植物组织培养具备的基本培养条件

1、v1.0 可编辑可修改植物组织培养具备的 6 大基本培养条件在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、 PH 值、渗透压等各种化学环境条件都是影响组织培养育苗的生长和 发育重要因素。一、温度( temperature)因为温度是植物组织培养中的重要因素， 所以植物组织培养在最 适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数植物组织培养都是在 2327之间进行，一般采用 25±2。低于 15时培养，植物组织 会表现生长停止，高于 35时对植物生长不利。但是，不同植物培 养的适温不同。白鹤非的最适温度是 20、月季是 2527、番茄 是 28。温度不仅影响植物组织培养育苗的生

2、长速度，也影响其分 化增殖以及器官建成等发育进程。如烟草芽的形成以28为最好，在 12以下， 33以上形成率皆最低。不同培养目标采用的培养温度也不同，百合鳞片在30以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在 25%以下的高。桃胚在 2 5条 件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35处理草莓的茎尖分生组织 35d，可得到无病毒苗。二、LED光照( light) 组织培养中使用光照也是重要的条件之一，主要表现在光强、光质、 以及光照时间方面：v1.0 可编辑可修改1、LED光照强度( light intensity)光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响， 从目前的 研究情况看

3、，光照强度对外植物体、细胞的最初分裂有明显的影响。 一般来说，光照强度较强， 幼苗生长的粗壮，而光照强度较弱幼苗容 易徒长。2、LED光质( light wave)光质对愈伤组织诱导， 培养组织的增殖以及器官的分化都有明显 的影响。如百合珠芽在红光下培养， 8 周后，分化出愈伤组织。但在 蓝光下培养， 几周后才出现愈伤组织， 而唐菖蒲子球块接种 15天后， 在蓝光下培养首先出现芽， 形成的幼苗生长旺盛， 而白光下幼苗纤细。3、LED光周期( light period)试管苗培养时要选用一定的光暗周期来进行组织培养， 最常用的 周期是 16h 的光照， 8h 的黑暗。研究表明，对短日照敏感的品种

4、的 器官组织，在短日照下易分化，而在长日照下产生愈伤组织，有时需 要暗培养， 尤其是一些植物的愈伤组织在暗培养下比在光下更好。 如 红花、乌饭树的愈伤组织。三、湿度( humidity) 湿度的影响包括培养容器保持和环境的湿度条件， 容器内主要受 培养基水分含量和封口材料的影响。 前者又受琼脂含量的影响。 在冬 季应当适当减少琼脂用量，否则，将使培养基干硬，以致不利于外植 体接触或插进培养基， 导致生长受阻。 封口材料直接影响容器内湿度 情况，但封闭性较高的封口材料易引起透气性受阻， 也会导致植物生v1.0 可编辑可修改长发育受影响。 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发， 一般要 求 70

5、%-80%的相对湿度，常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。 湿度过低会使培养基丧失大量水分， 导致培养基各种成分浓度的改变 和渗透压的升高，进而影响组织培养的正常进行。湿度过高时，易引 起棉塞长霉，造成污染。四、渗透压（ penetrating pressure）培养基中由于有添加的盐类、 蔗糖等化合物， 因此影响到渗透压 的变化。通常 1-2 个大气压对植物生长有促进作用， 2 个大气压以上 就对植物生长有阻碍作用，而 5-6 个大气压植物生长就会完全停止， 6 个大气压植物细胞就不能生存。五、PH值不同的植物对培养基最适 PH值的要求也是不同的， 大多在左右， 一般培养基皆要求，这基本能

6、适应大多数植物培养的需要。 PH 值适 度因材料而异， 也因培养基的组成而不同。 以硝态氮作氮源和以铵态 氮作氮源就不一样，后者较高一些。一般来说 PH值高于时，培养基 会变硬；低于 5 时，琼脂不能很好地凝固。因为高温灭菌会降低 PH 值（约个 PH值）因此在配制时常提高 PH值单位。 PH 值大小调节可 用的 NaOH和的 HCl来调整。 1ml的 NaOH可使 PH值升高单位， 1ml 的 HCl 可使 PH值降低单位。调节时一定要充分搅拌均匀。六、气体（ gas）氧气是组织培养中必需的因素， 瓶盖封闭时要考虑通气问题， 可 用附有滤气膜的封口材料， 如易生组培热销的培养瓶盖和封口膜本身v1.0 可编辑可修改带有 PTFE材质的滤菌膜，孔径为，即保证通气又可以滤菌。通气最 好的是棉塞封闭瓶口，但棉塞易使培养