分解纤维素的微生物的分离知识点

1、纤维素酶：纤维素酶： 纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶，一般认为它至，一般认为它至少包括三种组分，即少包括三种组分，即CX酶酶、 C1酶酶和和葡萄葡萄糖苷酶糖苷酶，前两种酶使，前两种酶使分解成分解成，第三种酶将纤维二糖分解成，第三种酶将纤维二糖分解成。纤维素纤维素酶酶酶酶纤维二糖纤维二糖葡萄糖葡萄糖苷酶苷酶葡萄糖葡萄糖甲甲 乙乙 在在2支支20mL的试管中，的试管中，分别放入分别放入16cm的滤纸条，的滤纸条，再分别加入再分别加入pH为、物质的量为、物质的量浓度为的醋酸浓度为的醋酸-醋酸钠缓冲液醋酸钠缓冲液10mL、11mL。在加入。在加入10mL缓冲液的试管中加入缓冲液的试管中加入1

2、mL纤纤维素酶（维素酶（7080U/mL）。将）。将二支试管固定在二支试管固定在50mL的锥的锥形瓶中，在摇床上以形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应的转速振荡反应1h，观察结果。观察结果。4、纤维素酶活性的测定实验：、纤维素酶活性的测定实验：这种方法能够通过这种方法能够通过颜色颜色反应反应直接对微生物进行筛选直接对微生物进行筛选 土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴将样品涂布到鉴别纤维素分解菌别纤维素分解菌的培养基上的培养基上挑选产生挑选产生透明圈的透明圈的菌落菌落2 2、选择培养的操作方法、选择培养的操作方法n将土样加入装有将土样加入装有30ml30m

3、l选择培养基的锥形瓶中，选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在将锥形瓶固定在摇床摇床上，在一定温度下振荡上，在一定温度下振荡培养培养1-2d1-2d，直至培养液变，直至培养液变混浊混浊。n吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的吸取一定量的培养液，转移至另一瓶新鲜的选择培养基中，以同样的方法培养到培养液选择培养基中，以同样的方法培养到培养液变混浊。变混浊。选择培养选择培养1 1、刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先先培养微生物培养微生物，再加，再加入刚果红进行颜色反应入刚果红进行颜色反应方法二：方法二：在在倒平板时倒平板时就加入刚就加入刚果红果红 为了确定分离得到的是纤维素为了确定分离得到的

4、是纤维素分解菌，还需要进行分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵和发酵和_ 发酵。纤维素发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的等纤维素所产生的_ 含量进含量进行定量测定。行定量测定。发酵产纤维素酶发酵产纤维素酶 液体液体 固体固体 葡萄糖葡萄糖 n碳源碳源n氮源氮源n生长因子生长因子n无机盐无机盐n水水微生物需要的五大类营养要素物质微生物需要的五大类营养要素物质（一）微生物需要的营养物质及功能（一）微生物需要的营养物质及功能n概念概念n来源来源n常见的生长因子常见的生长因子微生物生长微生物生长不可缺少不

5、可缺少的的微量有机物微量有机物酵母膏、蛋白胨、动植物组织的提取液酵母膏、蛋白胨、动植物组织的提取液n 维生素、氨基酸、碱基等维生素、氨基酸、碱基等生长因子生长因子思考思考是否培养所有微生物的培养基中都需要是否培养所有微生物的培养基中都需要加生长因子？加生长因子？异养型微生物的主要能源异养型微生物的主要能源8有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵来生产，酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物发酵来生产，为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种的方法，获得产生纤维素酶较多的菌株。法，获得