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文档简介
1、专题22 酶的应用及特定成分的提取与分离一、单项选择题(每小题4分,共24分)1PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了乙肝病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的()A白细胞DNAB病毒蛋白质C血浆抗体 D病毒DNA解析:选DPCR技术是DNA多聚酶链式反应技术,乙肝病毒是DNA病毒,可扩增病毒的DNA,以此检测分析病人是否感染了病毒。2下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是()A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧C利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件D利用固定
2、化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物解析:选A固定化酶的应用中,需要控制好pH、温度等条件,不一定控制溶解氧;用固定化酶降解有机磷农药,不需要营养条件,因为这不是固定化细胞;固定化酵母细胞进行发酵,糖类既是反应底物,又是酵母细胞的碳源物质、能源物质。3下列有关酶的应用的叙述,正确的是()A酶对重金属盐不敏感,但对低温、强酸、强碱非常敏感B加酶洗衣粉因为添加了酶制剂,比普通洗衣粉更易污染环境C固定化酶可以反复利用,但反应物与酶接触受影响而会降低反应效率D酶的催化功能很强,但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用解析:选C酶对重金属、高温、强酸、强碱都非常敏感。加酶洗衣粉易分解,不易
3、污染环境。固定化酶因其外有物质包裹,酶与反应物接触受影响。酶不是细胞,不需要营养物质。4下列有关生物技术实践的叙述正确的是()A生产腐乳所用的毛霉能够耐受高盐环境B加酶洗衣粉在各种洗涤条件下都有较好的洗涤效果C进行DNA鉴定时,将析出的DNA溶解在二苯胺试剂中,水浴加热后溶液呈现蓝色D电泳法可用于蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的分离解析:选D用毛霉制作腐乳时,后期发酵包括用盐腌制,高浓度盐同样抑制毛霉生长繁殖;加酶洗衣粉需要在适宜的环境下,洗涤效果最好,如适宜的pH、温度等;进行DNA鉴定时,需将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,然后加入二苯胺试剂混合均匀,再沸水浴加热5
4、min;凝胶电泳法依靠电场力分离,从迁移速度的快慢看,凝胶电泳法迁移速度快的是相对分子质量小的物质,可用于蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的分离。5红细胞中含有大量血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述,错误的是()A血红蛋白提取和分离一般按照样品处理粗分离纯化纯度鉴定的顺序进行B纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液C粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质D可经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定解析:选B蛋白质的提取和分离一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。提取和分离血红蛋白时,首先
5、通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再通过透析法除去相对分子质量较小的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量较大的杂蛋白除去,即样品纯化,纯化过程中凝胶应用蒸馏水充分溶胀后,配制成凝胶悬浮液,而不是用生理盐水;最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。6右图表示某研究小组在探究果胶酶的用量的实验结果。有关说法不正确的是()A在ab段限制反应速率的主要因素是酶的用量B在bc段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度等C在ac段增加反应物浓度,可以明显加快反应速率D在该实验给定条件下,果胶酶的最佳用量是b点对应的值解析:选C由曲线图可以看出
6、,在ab段,随着酶的用量的增大,酶促反应速率加快,说明此阶段限制反应速率的主要因素是酶的用量,此时增加反应物浓度,反应速率不会明显加快;在bc段,随着酶的用量的增大,酶促反应速率不再加快,此时反应物浓度成为限制反应速率的因素之一,增加反应物浓度,反应速率会加快。二、双项选择题(每小题6分,共12分)7下列关于植物组织培养的叙述中,不正确的是()A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C离体器官或组织的细胞不需通过脱分化就能形成愈伤组织D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织的基因相同解析:选CD同一株绿色开花植物经减数分
7、裂形成的花粉细胞中所含有的染色体数目与该植物经有丝分裂产生的体细胞含有的染色体数目不同,因此含有基因不同,由它们经有丝分裂培养成的愈伤组织的基因也是不同的。离体的器官或组织的细胞必须通过脱分化才能形成愈伤组织。8下列关于DNA和血红蛋白的粗提取与分离(鉴定)实验的叙述,正确的是()A提取DNA或血红蛋白都可用猪的成熟红细胞BDNA的粗提取与鉴定实验中,两次DNA析出的方法不同C实验中都要去除杂质以便得到较纯净的DNA或血红蛋白D提取出的血红蛋白溶解在双缩脲试剂中即可观察到紫色解析:选BC猪的成熟红细胞无细胞核,故不能作为提取DNA的生物材料;在DNA的粗提取与鉴定实验中,第一次DNA的析出是利
8、用DNA在不同氯化钠溶液中的溶解度不同,第二次是利用DNA不溶于酒精的原理;血红蛋白不溶于双缩脲试剂,且血红蛋白为红色,紫色反应不易观察。三、非选择题(共64分)9(20分)某化工厂生产的一种加酶洗衣粉,其包装袋上印有如下说明。某研究性学习小组为探究该洗衣粉中酶催化作用的最适温度,设计了如下装置进行实验,并将结果用下列曲线图A、B表示。请回答以下各题:(1)由图可知,使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为_。(2)在0和75时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度回到45时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为_。(3)在实验过程中可以通过直接测定_(指标)来表示该洗衣粉中酶的催化效率。(4)目前使用
9、的加酶洗衣粉都是一次性的,某洗涤公司为降低生产成本研制了一种能多次重复使用加酶洗衣粉的设备,他们将酶固定在不溶于水的尼龙载体上,洗涤完衣物后,经过简单处理,这些酶还可以多次重复利用,这种方法制成的酶叫_。(5)除加酶外,很多洗衣粉中还加有香精,高档洗衣粉中的香精都是由植物芳香油制成的,目前从植物中提取芳香油的方法有(答出两种即可)_。(6)加酶洗衣粉中的淀粉酶可以从霉菌中提取。用固体培养基分离、纯化霉菌的方法有_、_。解析:(1)由图可知,使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为45。(2)当温度从75回到45时,酶的催化能力已不能恢复,这是因为高温条件下酶的结构已遭到破坏(或酶的活性已丧失)。(3)在
10、实验过程中可通过直接测定胶片上的蛋白膜存在时间的长短(指标)来表示该洗衣粉中酶的催化效率。(4)将酶固定在不溶于水的尼龙载体上,洗涤完衣物后,这些酶经过简单处理,还可以多次重复利用,则这种酶就是固定化酶。(5)目前从植物中提取芳香油的方法有萃取法、蒸馏法、压榨法等。(6)用固体培养基分离、纯化霉菌的常用方法有平板划线法、稀释涂布平板法。答案:(1)45(2)高温条件下酶的结构已遭到破坏(或酶的活性已丧失)(3)胶片上的蛋白膜存在时间的长短(或其他合理答案)(4)固定化酶(5)萃取法、蒸馏法、压榨法(答出两条即可)(6)平板划线法稀释涂布平板法10(20分)自1973年博耶和科恩成功地使外源基因
11、在原核细胞中表达开始,基因工程正式问世了,人们对DNA的关注也越来越多。分析并回答下列问题:(1)从生物组织中提取DNA时,若要获取含有DNA的滤液,需破碎细胞;若为鸡的成熟红细胞,可以加入一定量的蒸馏水,原因是细胞_而涨破;若为植物细胞可以加入一定量的洗涤剂。(2)利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,可以将它们分离。如DNA的溶解度在NaCl溶液浓度为_时最小,可以使DNA与其他杂质初步分离。(3)为了纯化提取的DNA,可以用95%的酒精去除滤液中的杂质。其原理是DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,可以推测溶于酒精中的物质可能有_。(4)一般
12、DNA的鉴定试剂为_,沸水浴后溶液中有DNA则颜色为_。解析:(1)常采用吸水膨胀的方法使动物细胞涨破。(2)当NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。(3)DNA不溶于酒精,而蛋白质、脂质等杂质溶于酒精。(4)DNA在沸水浴条件下与二苯胺呈蓝色反应。答案:(1)吸水膨胀(2)0.14 mol/L(3)蛋白质、脂质(4)二苯胺蓝色11(24分)(2011·江苏高考)请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用 PCR 技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链 DNA 片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产物中含有引
13、物 A 的 DNA 片段所占的比例为_。在第_轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段。(2)设计引物是 PCR 技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。第 1 组:_;第 2 组:_。(3)PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶,下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的功能,这是因为_。(4)用限制酶 EcoRV 、Mbo单独或联合切割同一种质粒,得到的 DNA 片段长度如下图(1 kb 即 1 000 个碱基对),请画出质粒上 EcoRV 、Mbo的切割位点。解析:(1)根据PCR过程特点绘制PCR过程示意图
14、如下,由图可知,由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中,只含有引物A或引物B,而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时,两种引物都含有,故第四轮循环共产生16个DNA分子,其中含有引物A的分子是15个,占15/16。由图示可知,第一、二轮循环合成的子链长度均不同,根据半保留复制特点可知,前两轮循环产生的四个DNA分子的两条链均不等长,第三轮循环产生的DNA分子存在等长的两条核苷酸链,如下图:(2)在第1组引物中,引物的部分碱基序列是CAGGCT,引物的部分碱基序列是AGCCTG,若利用这两个引物进行DNA扩增,会因其中的部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效。在第2组引物中,引物的部分碱基序列是AACTG和CAGTT,该引物一旦发生自身折叠,也将会出现部分碱基发生碱基互补配对而使引物失效。(3)图中直接将两个脱氧核苷酸合成DNA单链,这不是DNA聚合酶的功能。DNA聚合酶只能在DNA模板存在的条件下,将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。(4)根据图示,该质粒为环形质粒用限制酶EcoR单独切割该质粒时,只形成一个片段,说明该质粒上只有1个限制酶EcoR的识别位点用限制酶Mbo单独切割该质粒时,形成两个片段,说明该质粒上有2个限制酶Mbo的识别位点。用
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