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1、祛斑养颜阿胶黄精丸治疗黄褐斑的实验研究 摘要目的:探讨祛斑养颜阿胶黄精丸治疗黄褐斑的疗效和作用机制。方法:根据文献采用黄体酮肌注法复制黄褐斑实验动物模型,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、祛斑养颜阿胶黄精丸3个剂量组、3氢醌阳性对照组,每组10只。动物皮肤局部分别外涂药物,连续30天。第31天,颈椎脱臼处死小鼠,背部去毛,迅速取肝组织及涂药部位的皮肤组织,测定SOO活性及MDA含量,并对皮肤组织进行HE染色及免疫组化橐色进行组织形态观察。结果:用药组均能使动物皮肤及肝组织MDA含量降低,SOD含量升高;但祛斑霜组较阳性组更明显,二者差异显著(P<005)。治疗组的病理组织形态学改变均
2、较模型组明显改善。结论:祛斑养颜阿胶黄精丸对黄褐斑有明显治疗作用。 动物健康3月龄纯系昆明种雌性小鼠60只,体重25359,华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。动物养条件:每组小鼠按组别分笼饲养。在自然条件相同的情况下,常规饲食饮水,保持自然光照,无不良因素影响,饲养1周适应实验环境后开始进行实验,试荆硫化钠(NaS):海凌峰化学试剂有限公可,临用前配成10水溶液。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒:主要仪器DY89一型电动玻璃匀浆机:宁波新兰生物科技股份有限公司。系统生物显微镜:OLYMPUS;BX50F4北航病理图像分析系统。实验方法模型制作参照过伟峰等¨2黄褐
3、斑实验动物模型复制方法。小鼠25戊巴比妥钠麻醉后,以04的黄体酮注射液按0029l【g剂量小鼠后肢肌肉注射,每周6次,连续4周。正常组按O029kg肌肉注射灭菌注射用水。,22动物分组及给药取健康雌性小鼠60只,3个剂量组,随机分为6组,每组lO只。正常组、模型组、祛斑养颜霜3个剂量组(O15、03、069g)、3氢醌阳性对照组(069祛斑养颜阿胶黄精丸3个剂量治疗组分别在小鼠口服阿胶黄精丸,一日三次,连续用药30天。照组于造模当日开始,时间和疗程同祛斑养颜阿胶黄精丸治疗组。 观察指标及检测用药30天后,颈椎脱臼处死小鼠,背部去毛,迅速取肝组织及涂药部位的皮肤组织各2块,其中一块用冰冷的生理盐
4、水冲洗,除去血液,滤纸吸干,切取肝脏及皮肤各059,分别放入2Oml预冷生理盐水的烧杯中剪碎组织,再倒人试管中,以高速分散器lOtrain匀浆两次,每次10秒;再以3500rrain转速离心15分钟,取上清液。采用黄嘌呤氧化酶法,按试剂盒检测说明书方法测定SOD;采用硫代巴比妥酸法,按试剂盒检测说明书方法测定MDA值。同时,分离小鼠背部皮肤,取去毛的皮肤组织一块(2em x1cm左右),10多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,切片,既染色,常规组织病理检测,光镜观察,计数上皮增生、真皮血管数及真皮炎细胞数;免疫组化染色,观察黑色素细胞染色和数目(阳性细胞:无,计O分;<15,计05分,<3
5、0,计1分;>30计2分)。 讨论,黄褐斑中医称为。肝斑”,属祖国医学“黎黑斑”或“面尘”范畴。一般认为本病发生与肝、脾、肾三脏关系密切HJ。中医理论认为。肺主皮毛”,如素问·六节脏象论>云:肺者、气之本、魄之处也,其华在毛,其充在皮,指出肺在体合皮毛。肺的功能正常时,肺阴充盈,肺气清宁,津液充足,才能敷布得行,使皮肤新陈代谢产物排出体外,使肌肤洁净,自然焕发光泽。故从古至今有许多医家、名方都有从肺论治,我们认为中医学色效相关、人与天地相应的理论是中医治疗学的特色之一,肺主皮毛,与白色对应,这正是我们组方的法则。祛班养颜阿胶黄精丸具有润肌肤、去肝、驻颜悦色的作用。病理组织学观察显示其能明显改善组织细胞的病理改变,减轻上皮细胞增生,减轻真皮
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