o c y -a n a t e J .I n t A r c h A l l e r g y A p p l I m m u n o l ,1988,85(4:392-397.6赵宇,v a n H a s s e l t C A ,吴港生,等.卵白蛋白经鼻致敏建立变应性鼻炎动物模型J .中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2005,4(3:176-180.7R o b e r t J ,H o M ,J a c k A.A i r w a y r e m o d e l i n g i n a s

34、 t h m a :t h e r a p e u t i c i m p l i c a t i o n s o f m e c h a n i s m s J .P h y s i o l o g y ,2005,20(1:28-35.8刘建国,杨政,刘月辉.变应性鼻炎大鼠模型建造J .江西医学院学报,2008,48(5:33-34.9张志明.真菌性抗原致变应性鼻炎豚鼠模型建立J .中国耳鼻咽喉头颈外科,2005,12(5:313.10余洪猛,文三立.豚草花粉变应性过敏性鼻炎豚鼠模型的建立J .上海实验动物科学,2001,21(4:212.11孔红.细胞黏附分子和变应性鼻炎J .国外医学:

35、耳鼻咽喉科分册,1999,22(2:92-94.12W a t a n a b e T ,O k a n o M ,H a t t o r i H ,e t a l .R o l e s of f cg a m m a R I I B i n n a s a l e o s i n o phi l i a a n d I g E p r o d u c t i o n i n m u r i n e a l l e r g i c r h i n i t i s J .A m J R e s p i r C r i t C a r e M e d ,2004,169(1:105-112.13D

36、 i a r m e C W ,A n d r e w N J ,A u l i k k i M L ,e t a l .I n t e gr a t e d s i g n a l s b e t w e e n I L -13,I L -4,a n d I L -5r e g u l a t e a i r w a y s h y p e r r e a c t i v i t y J .J I m m u n o l ,2000,165(1:108-113.856株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析河南省南阳医学高等专科学校微生物学教研室(河南南阳473061包东武,满永宏1资料与方法

37、1.1标本来源2010年1月2011年12月从本院临床各科室送检痰液、创面分泌物、尿液、血液、前列腺液、引流液和穿刺液等标本分离出的金黄色葡萄球菌共856株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(m e t h i c i l -l i n -r e s i s t a n t s t a p h y l o c o c c u s a u r e u s,M R S A 共446株,检出率为52.1%。1.2细菌鉴定及药敏实验方法按全国临床检验操作规程,第3版进行细菌分离培养,菌种鉴定和药敏实验采用生物梅里埃公司细菌鉴定卡、G N 13药敏卡,V i t e k -2细菌自动鉴定系统。金黄色葡萄球菌

38、质控菌株为A T C C 25923标准株(购于卫生部临床检验中心。药敏实验结果分析采用WH O N E T 5.4软件。2结果与讨论M R S A 对万古霉素、利奈唑烷、替加环素和达托霉素敏感率为100%,对其他抗生素的耐药率由高到低依次为青霉素(100%、头孢唑林(100%、红霉素(95.8%、左氧氟沙星(85.4%、克林霉素(83.3%、环丙沙星(81.2%、头孢噻肟(79.3%、庆大霉素(75.6%、四环素(71.8%、阿卡米星(70.1%、复方新诺明(54.1%、亚胺培南(43.1%、夫西地酸(15.2%、呋喃妥因(13.4%、利福平(9.3%和强力霉素(8.7%。M R S A 是

39、院内革兰氏阳性菌感染的主要细菌,其感染率和临床分离率呈逐年上升趋势。2011年本院M R S A 检出率为52.1%,其中普通外科、呼吸科、脑外科和I C U 的检出率最高。M R S A 的甲氧西林耐药由m e c A 基因介导,该基因存在于葡萄球菌染色体盒(S C C m e c 侧面D N A ,编码青霉素结合蛋白2a (P B P 2a ,可以降低-内酰胺抗生素亲和力。P B P 2a 与固有青霉素结合蛋白2(P B P 2共同作用,使M R S A 在内酰胺抗生素的环境中合成细胞壁而对青霉素、头孢菌素和碳青霉烯类产生耐药。研究表明:M R S A 的耐药谱系与基因型间无相关性,因此不

40、能借助生化反应、药物敏感分析和其他生物学性状确定院内感染株的流行特征。但S C C m e c 的基因分型有助于这些菌株的同源性和相关性分析。有报道显示:亚洲地区S C C m e c 型和型发生频率占有优势,分别占M R S A 分离菌株的60.2%和33.6%。临床上万古霉素仍是M R S A 用药的首要选择,尤其用于M R S A 菌血症和心内膜炎的治疗。虽然近年来伴随M R S A 感染率和万古霉素临床使用率的上升,已经出现万古霉素耐药株的报道,但该现象明显存在地区性。此外,利奈唑烷、替加环素对M R S A 同样具有极好的抗菌活性,也是被美国食品和药物管理局批准的可用于成年患者皮肤和

41、软组织M R S A 感染(如深部软组织感染、外科手术创伤感染和烧伤治疗的抗生素。药物对比实验中发现:替加环素可能增加死亡风险,由于有多种抗M R S A 的有效替代抗生素,替加环素应尽量排除或慎重选用。已有的数据表明:利奈唑胺对M R S A 长期保持较低的最小抑菌浓度值,是万古霉素耐药M R S A 感染的良好替代药物,尤其用于医院获得性肺炎的治疗,具有良好的安全性和耐受性,也适用于新生儿和儿童M R S A 感染的治疗。达托霉素药效具有浓度依赖性,但在对比研究中发现:该药对M R S A 的抗菌活性最强,适用于万古霉素治疗无效的反复性M R S A 菌血症。本组检出的M R S A 对强

42、力霉素和利福平耐药率较小,可用于M R S A 感染的经验性口服抗生素治疗,但由于可能存在耐药株,在无病原和药敏实验数据的情况下,不适合单独用于治疗M R S A 感染。5511宋建明,等.变应性鼻炎大鼠模型的建立 图2各组小鼠中脑黑质i N O S 和I L -6免疫反应阳性细胞的形态F i g .2T h e m o r p h o l o g y o f i m m u n o r e a c t i v e p o s i t i v e c e l l s o f i N O S a n d I L -6i n t h e s u b s t a n t i a n i g r a

43、o f m i c e i n v a r i o u s g r o u p s A ,B ,C :i N O S ;D ,E ,F :I L -6;A ,D :C o n t r o l g r o u p ;B ,E :M o d e l g r o u p ;C ,F :R o s i g l i t a z o n e g r o u p;S c a l e b a r =100m.(s e e n o n p a g e 1126i n p a r a g r a ph 图3各组小鼠中脑黑质T H 免疫反应阳性细胞的形态F i g .3T h e m o r p h o l o g

44、 y of T H i m m u n o r e a c t i v e p o s i t i v e c e l l s i n t h e s u b s t a n t i a n ig r a o f m i c e i n v a r i o u s g r o u p s A :C o n t r o l g r o u p ;B :M o d e l g r o u p ;C :R o s i g l i t a z o n e g r o u p ;S c a l e b a r =50m.(s e e n o n p a g e 1126i n p a r a g r a

45、 ph 图1间歇性低氧6周后大鼠海马区磷酸化J N K 表达(免疫组织化学染色,×400F i g .1E x p r e s s i o n s o f p h o s p h o r y l a t e d J N K p r o t e i n s i n h i p p o c a m p a l r e g i o n o f r a t s 6w e e k s a f t e r i n t e r m i t t e n t h y po x i a (I m u n o h i s t o c h e m i s t r y s t a i n i n g ,

46、15;400A :C o n t r o l g r o u p ;B :M i l d i n t e r m i t t e n t h y p o x i a g r o u p;C :M o d e r a t e i n t e r m i t t e n t h y p o x i a g r o u p ;D :S e v e r e i n t e r m i t t e n t h y p o x i a g r o u p .(s e e n o n p a g e 1137i n p a r a g r a ph 图3T U N E L 法检测间歇性低氧6周后大鼠海马区凋亡神经细胞(×