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文档简介
1、水中隐孢子虫和贾第虫的检测China, 2016IDEXX 产品线 流程 优势 总部坐落于美国缅因州的Westbrook总面积约为 65 000平方米在17个国家设立办事处,服务于175个国家的客户全球超过5,600 名员工IDEXXIDEXXIDEXX-Water水质检测部全球水中微生物检测专家产品行销于115个国家,遍布6大洲 每年卖出20,000,000个检测试剂 获得全球近50个国家的认证,全球20多个组织发放的100多项认证认可每年为20亿人口饮水安全保驾护航IDEXX-Water水质检测部IDEXX-Water水质检测部总肠菌群、粪大肠菌群、大肠总肠菌群、粪大肠菌群、大肠埃希氏菌埃
2、希氏菌肠球菌肠球菌绿脓假单胞菌绿脓假单胞菌质量控制系统质量控制系统余氯余氯/ /总氯总氯科立得Colilert-18ColisureColilert 250EnterolertEnterolert-EEnterolert-DWEnterolert 250PseudalertPseudalert 250Quanti-Cult微生物质控标样EZ-DPD隐孢子虫隐孢子虫/ /贾第鞭毛虫贾第鞭毛虫菌落总数菌落总数定量检测定量检测配件配件Filta-Max自动法淘洗设备Filta-Max xpress快速法淘洗设备Dynabeads 免疫磁分离磁珠SimPlate定量法检测菌落总数51孔定量盘97孔定量
3、盘无菌取样瓶便携式培养箱366nm紫外灯及灯箱IDEXX-Water水质检测部加入试剂倒入定量盘封口机封口培养24小时读取结果IDEXX-Water水质检测部m-endo MF*MTF*MLSB MF*Colilert*0%5%10%15%20%25%30%35%40%操作简便结果准确节省时间IDEXX-Water水质检测部IDEXX-Water水质检测部 Simplate 检测菌落总数 (HPC) 培养基采用爱德士复合酶底物技术(MET)。该试剂包含多种独特的酶物质,每一种都针对不同的细菌酶设计,并且已包含了所有最普遍的介水传播的细菌。 所有的酶底物在被分解时都产生相同的信号。所以,水样中存
4、在的细菌能够分解一种或者多种酶基质然后产生一个信号, 当Simplate 检测菌落总数时,这个信号就是 365nm 紫外灯下的荧光。 将发荧光的孔数通过提供的表格转化为最大可能数 (MPN值)。在95%的置信区间内,最低检出限为1,无需稀释的条件下最大可检测到 738 (比传统方法多两倍)。IDEXX-Water水质检测部1、将、将100ml无菌水加入含试剂的瓶无菌水加入含试剂的瓶子中摇匀溶解制成培养基子中摇匀溶解制成培养基2、将、将1ml水样和水样和9ml培养基溶液培养基溶液加入菌落总数定量盘加入菌落总数定量盘SimPlateIDEXX-Water水质检测部3、水平摇晃将液体充满所有孔槽、水
5、平摇晃将液体充满所有孔槽4、将盘缓慢竖起,多余液体、将盘缓慢竖起,多余液体被棉条吸收被棉条吸收IDEXX-Water水质检测部5、反向放置,、反向放置,361摄氏度培养摄氏度培养 48 小时小时 6、用、用365nm紫外灯照射,计数紫外灯照射,计数荧光孔槽荧光孔槽, 查查MPN表表 IDEXX-Water水质检测部IDEXX-Water水质检测部国际标准国际标准 美国EPA方法 水和废水标准检验方法 广东省地方标广东省地方标准准操作简单操作简单无需配置培养基操作时间小于2分钟无需稀释可以检测738个菌落总数/1ml水样IDEXX-Water水质检测部 操作简单 无需在无菌室内操作 通过ISO
6、17025 认可 保质时间长达1218个月 储存温度为小于-10 ,而非传统标准菌株的-80 保障实验的准确性和安全性IDEXX-Water水质检测部1.将标样瓶从冰箱中取出。置于室温10-15分钟平衡温度。2.打开标样瓶,取出1个有颜色的圆盘到加有100ml IDEXX无菌水合缓冲液的瓶子中或加有100ml无菌水的瓶中。3.旋动样品并放置10-15分钟,圆盘会完全溶解,在其完全溶解后,反复混合10次。4.水合作用30分钟内使用。5.查阅分析证书( coli l 克雷伯菌 l绿脓假单胞菌粪大肠菌群质控粪大肠菌群质控lE. coli l绿脓假单胞菌菌落总数质控:菌落总数质控:l粪肠球菌共 3 瓶
7、IDEXX-Water水质检测部大肠埃希氏菌 质控标样肠球菌 质控标样绿脓假单胞菌 质控标样产气荚膜梭状菌 质控标样 样品预处理(Sample Pretreatment). 染色镜检(Staining and Microscopy). 免疫磁分离(IMS). 过滤. 淘洗. 离心. 两虫检测全流程IDEXX过滤系统淘洗系统离心系统免疫磁分离系统染色系统镜检系统过滤系统目的:通过过滤将样品中的两虫截留在滤芯上l 滤器和滤芯的独特设计保证快速有效的样品过滤l 过滤速度可达4L/min滤器 滤芯 过滤系统l 取样体积和流速过滤系统l 滤芯结构l 79 层层多孔网状泡沫层,两种规格交互叠放,由790m
8、m压缩至30mm,螺栓固定。l 滤芯两个过滤层两个过滤层:外层区域为初滤器,内层滤核为选择性滤器。l 此结构在提高污水样品过滤速度的同时,保证有效地捕获隐孢子虫卵囊和贾第鞭毛虫孢囊。l 淘洗时,目标微生物以反流的形式反流的形式更方便地进行有效的淘洗。l 可以处理高浊度原水处理高浊度原水。过滤时水流流向淘洗时水流流向过滤系统过滤系统过滤系统过滤系统过滤系统l 实验室过滤过滤系统l 现场过滤淘洗系统目的:通过淘洗将截留在滤芯上的两虫富集到离心管l 稳定的高回收率,不同样品的结果一致性高l 淘洗时间90s,目前全球淘洗速度最快l 一键操作,全自动完成淘洗步骤淘洗系统离心系统目的:通过离心进一步浓缩两
9、虫样品离心系统l 离心机应放在牢固的工作台或地板上,尽量减少晃动l 离心管连同适配器一起配平,保证误差在0.5g以内,尽量减少摆动l 离心机设定2000g离心力,工作时间15分钟l 离心机应选用无刹车系统的(自然停止大约需7分钟)l 离心注意事项免疫磁分离系统目的:标靶技术,精确捕捉两虫免疫磁分离原理免疫磁珠分离细胞基于细胞表面抗原细胞表面抗原能与连接在磁珠磁珠上的特异性单抗上的特异性单抗相结合,在外磁场中,通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中滞留在磁场中,无该表面抗原的细胞由于不能与相连着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性,不在磁场中停留,从而使细胞得以分离得以分离。免疫磁分离原理染色系
10、统目的:荧光特异性染色,便于识别两虫FITC分子量为389.4,最大吸收光波长为490495nm,最大发射光波长为525530nm,呈现明亮的黄绿色荧光黄绿色荧光。FITC 是在荧光素的基础上通过化学反应增加硫氰酸基团得到的,硫氰酸基团可以和生物活性物质例如蛋白质上的伯胺基团反应形成硫脲键,从而实现对生物活性物质的荧光标记对生物活性物质的荧光标记。FITC能和各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧失与一定抗原结合与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中具有强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。储存条件储存条件:4避光保存。染色系统异硫氰酸荧光
11、素 (fluorescein isothiocyanate, FITC)是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光紫外光波长的光线激发。当DAPI与双股DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm,其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色蓝色至青绿色。DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物致癌物。使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。染色系统 DAPI 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-di
12、amidino-2-phenylindole)镜检系统目的:鉴别两虫,并计数l 需要配置蓝光、紫外光和DIC模块镜检系统蓝光观察紫外光观察DIC观察 镜检时,在显微镜中找好参照物,将所有视野都看完。镜检时,在显微镜中找好参照物,将所有视野都看完。 外形:卵形或椭圆形 直径:11-14uml 两虫孢囊与卵囊特征贾第虫孢囊镜检系统 外形:类似球 直径:4-6uml 两虫孢囊与卵囊特征隐孢子虫卵囊镜检系统FITC染色DAPI染色DIC观察染色镜检染色镜检染色镜检染色镜检推推荐原因荐原因: 样品加标样品加标【三省好质控三省好质控】省时间:无需单独做质控省劳力:无需单独做质控省成本:无需单独做质控合格证
13、书COA可下载最新推出4支装,减少浪费2016年全年培训计划年全年培训计划上海,广州,北京站上海,广州,北京站爱德士两虫实训爱德士两虫实训-2016年年期次期次地点地点时间时间第6期上海2016年2月24日-26日第7期广州2016年4月27日-29日第8期北京2016年6月22日-24日第9期上海2016年8月24日-26日第10期广州2016年10月26日-28日第11期北京2016年12月21日-23日每期包含所有内容! 每期都会分组加标!1. 两虫国内外检测最新动态 2. 如何提高两虫检测回收率 3. 两虫加标回收实验全流程 4. Filta-Max Xpress检测实际操作 5. F
14、ilta-Max手动法检测实际操作 6. 如何使用显微镜 7. 如何准确判别两虫推推荐原因荐原因: IDEXX 2016年将于7月和10月组织两轮两虫实验室间比对两虫实验室间比对是提升两虫检测能力的真正平台!参加两虫实验室间比对的客户都有2个免费名额参与培训班!参加两虫实验室间比对的客户都有一次免费补考机会!您是否想了解自己实验室的检测水平?您是否想拿到国内首份两虫检测实验室间比对合格报国内首份两虫检测实验室间比对合格报告告?在20 多个国家,五大洲广泛使用。全球用Filta-Max检测“两虫” 的样品量超过 其他所有方法的总和。Filta-Max是全球第一的 Cryptosporidium 和 Giardia 检测方法。英国100,欧洲90,美国50。中国大陆和港澳地区的两虫客户数已有132家。国内市场占有率70%。隐孢子虫和贾第鞭毛虫隐孢子虫和贾第鞭毛虫-国际市场国际市场隐孢子虫和贾第鞭毛虫隐孢子
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