药学大专毕业论文开题报告

1、药学大专毕业论文开题报告课题名称 HPLC法测定伏立诺他有关物质和含量的研究研究的主要目的和意义 vorinostat(商品名 Zolinza) 是 Merck 公司开发的世界上第一个抑制组蛋白脱乙酰基酶 (his2tonedeacetylase,HDAC) 的新型抗癌药物 , 该药于 20XX年 10 月 6 日获得美国 FDA批准上市 , 用于其他药物治疗时或治疗后仍不能治愈、 或恶化、或病情反复情况下的转移性皮肤 T 淋巴细胞瘤。 vorinostat 化学名 :N- 羟基 -N 苯基辛二酰胺 ; 英文名:N-hydroxy-N-phenyloctane-diamidevorinosta

2、t属于组蛋白去乙酰化酶抑制剂类抗肿瘤药物, 低浓度(IC5086nmol L-1) 即可以有效抑制组蛋白脱乙酰酶 HDAC1、HDAC2、HDAC3和 HDAC6的活性 , 抑制组蛋白次乙酰化 , 因而从基因水平调控细胞周期 , 阻断癌细胞基因复制 , 并激活其凋亡基因 , 达到抑制和杀灭癌细胞的效果。但 vorinostat 的抗癌机制仍在深入研究之中 , 其具体作用机制尚不完全清楚 6-7 。两项临床试验证明了 vorinostat 的安全性和有效性 , 其中包括 107 名接受其他药物治疗后又复发的 CTCL患者。按皮肤损伤改善标准评分等级的判断 , 接受 Zolinza 治疗的患者中

3、30% 有所改善 , 疗效平均持续 168d。一些生物学数据已经证明了 vorinostat 在皮肤癌，前列腺癌治疗中的有效性。而且近年研究 vorinostat 不仅可以单独作为肿瘤治疗药物 , 还可以与其它抗癌药物联合用药 , 减少对正常细胞的毒性 , 具有增效作用。可与转录调节因子 ( 如 52 杂氮 222 脱氧胞苷、视黄酸、mRNA转录抑制剂 flavopiridol)51-53、凋亡受体配体 ( 如阿霉素、长春新碱、依托泊苷、多烯紫杉醇)54-56、化疗药物 ( 如抗代谢药吉西他宾、全反式维甲酸 )57,58以及激酶抑制剂、 放射线等联合用药。近年来研究发现vorinostat还可

4、影响到有丝分裂、 DNA复制和修复以及调控非组蛋白的蛋白质乙酰化程度。但是该药用于临床治疗癌症仍然需要解决一些问题如: 抑制剂对 HDAC酶系的选择识别作用、 选择最佳药用剂量、 治疗周期以及寻找更多可以促进这种药抑制作用的物质等。毋庸置疑 , 随着对 HDACIs抗癌机理的深入研究 ,vorinostat将会有广阔的应用前景。伏诺立他目前在国内还没有上市，我们准备仿制该品种，建立该药的质量标准，用建立的标准对原料和制剂进行有关物质和主药含量进行研究。采用的研究手段及文献综述根据破坏试验的结果，结合伏立诺他合成工艺，建立伏立诺他有关物质检查方法，并对其进行方法学验证。1. 仪器与药品Water

5、s996光电二极管阵列检测器， WatersEmpower色谱工作站，试药及其中间体均由南京海纳医药科技公司提供2. 色谱条件的建立2.1检测波长的选择取伏立诺他适量 , 用流动相制成每1ml 含 15g 的溶液 , 照分光光度法 ( 中国药典 20XX年版二部附录 A)在 200400nm波长范围内扫描测定2.2系统使用性试验色谱柱 :DiamonsilC18(250mm4.6mm,5m)色谱柱为分析柱 ;乙腈 -0.1%磷酸溶液 ( 三乙胺调 PH3.0)为流动相，不断调节流动相比例，梯度洗脱，流速为 1.0ml min-1, 检测波长为 241nm,柱温 30, 进样量 :20 l 。根

6、据合成工艺 , 伏诺立他成药中可能引入一系列的合成中间体及原料还有杂质， 取本品可能带入的杂质、 中间体分别加流动相适量溶解 ; 另取杂质中间体及伏立诺他适量 , 用流动相制成适宜浓度的溶液, 精密吸取杂质，中间体与吡非尼酮混合溶液各20l, 分别进样，考察分离度，理论塔板数，及拖尾因子，再根据具体条件进行调整，选出最适合的条件。2.3专属性试验取供试品 , 进行高温、光照、酸、碱、氧化破坏试验。热降解溶液的配制 : 取本品 20mg,置 25ml 量瓶中 , 置 140高温4h 后, 用流动相溶解并稀释至刻度; 光降解溶液的配制 : 取本品 20mg,置 25ml 量瓶中 , 用流动相制成每

7、 1ml 含吡非尼酮 0.8mg 的溶液 , 置紫外灯光下 48h;酸降解溶液的配制 : 取本品 20mg,置 25ml 量瓶中 , 加 2molL-1 盐酸溶液 5ml, 放置 4h, 用 2molL-1 氢氧化钠溶液调至中性 , 加流动相稀释定容 ;碱降解溶液的配制 : 取本品 20mg,置 25ml 量瓶中 , 加 2molL-1氢氧化钠溶液放置4h, 溶液颜色变黄 , 另加 2molL-1 盐酸溶液调至中性 , 加流动相稀释定容 ;氧化破坏溶液的配制 : 取本品 20mg,置 25ml 量瓶中 , 加过氧化氢5ml, 避光放置 4h, 用流动相稀释定容。照高效液相色谱法, 取上述各溶液

8、各 20l 进样 , 记录结果，进行分析2.4线性范围：精密称取伏立诺他对照品约 15mg,置 50ml 量瓶中 , 加流动相溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 作为贮备液。分别精密量取贮备液 1、 2、3、4、5ml 置 10ml 量瓶中 , 加流动相稀释至刻度 , 摇匀。分别取溶液 20 l 分别注入色谱仪 , 记录色谱图 , 量取峰面积 , 由溶液浓度 (C) 对峰面积(A) 线性回归。2.5 检测限：取空白基线一段 , 计算其噪音峰高 , 再将伏立诺他样品溶液用流动相稀释适当浓度进样 , 使其峰高为噪音峰高的 3 倍,记录检测限。2.6精密度试验进样精密度：取标准曲线项下高、中、低三种浓度

9、的溶液, 分别重复进样 5 次, 以峰面积来考察精密度。中间精密度：选择不同人员 , 分别测定同一批样品的含量。2.7重复性试验：分别取同一批样品,6 份, 精密称定 , 照样品测定项下操作 , 计算含量。2.8稳定性试验：照标准曲线项下的方法配制高、中、低三种浓度的溶液 , 分别于 0、1、2、4、6、8h 测定。考察其稳定性2.9 含量测定：取本品适量 , 精密称定 , 用流动相制成每 1ml 含 50g 的溶液 , 作为供试品溶液 , 精密量取 20l, 注入液相色谱仪 , 记录色谱图 , 量取峰面积 ; 另取经干燥至恒重的伏立诺他对照品适量 , 同法测定 , 按外标法以峰面积计算 ,

10、即得。2.10 有关物质测定：取本品适量 , 精密称定 , 用流动相制成每 1ml 含 0.5mg 的溶液 , 作为供试品溶液 ; 精密量取供试品溶液 1ml, 置 100ml 量瓶中 , 用流动相稀释至刻度 , 摇匀 , 作为对照溶液。精密量取对照溶液 20l, 注入液相色谱仪 , 调节检测灵敏度 , 使主成分色谱峰的峰高为满量程的 10%25%;再精密量取供试品溶液和对照溶液各20l, 分别注入液相色谱仪 , 记录色谱图至主成分峰保留时间的4 倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰, 最大单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的 1/2(0.5%),各杂质峰面积总和 , 不得大于对照溶液主峰面积

11、 (1%)。参考文献：【 1】胡杨，陈国华，吴燕，杨尚彦 . 伏诺立他的合成 J. 中国医药工业杂志， 20XX，40(7) ：481-482.【 2】黄小平，徐江 . 组蛋白去乙酰化酶抑制剂类抗癌药VorinostatJ.化工中间体， 20XX，06：11-13.【 3】SakajiriS,KumagaiT,KawamataN,etal.HistonedeacetylaseinhibitorsprofoundlydecreaseproliferationofhumanlymphoidcancercelllinesJ.ExpHematol,20XX,33(1):53-61.【 4】RobertA.Parise,JulianneL.Holleran,JanH.Beumera,SureshRamalielectrosprayionizationtande