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文档简介
1、中国农业科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室禽传染病研究室 第1页/共68页禽传染病研究室简介作为一个独立的研究室,始建于作为一个独立的研究室,始建于2005年底,年底,但哈尔滨兽医研究所禽病的研究历史悠久,但哈尔滨兽医研究所禽病的研究历史悠久,在所里各研究室中是基础较好,学科完善、在所里各研究室中是基础较好,学科完善、研究队伍完整的研究团队,是与哈尔滨兽医研究队伍完整的研究团队,是与哈尔滨兽医研究所的建立和发展息息相关的。研究所的建立和发展息息相关的。第2页/共68页细菌病研究室细菌病研究室基础条件与技术服务中心基础条件与技术服务中心实验动物中心实验动物中心人畜
2、共患病研究室人畜共患病研究室大动物病研究室大动物病研究室猪传染病研究室猪传染病研究室禽传染病研究室禽传染病研究室动物流感研究室动物流感研究室兽医生物技术国家重点实验室兽医生物技术国家重点实验室学科设置学科设置中国农业科学院研究创新团队中国农业科学院研究创新团队第3页/共68页 以禽类重要传染病为主要研究对象,以解决国内外禽以禽类重要传染病为主要研究对象,以解决国内外禽病防制所面临的重大问题为主要研究任务;应用现代病防制所面临的重大问题为主要研究任务;应用现代免疫学、病毒学和分子生物学理论和技术,揭示病原免疫学、病毒学和分子生物学理论和技术,揭示病原遗传演化和致病机制及机体免疫机理;研制防控用生
3、遗传演化和致病机制及机体免疫机理;研制防控用生物制剂,提出预防、诊断、控制和根除疫病的技术和物制剂,提出预防、诊断、控制和根除疫病的技术和方法。方法。 禽传染病研究室禽传染病研究室Division of Avian Infectious Diseases, National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, CAAS第4页/共68页l 禽类重要呼吸道病毒性传染病,以新城疫、禽类重要呼吸道病毒性传染病,以新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎等为主传染性支气管炎、传染
4、性喉气管炎等为主l 禽类重要免疫抑制病,以传染性法氏囊病、禽类重要免疫抑制病,以传染性法氏囊病、马立克氏病、白血病、传染性贫血和网状内马立克氏病、白血病、传染性贫血和网状内皮组织增生症等为主皮组织增生症等为主l 水禽重要病毒性传染病,以水禽重要病毒性传染病,以I型鸭肝炎、鸭瘟型鸭肝炎、鸭瘟等为主等为主研究方向研究方向第5页/共68页l 新城疫研究新城疫研究 孔宪刚孔宪刚 博士博士/研究员研究员l 鸡传染性支气管炎研究鸡传染性支气管炎研究 刘胜旺刘胜旺 博士博士/研究员研究员l 传染性喉气管炎研究传染性喉气管炎研究 王云峰王云峰 博士博士/研究员研究员l 禽免疫抑制病研究禽免疫抑制病研究 王笑梅
5、王笑梅 博士博士/研究员研究员l 禽白血病研究禽白血病研究 高玉龙高玉龙 博士博士/副研究员副研究员l 马立克氏病研究马立克氏病研究 刘长军刘长军 硕士硕士/副研究副研究员员l 水禽重要病毒病研究水禽重要病毒病研究 刘胜旺刘胜旺 博士博士/研究员研究员研究团队研究团队第6页/共68页禽传染病研究室全天工作人员合影禽传染病研究室全天工作人员合影第7页/共68页1、鸡传染性支气管炎病毒和禽类冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis coronavirus, TGEV)(Porcine transmissible ga
6、stroenteritis coronavirus, TGEV)犬肠炎冠状病毒犬肠炎冠状病毒(Canine enteric coronavirus, CECoV)(Canine enteric coronavirus, CECoV)猫冠状病毒猫冠状病毒(Feline coronavirus, FCoV)(Feline coronavirus, FCoV)猪流行性腹泻病毒猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhoea coronavirus, PEDV)(Porcine epidemic diarrhoea coronavirus, PEDV)人冠状病毒人冠状病毒229E
7、(Human coronavirus 229E, HCoV-229E)229E(Human coronavirus 229E, HCoV-229E)蝙蝠冠状病毒蝙蝠冠状病毒(Bat coronavirus)(Bat coronavirus) 鼠肝炎冠状病毒鼠肝炎冠状病毒(Murine hepatitis coronavirus, MHV)(Murine hepatitis coronavirus, MHV)人冠状病毒人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43, HCoV-OC43)OC43(Human coronavirus OC43, HCoV-OC43)牛冠状病毒牛冠
8、状病毒(Bovine coronavirus, BCoV)(Bovine coronavirus, BCoV)犬呼吸道冠状病毒犬呼吸道冠状病毒(Canine respiratory coronavirus, CRCoV)(Canine respiratory coronavirus, CRCoV)猪凝血性脑脊髓炎冠状病毒猪凝血性脑脊髓炎冠状病毒(Porcine haemagglutinating encephalomyelitis (Porcine haemagglutinating encephalomyelitis coronavirus, HEV)coronavirus, HEV)SAR
9、SSARS冠状病毒冠状病毒(SARS coronavirus, SARS-CoV)(SARS coronavirus, SARS-CoV) ( (禽禽冠冠状状病病毒毒) )鸡传染性支气管炎冠状病毒鸡传染性支气管炎冠状病毒(Infectious bronchitis coronavirus, IBV)(Infectious bronchitis coronavirus, IBV)火鸡冠状病毒火鸡冠状病毒(Turkey coronavirus, TCoV)(Turkey coronavirus, TCoV)野鸡冠状病毒野鸡冠状病毒(Pheasant coronavirus, PhCoV)(Phea
10、sant coronavirus, PhCoV)鹅冠状病毒鹅冠状病毒(Goose coronavirus, GCoV)(Goose coronavirus, GCoV)鸭冠状病毒鸭冠状病毒(Duck coronavirus, DCoV)(Duck coronavirus, DCoV)鸽子冠状病毒鸽子冠状病毒(Pigeon coronavirus, PiCoV)(Pigeon coronavirus, PiCoV)第8页/共68页电镜诊断:所有冠状病毒形态特征都是一样电镜诊断:所有冠状病毒形态特征都是一样的,形态上无法区别不同动物的冠状病毒的,形态上无法区别不同动物的冠状病毒第9页/共68页2
11、2、鸡传染性支气管炎病毒的感染日龄、鸡传染性支气管炎病毒的感染日龄l 只感染鸡,包括各个品种和各个日龄的鸡;只感染鸡,包括各个品种和各个日龄的鸡;l 越小越易感,尤其越小越易感,尤其1 1月龄内(何时采样最为理月龄内(何时采样最为理想?);想?);l 器官损伤的可逆与不可逆(输卵管的损伤与器官损伤的可逆与不可逆(输卵管的损伤与假母鸡现象);假母鸡现象);l 死亡率的绝对数字。死亡率的绝对数字。第10页/共68页对呼吸道的损伤对呼吸道的损伤所有的传染性支气管炎病毒并不只感染支气管,还可感染所有的传染性支气管炎病毒并不只感染支气管,还可感染气管、肾脏、输卵管上皮,还可感染肠道以及盲肠扁桃体气管、肾
12、脏、输卵管上皮,还可感染肠道以及盲肠扁桃体等,主要在这些部位的上皮细胞中复制、增殖和引起感染,等,主要在这些部位的上皮细胞中复制、增殖和引起感染,但一般不感染肺脏。但呼吸道上皮细胞是它的最初复制部但一般不感染肺脏。但呼吸道上皮细胞是它的最初复制部位。位。与其他呼吸道病的鉴别诊断与其他呼吸道病的鉴别诊断第11页/共68页IBV感染对肾脏的影响感染对肾脏的影响 乌鸡自然 蛋鸡自然感染第12页/共68页l 产蛋期的感染可造成产蛋下降,一般可以恢复,与其他产蛋期的感染可造成产蛋下降,一般可以恢复,与其他呼吸道病的鉴别呼吸道病的鉴别l 性成熟前期的感染造成输卵管不可逆的损伤,造成性成熟前期的感染造成输卵
13、管不可逆的损伤,造成“假假母鸡母鸡”现象现象对母鸡输卵管的损伤对母鸡输卵管的损伤自然发自然发病病例病病例1 1第13页/共68页1日龄攻毒,日龄攻毒,3日龄发病,日龄发病,11日龄呼吸道症状逐渐消失,日龄呼吸道症状逐渐消失,28日龄剖检发现此病变日龄剖检发现此病变人工感染病例人工感染病例第14页/共68页3 3、型:疾病分型和病毒分型、型:疾病分型和病毒分型疾病分型:致病型疾病分型:致病型主要以病毒引起的病变部位和分泌病毒的部位命名主要以病毒引起的病变部位和分泌病毒的部位命名l 感染气管和支气管的称感染气管和支气管的称“呼吸型呼吸型”传支,如传支,如M41, M41, CK/CH/LSD/05
14、ICK/CH/LSD/05Il 感染肾脏的称谓感染肾脏的称谓“肾型肾型”传支,如传支,如T, D1466, LX4T, D1466, LX4型型l 感染肠道的有摩洛哥感染肠道的有摩洛哥GG株株l 感染肌肉的有欧洲的感染肌肉的有欧洲的793/B793/B株株l 还有感染泌尿生殖道的毒株还有感染泌尿生殖道的毒株第15页/共68页“肾型肾型”传支:传支:1962年在美国和澳大利亚同时发现年在美国和澳大利亚同时发现l 同样感染呼吸道,且上皮细胞是其首次增殖的靶同样感染呼吸道,且上皮细胞是其首次增殖的靶细胞细胞l 肾脏是诊断中病毒分离的最理想样品采集部位肾脏是诊断中病毒分离的最理想样品采集部位l“花斑肾
15、花斑肾”:尿酸盐代谢障碍,与其他普通病和传:尿酸盐代谢障碍,与其他普通病和传染病的鉴别染病的鉴别第16页/共68页中国鸡传染性支气管炎病毒的致病型中国鸡传染性支气管炎病毒的致病型l 中国鸡传染性支气管炎主要以肾脏病变型为主,病例中国鸡传染性支气管炎主要以肾脏病变型为主,病例变化表现为肾脏的肿大、尿酸盐沉积和变化表现为肾脏的肿大、尿酸盐沉积和“花斑肾花斑肾”,这些,这些毒株感染虽然引起发病和死亡,但呼吸系统症状较为温和毒株感染虽然引起发病和死亡,但呼吸系统症状较为温和l 中国也存在中国也存在“呼吸型呼吸型”传染性支气管炎病毒,但数量传染性支气管炎病毒,但数量较少较少l 未见未见“肠型肠型”,但以
16、前有,但以前有“腺胃型腺胃型”l 有很多毒株表现对输卵管的致病作用有很多毒株表现对输卵管的致病作用第17页/共68页l 疾病是一个动态的过程,不同病程、机体健康疾病是一个动态的过程,不同病程、机体健康状况等不同可能影响疾病的病理变化,因此要状况等不同可能影响疾病的病理变化,因此要用辩证的观点看待致病型用辩证的观点看待致病型l The IB viruses of the same genotype can be associated with multiple clinical conditions. Probably, the differences observed in the field
17、 depend on other factors such as the age and physiological states of the chickens at the time of infection or complications due to secondary pathogens. Boshkov et al., Avian Pathology. 2006Chacon et al., Avian Pathology. 2011第18页/共68页病毒分型病毒分型(typing)(typing)l 功能性试验功能性试验(biological functional test)(b
18、iological functional test):免:免疫保护型疫保护型(protectotype)(protectotype)和抗原性血清型和抗原性血清型(antigenic type)(antigenic type)(血清型和表位型血清型和表位型) )l 非功能性试验非功能性试验(biological non-functional (biological non-functional test)test):基因型:基因型(genotype)(genotype)第19页/共68页型众多是鸡传染性支气管炎病毒的第型众多是鸡传染性支气管炎病毒的第一个重要特点一个重要特点全世界有超过全世界有超
19、过100100个血清型的病毒个血清型的病毒中国最少有中国最少有1010个以上个以上第20页/共68页不同型病毒之间交叉保护性差是鸡传染不同型病毒之间交叉保护性差是鸡传染性支气管炎病毒的第二个重要特点性支气管炎病毒的第二个重要特点l疫苗与流行毒株的匹配性疫苗与流行毒株的匹配性lH120H120为代表的为代表的“H H”系列目前系列目前仍然是保护谱最广的疫苗仍然是保护谱最广的疫苗第21页/共68页地域性流行是鸡传染性支气管炎病毒的第三个重要特点地域性流行是鸡传染性支气管炎病毒的第三个重要特点l 选择与流行地区强毒相同血清型的疫苗选择与流行地区强毒相同血清型的疫苗l 选择本地区流行毒株进行疫苗的研制
20、和应用选择本地区流行毒株进行疫苗的研制和应用l 在一般情况下不盲目选择本国或本地区没有血清型的疫苗在一般情况下不盲目选择本国或本地区没有血清型的疫苗第22页/共68页疫苗使用原则疫苗使用原则l The best protection against a challenge by IBV is provided by a vaccine containing the homologous strain, and vaccines containing heterologous strains may not provide adequate cross-protection.Gelb et al
21、., Avian Diseases. 1991 第23页/共68页l The cross-protection was broader when these vaccines were applied with a 2-week interval than when the vaccines were combined on the same day.De Wit et al., 2011, Avian Pathology第24页/共68页全世界范围内影响养禽业的重要血清型全世界范围内影响养禽业的重要血清型IBVIBVUSAl Massachusetts: 十九世纪四十年代,几乎全世界养鸡国家
22、都存在l Connecticut:1951年,与Mass没有交叉保护,有Conn的疫苗l Arkansas:1973年,1983年培育出疫苗l Colifornia 99:1999年,Mass-Conn二联活疫苗对其有保护l Delaware072:1992年,与D1466具有亲缘关系,有疫苗l Georgia 98:1998年,2003年研发出疫苗l GA 08:2008年第25页/共68页欧洲欧洲l MassMass:19701970年在欧洲普遍存在年在欧洲普遍存在l D207D207(D274D274)、)、D1466D1466、D3896D3896和和D3128D3128:198419
23、84年在荷兰有疫苗年在荷兰有疫苗l B1648B1648:19901990年比利时,肾型年比利时,肾型l 4/914/91:19901990年,欧洲普遍存在年,欧洲普遍存在l Italy 02Italy 02:20022002年发现与意大利,现在欧年发现与意大利,现在欧洲普遍存在洲普遍存在l LX4LX4型型(QX)(QX):欧洲普遍存在:欧洲普遍存在第26页/共68页中国的型中国的型l 本土型:下图中的本土型:下图中的I I、II II、IIIIII和和V V都都 是本土型是本土型l 外来型外来型l 变异株变异株第27页/共68页第28页/共68页外来型外来型l MassMass型型l 噢大
24、利亚噢大利亚T T株相关型株相关型l TW IITW II型型l 4/914/91型型第29页/共68页IBV变异原因The IBV evolution can be explained by lthe continuing use of live vaccineslimmunological pressure exerted on circulating viruses by the continuing presence of an immune bird populationlchanges in the viral RNA due to the nucleotide insertion
25、s, deletionslpoint mutations in the S1 gene resulting from errors made by the viral polymerase.Chacon et al., Avian Pathology. 2011第30页/共68页第31页/共68页欧洲将取消4/91第32页/共68页第33页/共68页第34页/共68页结论结论n 中国大陆流行的部分血清型传染性支气管炎病毒不同于中国大陆流行的部分血清型传染性支气管炎病毒不同于其他洲、国家或地区其他洲、国家或地区n 部分其他部分其他外来血清型外来血清型的传染性支气管炎病毒不断传入我的传染性支气管炎
26、病毒不断传入我国,使得我国该病毒血清型众多,难于防治国,使得我国该病毒血清型众多,难于防治n 中国大陆鸡群同时有不同型和变异的禽传染性支气管炎中国大陆鸡群同时有不同型和变异的禽传染性支气管炎病毒共同存在和流行病毒共同存在和流行(cocirculating)(cocirculating)n 我国多种致病型的传染性支气管炎病毒同时存在和流行,我国多种致病型的传染性支气管炎病毒同时存在和流行,主要以主要以“肾型肾型”病毒为主病毒为主第35页/共68页4 4、疫苗及相关:疫病防控中永远的痛、疫苗及相关:疫病防控中永远的痛u 疫苗的使用是双刃剑疫苗的使用是双刃剑u 疫苗远远不是疫病防控的唯一疫苗远远不是
27、疫病防控的唯一第36页/共68页疫苗是双刃剑疫苗是双刃剑Air sac lesions from birds infected with two strains of IBV and control birds. (A) and (B) Air sacs from control birds 12 and 24 hpi,respectively. Cilia are prominent on the columnar epithelium. There are very few leucocytes in the lamina propria. (C) and (D) Airsacs from
28、 birds 24 and 48 hpi, respectively, with vaccine strain of the virus. Note the loss of ciliated cells at 24 h and influx of macrophagesand lymphocytes in the lamina propria. The epithelium is denuded by 48 h. (E) and (F) Air sacs of birds infected with thefield strain of IBV at 9 and 24 hpi. There i
29、s flattening of the columnar epithelium and loss of cilia by 9 hpi and extensive ulcerationand inflammatory infiltration by 24 hpi. HE. Bar, 20 mm.第37页/共68页IBVIBV疫苗免疫肉鸡后气管病毒检出率的疫苗免疫肉鸡后气管病毒检出率的2 2种模式种模式Jackwood et al., 2009, Avian DiseasesOne pattern was a parabolic-shaped curve, where initially a lo
30、w percentage of birds were positive for IBV vaccine in the trachea followed by a peak at approximately 14 days postvaccination with between 90% and 100% of the birds positive; then a decrease in the number of positive birds was observed but the vaccines did not completely clear from the flock.Anothe
31、r sinusoidal-type wave that started with a high number of birds positive for IBV vaccine in the trachea, and cycled from peak to peak on approximately a 2-wk interval. Again, the vaccines did not clear from the flock prior to the birds going to processing. The patterns did not correlate with the met
32、hod of vaccination or the type of vaccine given.第38页/共68页IBVIBV的免疫原性较差,病毒在鸡胚的免疫原性较差,病毒在鸡胚中的滴度较低,因此灭活疫苗只适中的滴度较低,因此灭活疫苗只适合作为加强免疫,不能单独用于合作为加强免疫,不能单独用于IBIB的免疫防控。可用弱毒活疫苗与灭的免疫防控。可用弱毒活疫苗与灭活疫苗联合用于活疫苗联合用于IBIB的防控的防控第39页/共68页IBIB免疫失败的部分原因分析免疫失败的部分原因分析l 疫苗株与流行株血清型不同疫苗株与流行株血清型不同第40页/共68页鸡场鸡场A日龄13710121520252731阳
33、性率20/2020/2020/2020/2020/2020/2018/2016/2012/200/20第41页/共68页日龄13710121520252731343842阳性率20/2020/2020/2020/2020/2016/2014/2010/202/201/201/201/200/20鸡场鸡场B第42页/共68页日龄1371012152025273134阳性率20/2020/2020/2020/2020/2019/2018/209/205/201/201/20鸡场鸡场C第43页/共68页日龄13710121520252731阳性率20/2020/2020/2020/2020/2019
34、/2020/208/207/202/20鸡场鸡场D第44页/共68页l 混合感染、继发感染混合感染、继发感染这不仅是造成鸡体免疫力下降,这不仅是造成鸡体免疫力下降,IBIB疫苗免疫不全而发病,而且疫苗免疫不全而发病,而且是造成高发病率和高死亡率的是造成高发病率和高死亡率的重要原因。重要原因。第45页/共68页病毒与细菌混合感染触目惊心病毒与细菌混合感染触目惊心AB实验室诊断结果实验室诊断结果A A:前期:前期IBVIBV感染,后期继发大肠杆菌病;感染,后期继发大肠杆菌病;B B:马立克氏病和:马立克氏病和细菌病混合感染细菌病混合感染第46页/共68页多种病毒混合感染多种病毒混合感染实验室诊断结
35、果实验室诊断结果 IBVIBV和和AIV H5AIV H5混合感染混合感染第47页/共68页l 疫苗质量本身的问题疫苗质量本身的问题疫苗含毒量低、抗原量低,造疫苗含毒量低、抗原量低,造成抗体产生水平不高或差异较成抗体产生水平不高或差异较大大第48页/共68页第49页/共68页l 与其他疫苗的联合使用干与其他疫苗的联合使用干扰或降低了扰或降低了IBIB疫苗的量疫苗的量第50页/共68页第51页/共68页Conclusionl The humoral antibody response to NDV and IBV was in some way interfered with by simult
36、aneous CEO or TCO vaccinationl The level of protection induced by CEO vaccine was higher than the protection elicited by TCO vaccinel The protection induced by CEO was not affected when combined with B1, ARK, or B1/MASS/ARK vaccines, whereas TCO-induced protection was significantly affected upon sim
37、ilar multivalent vaccinations第52页/共68页l 疫苗稀释液温度疫苗稀释液温度以以6 oC效果最好,在其他情况相效果最好,在其他情况相同的条件下,每提高同的条件下,每提高1 oC,效,效果下降果下降3.2%左右左右第53页/共68页其他原因其他原因l疫苗免疫和流行毒株感染之间间隔时间疫苗免疫和流行毒株感染之间间隔时间过长或过短;过长或过短;l免疫方式不同可能引起疫苗的量不够;免疫方式不同可能引起疫苗的量不够;l稀释疫苗水(其他缓冲液)的质量等的稀释疫苗水(其他缓冲液)的质量等的影响影响第54页/共68页免疫方式免疫方式n 点眼是点眼是IB活疫苗免疫的金标准方法活疫
38、苗免疫的金标准方法n 气雾免疫是舍内开灯的效果好于气雾免疫是舍内开灯的效果好于关灯的效果关灯的效果第55页/共68页商品肉鸡的免疫日龄商品肉鸡的免疫日龄l H120:6日龄和日龄和10日龄免疫效果明显优于日龄免疫效果明显优于1,15和和20日龄;日龄;l LDT3-A:最佳免疫日龄为:最佳免疫日龄为1-2日龄,日龄,9-12日日龄和龄和20-25日龄日龄各养鸡场还应根据鸡的品种、当地气温、免各养鸡场还应根据鸡的品种、当地气温、免疫背景(母源抗体)等适当调整疫背景(母源抗体)等适当调整第56页/共68页发病鸡为传染源发病鸡为传染源防控目标为消灭传染源:防控目标为消灭传染源:l 剔除发病鸡剔除发病
39、鸡l 病鸡的无害化处理病鸡的无害化处理l 剖检室的设置及其生剖检室的设置及其生物安全物安全5 5、IBIB的防控的防控第57页/共68页易感动物:只感染各种鸡易感动物:只感染各种鸡u 防控中采取尽可能的措施,保护防控中采取尽可能的措施,保护好易感动物好易感动物u 其他禽类可能带毒,但不发病,其他禽类可能带毒,但不发病,饲舍尽可能原理其他鸟类饲舍尽可能原理其他鸟类第58页/共68页通过空气通过空气- -呼吸道传染呼吸道传染防控目标为截断传播途径:防控目标为截断传播途径:l 鸡舍通风换气,保持空气清洁鸡舍通风换气,保持空气清洁l 鸡舍温度保持稳定鸡舍温度保持稳定l 注重鸡舍消毒注重鸡舍消毒l 避免人员、器具带毒传播疾病避免人员、器具带毒传播疾病第59页/共68页u体内:体内:The virus can persist in the birds and the intestinal tract for several weeks or mont
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