第24章.病毒感染的检查方法和防治原则

1、第二十四章 病毒感染的检查方法与防治原则第一节 病毒感染的检查方法（一）标本的采集与送检 采集急性期标本l 根据感染性质取不同的标本 标本置于病毒转运液 使用抗生素以抑制标本中细菌或真菌等生长繁殖 冷藏保存、快速送检 采集双份血清（二）病毒的分离培养动物接种：尚无敏感细胞隐性感染、免疫抵抗力、接种量鸡胚培养：鸡胚对多种病毒敏感 绒毛尿囊膜接种：天花病毒、痘病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔接种：流感病毒流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔接种：流感病毒 卵黄囊接种：嗜神经病毒细胞培养l 细胞培养原代细胞有限细胞系连续(或无限)细胞系悬浮型细胞贴附型细胞二倍体细胞异倍体/非整倍体细胞l 细胞病变l 红细胞吸附l

2、 病毒干扰作用l 细胞代谢的改变Vero细胞，细胞，EV71MRC-5细胞，细胞，CoxA16Hep-2细胞，细胞，腺病毒腺病毒（三）病毒的鉴定病毒形态学检查l 电镜和免疫电镜检查l 光学显微镜检查：包涵体病毒抗原检测病毒核酸检测Hep-2细胞分离腺病毒电镜检测细胞分离腺病毒电镜检测流感病毒感染猪肺部组织电镜检测流感病毒感染猪肺部组织电镜检测艾滋病患者血清的免疫艾滋病患者血清的免疫电镜电镜，在在病病毒颗粒表面可见到铁蛋白颗粒的吸毒颗粒表面可见到铁蛋白颗粒的吸附附病毒形态学检查病毒抗原检测l 免疫学标记技术l 蛋白印迹技术l 血凝抑制试验病毒核酸检测病毒形态学检查病毒抗原检测病毒核酸检测l 核酸

3、扩增技术l 核酸杂交技术l 基因芯片技术l 基因测序技术TaqMan探针法探针法CYBR Green染料法染料法病毒形态学检查病毒抗原检测病毒核酸检测l 核酸扩增技术l 核酸杂交技术l 基因芯片技术l 基因测序技术（四）病毒数量与感染性测定50%组织细胞感染量(TCID50)空斑形成试验(plaque formation test)l 有感染性的病毒经适当稀释后接种于单层细胞，经一定时间培养后，覆盖薄层未凝固的琼脂于细胞上，待其凝固后继续培养，由于单个病毒的复制增殖使局部单层细胞脱落，此即空斑，经染色后空斑可用肉眼观察l 空斑形成单位(plaque formation unit, PFU)计算

4、空斑数可推算出样品中活病毒的数量(pfu/ml)红细胞凝集试验/血凝试验（五）病毒感染的血清学诊断 中和试验(neutralization test) 血凝抑制试验(hemagglutination inhibition test, HI) ELISA、IFA第二节 病毒感染的特异性预防（一）人工主动免疫常用生物制品 灭活疫苗 减毒活疫苗 亚单位疫苗 基因工程疫苗 重组载体疫苗 核酸疫苗（二）人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白l 血清丙种球蛋白l 特异性免疫球蛋白 细胞免疫制剂l 细胞因子第三节 病毒感染的治疗 抗病毒化学制剂l 核苷类药物：碘苷/疱疹净、阿昔洛韦/无环鸟苷、阿糖腺苷、齐多夫定、双脱氧肌苷、双脱氧胞苷、dTC、拉米夫定、利巴韦林/病毒唑 抑制病毒基因复制 模拟核苷成分掺入病毒基因组 竞争病毒复制酶 抑制病毒基因转录l 非核苷类反转录酶抑制剂：柰韦拉平、吡啶酮l 蛋白酶抑制剂：沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦l 其他：金刚烷胺、甲基金刚烷胺；磷甲酸钠 干扰素和干扰素诱生剂l IFNl 干扰素诱生剂 多聚肌