流动注射后化学发光法测定异烟肼

1、 第26卷第7期2009年7月应用化学CH I N ESE JOURNAL OF APP L I E D CHE M I ST RY Vol . 26No . 7July 2009流动注射后化学发光法测定异烟肼何云华陈志红(长安大学环境科学与工程学院西安7100543摘要发现异烟肼在铁氰化钾2钙黄绿素化学发光反应体系中的后化学发光反应。优化了反应条件, 建立-8了利用此后化学发光反应测定异烟肼的流动注射化学发光分析法。方法的检出限为6×10相对标准-6-7-5偏差为118%(210×10g/mL异烟肼, n =11 , 线性范围为210×10110×10

2、中异烟肼含量的测定, 结果与药典方法测定值一致。关键词后化学发光反应, 铁氰化钾, 钙黄绿素, 异烟肼中图分类号:O657. 3文献标识码:A 0720869203后化学发光反应 在某一个化学发光反应完成后的溶液体系、充实和拓展化学15。关于后化学发光反应的研究和分析应用已有一些文献报道。, 对其研究较多, 而对于铁氰化8, 9钾和钙黄绿素的化学发光反应的报道较少。作者发现, 当将异烟肼溶液注入到铁氰化钾和钙黄绿素已充分反应后的溶液中时, 会发生后化学发光反应。本文考察了化学发光反应的动力学性质, 优化了反应条件; 利用后化学发光反应, 结合流动注射和化学发光分析法测定了异烟肼。I FF M

3、2D 型流动注射化学发光分析仪(西安瑞迈电子科技有限公司 。所用试剂均为分析纯, 水为二次去离子水。异烟肼(中国药品生物制品检定所 :准确称取10010mg 异烟肼用水溶解定容至100mL (110×-310g/mL , 配成贮备液, 使用时用水逐级稀释至所需浓度; 钙黄绿素(北京试剂化学三厂 :称取-333313mg 的钙黄绿素用水溶解并定容至100mL (510×10mol/L , 作为贮备液, 使用时用水逐级稀释至所需浓度; 铁氰化钾储备液(510×10-2mol/L :称取116463g 的铁氰化钾, 用水溶6, 7解并定容至100mL 。流动注射化学发光

4、分析系统示意图如图1。图中a 、b 和c 分别是连接异烟肼溶液、钙黄绿素溶液和铁氰化钾溶液的管道。铁氰化钾溶液与钙黄绿素溶液先经三通管混合, 流经混合管L 时充分反应, 待图1流动注射化学发光流路图Fig . 1Schematic diagra m of the CL fl o w injecti on systema . is oniazid s oluti on; b . calcein s oluti on; c . potassium ferricyanide s oluti on;P . peristaltic pump; L. m ixing tube; V. injecti on

5、 valve; F . fl ow cell; 基线稳定后, 将异烟肼溶液注P MT . phot omulti p lier tube; HV. high voltage; COM. computer; W. waste入到铁氰化钾与钙黄绿素充分反应后的合并流中, 进行后化学发光反应, 记录化学发光信号, 用峰高进行定量。2008207214收稿, 2008209205修回通讯联系人:何云华, 女, 博士, 教授; E 2mail:hyhuachd. edu . cn; 研究方向:发光分析© 1994-2010 China Academic Journal Electronic P

6、ublishing House. All rights reserved. 870应用化学第26卷结果与讨论用流动注射化学发光分析仪的静态测量系统, 研究了异烟肼在铁氰化钾2钙黄绿素体系中的后化学发光行为。图2给出了铁氰化钾2钙黄绿素化学发光反应和异烟肼在铁氰化钾2钙黄绿素体系中的后化学发光反应的动力学曲线。当将110mL 510×-410mol/L碱性铁氰化钾溶液注入到110mL 510×mol/L钙黄绿素溶液中, 立即发生了化学发光反应, 检测到强化学发光信号(图2峰1 。100s 后, 10-4反应结束, 化学发光信号回落至基线。此时, 向上述-4反应混合液中注入11

7、0mL 110×10g/mL异烟肼, 又引发一个新化学发光反应(图2峰2 。200s 后, 反应结束, 化学发光信号再次回落至基线。在同样条件下, 后化学发光信号, 2钙2钙黄绿素体2Fig . 2Kinetic curve of the C L reacti ons1. injecting 1. 0mL of 5. 0×10-4mol/Lalkaline s oluti on of potassium ferricyanide int o 1. 0mL of 5. 0×10-4mol/Lcalcein s oluti on;, 所以应在铁氰化钾和钙黄2. inj

8、ecting 1. 0mL of 1. 0×10-4g/mLis oniazid s oluti on 绿素充分反应后再加入样品溶液进行测量。为了使int o above reacti on m ixture s oluti on 铁氰化钾和钙黄绿素间充分反应, 在铁氰化钾溶液与钙黄绿素溶液的混合点和进样阀之间连接了混合管L (018mm i . d . 。若混合管太短, 铁氰化钾和钙黄绿素的反应不充分, 测定基线较高, 信噪比较低; 若混合管太长, 则后化学发光反应信号太弱, 灵敏度不高。兼顾以上2个因素, 固定各管道中溶液流速为115mL /min, 考察管长在5150c m 范

9、围内对异烟肼测定结果的影响, 证明最合适的混合管长度为50c m 。铁氰化钾2钙黄绿素化学发光反应须在碱性条件下进行。在反应中, 反应介质碱度可通过改变铁氰化钾溶液中Na OH 的浓度加以调节。考察了Na OH 的浓度在01001110mol/L范围内对异烟肼测定结果的影响。结果表明, Na OH 浓度为0105mol/L时, 后化学发光信号最强。所以, 选择铁氰化钾溶液中Na OH 浓度为0105mol/L。-5-3考察了铁氰化钾浓度在510×10110×10mol/L范围内对异烟肼测定结果的影响。发现化学-4发光强度随铁氰化钾浓度增大而增大, 当铁氰化钾浓度大于215&

10、#215;10mol/L时, 化学发光信号趋于平-4稳。因此, 选用铁氰化钾的浓度为215×10mol/L。-5-3考察了钙黄绿素浓度在510×10110×10mol/L范围内对异烟肼测定结果的影响。结果表明, 当钙黄绿素浓度增大时, 化学发光强度相应增大, 当钙黄绿素浓度大于215×10mol/L时, 化学发-4光信号随钙黄绿素浓度变化很小。因此, 选用钙黄绿素浓度为215×10mol/L。在选定的实验条件下, 利用图1的流动注射系统, 考察了异烟肼浓度和后化学发光强度的关系。结-7-5果表明, 在210×10110×10

11、g/mL范围内, 异烟肼的质量浓度与化学发光强度呈良好的线性关-6系, 线性回归方程为I =3161c +1612(c :10g/mL , 相关系数r =019981。对质量浓度为210×-610g/mL的异烟肼进行11次平行测定, 相对标准偏差为118%。按照I U P AC 建议, 计算方法的检出限-8为6×10g /mL。-6在选定的实验条件下, 考察了下述共存物质对210×10g/mL异烟肼溶液测定的干扰。结果表+-明, 在相对测量误差±5%范围内, 1000倍的Na 、K 、NH 4、Cl 、NO 3、葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖、淀粉和糊精, 1

12、00倍的柠檬酸钠、苯甲酸钠, 10倍的Fe 、Fe 、A l 、Mg 和N i , 同浓度的Ba 和Ca , 均不干扰测定。取市售的3种异烟肼片剂样品(标示量均为100mg/片 各10片, 准确称量后研细混匀, 求得每片平均质量。称取相当于1片的量, 加水溶解并定容至100mL, 然后用水适当稀释, 作为试液。按确定的© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 2+3+3+2+2+2+2+-4 第7期何云华等:流动注射后化学发光法测定异烟肼10871实验方法测

13、定异烟肼含量, 并与药典方法与药典方法的测定结果无显著性差异。对照, 结果列于表1。经t 检验, 在95%置信度以内, 本方法表1样品分析结果Table 1D eterm i n a ti on results for ison i a z i d t abletsNumber of sa mp le123Present method /(mg tablet -1100. 299. 6100. 5RS D /%(n =51. 81. 52. 0Phar macopoeia method /(mg tablet -199. 8100. 199. 9参考文献1Feng N, Lu J R, He

14、Y H, Du J X . L um inescence J , 2005, -5 :2DU J ian 2Xiu (杜建修 , L I U W en 2Xia (刘文侠 , LV J iu 2(. Chi m (J , 2004, 62(14 :13233XU Yi (徐溢 , T ANG Shou 2 , X I A Zhi 2N (, YI Gang (易钢 . J Instrum A nal (分析测试学报 J , 2001, 20(5:4L I U , J ( , FE NG Na (冯娜 . Che m J Chinese U niv (高等学校化学学报 J ,15L i B X

15、Y, Zhang C X . A nal Chi m A cta J , 2006, 575(2 :2126V ieru I Y, Kozl ov Y N, Petr ov A N. Kinetics and Catal J , 1996, 37(6 :7547V ieru I Y, Kozl ov Y N, Petr ov A N. Kinetics and Catal J , 1997, 38(4 :4808HE Yun 2Hua (何云华 , LV J iu 2Ru (吕九如 . Chinese J A nal Che m (分析化学 J , 2007, 35(4 :5649N ie F

16、, Lu J R. A nal Chi m A cta J , 2007, 592(2 :16810The Phar macopoeia Comm issi on of P . R. China (中华人民共和国药典委员会 . Chinese Phar macopoeia, Vol . 2(中国药典, 二部 M.Beijing (北京 :Che m istry I ndustry Press (化学工业出版社 , 2005:217Flow I n jecti on 2Post Che m ilu m i n escence M ethodfor the D eter m i n a ti on

17、 of Ison i a z i dHE Yun 2Hua , CHEN Zhi 2Hong(S chool of Environm enta l Science and Eng ineering, Chang an U niversity, X i an 7100543Abstract A post che m ilu m inescence (PCL reacti on was observed when is oniazid was injected int o the reacti on m ixture of potassium ferricyanide 2calcein che m

18、 ilum inescence (CL reacti on syste m. The experi m ental conditi ons of the CL reacti ons were op ti m ized . A new che m ilu m inesence method coup led with fl ow injecti on technique f or the deter m inati on of is oniazid was devel oped . The detecti on li m it was 6×10g/mL,and the-6relative standard deviati on was 118%(210×10g/mLis oniazid, n =11 , and the liner range was 210×10-8110×10g/mL.The method has been successfully app lied t o the deter m inati on of is oniazid in the is oniazid table