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文档简介

1、精选文本生物多肽工艺流程一、固相肽合成(1)投料：树脂加入固相合成仪，加入DCM溶胀，抽干后加入DMF洗涤，洗涤结束抽干备用。(2)缩合：将氨基酸用一定体积的DMF溶解，加入缩合剂活化后投入固相合成仪，补充DMF至反应浓度，搅拌反应。(3)脱除保护基：以Kaiser试剂检测反应程度，反应结束后抽干溶剂，DMF洗涤，加入PIP/DMF溶液脱除保护基，以Kaiser试剂检测反应程度，反应完毕抽干溶剂，DMF洗涤，准备加入下一个氨基酸。(4)缩合循环：按照树脂序列依次连接氨基酸，按照“脱保护洗涤活化氨基酸投料缩合洗涤”步骤进行缩合循环操作，按照氨基酸序列完成剩余n个氨基酸的缩合。(5)出料：合成结束

2、之后用IPA和DCM交叉洗涤树脂，完成树脂收缩收缩，出料至不锈钢托盘。(6)树脂干燥：树脂在真空干燥箱中室温干燥，干燥完毕称重，计算收率。(7)有机废液回收，集中处理。(8)清场：操作结束后操作人员及时清场。二、树脂裂解(1)配液：按照裂解液成分比例配置裂解液，并提前置冰柜中冷藏保存。(2)投料：肽树脂加入反应釜中，加入预冷的裂解液，搅拌反应。(3)出料：裂解结束后放出反应液，抽滤除去树脂并以TFA洗涤。(4)浓缩：裂解液转入旋转蒸发仪室温浓缩至小体积。(5)析出：浓缩后的反应液倾入预冷的甲基叔丁基醚(简称醚)中，搅拌使析出大量固体。(6)离心：浊液离心，并用预冷的醚洗涤。(7)粗肽干燥：涤完

3、成的粗肽转至真空干燥箱中室温干燥。(8)有机废液回收，集中处理。(9)清场：操作结束后操作人员及时清场。三、多肽HPLC纯化(1)溶解：操作人员将粗肽溶解，调节PH至工艺规定范围。(2)过滤：滤去粗肽溶液中不溶物，过滤ACN和纯化水。(3)配制纯化液：根据工艺内容配制A相(乙腈)和B相(水)。(4)纯化：在制备型液相上进行纯化，分别接收流份。(5)检验及返工：对制备流份进行检查，合并合格流份，其他部分根据需要再次纯化。(6)废弃流动相按有机废液回收，集中处理。四、浓缩过滤冻干(1)浓缩：合并滤液旋蒸除去有机溶剂，有机废液回收，集中处理。(2)过滤：浓缩后水相无菌过滤。(3)冻干：滤液置冻干机中，设定升温程序冻干。(4)出箱：出料、加内包。五、质量检查、入库工艺流程图如下所示多肽合成仪树脂以此三步为一周期按多肽序列重复直至连接完成树脂裂解沉淀固相肽合

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