影响双抗原夹心ELISA法检测HIV抗体因素研究_图文

1、中国卫生检验杂志年月第卷第期，；影响双抗原夹心法检测抗体因素研究张帅清（河南省三门峡市疾病预防控制中心，河南三门峡）【产品评价】摘要】目的：探讨检测试剂种、批号、仪器、人员、时间对双抗原夹心法初筛检测抗体是否有显著影响。方法：将相同的组血清标本及其每组所含的份不同标本单盲方式随机编号，然后分别采用不同种、同种不同批号、同种同批号试剂，不同时间、仪器、人员双抗原夹心法检测抗体，经统计学比较值是否有显著差异。结果：河南华美试剂：批号、人员、时间对值有显著影响。郑州安图、北京万泰试剂：批号、人员、时间对值无显著影响，另郑州安图试剂：仪器对值也无显著影响。上海科华试剂：仪器、人员、时间对值无显著影响，

2、批号对值有显著影响。英科新创试剂：人员、大部分批号、时间对值无显著影响，只一批号试剂值重复性差。英科新创、荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科华、郑州安图、北京万泰试剂对值有些有显著影响，有些无显著影响。结论：不同种、同种不同批号、同种同批号试剂，不同仪器、人员、时间操作双抗原夹心法初筛检测抗体的阴、阳性结果无显著差异，但对值有不同程度影响。关键词】影响；双抗原夹心；试剂；种；批号；仪器；人员；时间中图分类号文献标识码】文章编号】（）一一双抗原夹心法测血清（血浆）值进行抗体初筛的检测，受众多因素影响。本研究分别采用不同种、同种不同批号、同种同批号的双抗原夹心试剂盒，不同人员、仪器、时间操作，

3、观察试剂、人员、时间、仪器对抗体初筛检测是否有显著影响。材料与方法标本将日常检测中经免疫印迹法（）确证为一型抗体阳性血清多人份、等体积混合为种标本，用经法确证为型抗体阴性的单人份血清稀释前者为种不同的标本，共种标本。采用郑州安图酶标仪（）及其配套洗板机，人类免疫缺陷病毒（）型抗体酶联免疫（）诊断试剂盒（双抗原夹心法）：上海科华：批号有效期；英科新创：批号有效期，检测这种标本值。分装各标本于塑料冷冻管中，制成每组含个不同标本的相同的组盲样，采用单盲方式随机编号（只有编号者知道），一保存后随机分发给个市、县的抗体初筛检测实验室，每一实验室一组盲样标本，要求天内报告检测结果。试剂双抗原夹心法初筛检测

4、抗体试剂盒：河南华美种批号：批号有效；批号：有效期。郑州安图种批号：批号有效期；批号有效期；批号有效期。北京万泰种批号：批号有效期；批号有效期。英科新创种批号：批号有效期；批号有效作者简介张帅清（一），女，硕士，副主任检验师，主要从事艾滋病检测工作。期；批号有效期。上海科华种批号：批号有效期；批号有效期；批号有效期；批号有效期；批号有效期。荷兰梅里埃批号有效期。珠海丽珠批号有效期。主要仪器，酶标仪及其配套洗板机。一“矩一酶标仪及其配套洗板机。酶标仪及其配套洗板机。美国海霸酶标仪及其配套洗板机。微量移液器、水浴箱、定时钟。方法双抗原夹心法测值初筛检测抗体，具体操作及结果判断均严格按各检测试剂盒使

5、用方法说明。每次检测都同时带内部和外部对照质量控制血清，进行氏质控图法或即刻法监控检测过程怛。采用秩和统计方法比较：不同种、同种不同批号、同种同批号试剂，不同仪器、人员、时间检测、值是否有显著差异。结果领取盲样单位、所用试剂、仪器及值领取盲样单位、所用试剂及值列表：号为各单位所领盲样编号。数字后表示抗体初筛阳性，一表示抗体初筛阴性。所用主要仪器：灵宝第一医院为距一酶标仪及配套洗板机，卢氏疾控中心为美国海霸（）酶标仪及配套洗板机，义马总院为郑州安图（）酶标仪及其配套洗板机，卢氏医院为酶标仪及其配套洗板机。其它单位所用仪器没有统计。中国卫生检验杂志年月第卷第期，；市血站上海科华批号有效期卢氏医院黄

6、河医院市中心医院市三院陕县防疫站义马疾控中心渑池疾控中心渑池医院湖滨疾控中心市中医院灵宝市防疫站卢氏疾控中心义马总院荷兰梅里埃批号有效期郑州安图批号有效期上海科华批号有效期北京万泰批号有效期；上海科华批号上海科华批号北京万泰批号上海科华批号有效期有效期有效期有效期郑州安图批号有效期英科新创批号有效期上海科华批号有效期珠海丽珠批号有效期上海科华批号有效期英科新创批号有效期上海科华批号有效期英科新创批号有效期上海科华批号有效期英科新创批号有效期河南华美批号有效期上海科华批号有效期北京万泰批号有效期上海科华批号有效期河南华美批号有效期英科新创批号有效期郑州安图批号有效期郑州安图批号有效期灵宝第一医院

7、上海科华批号有效期河南华美批号有效期一一一一一一一一一所有试验室对份盲样标本的型抗体初筛检测阴、阳性结果完全一致。中国卫生检验杂志年月第卷第期，；不同种、同种不同批号、同种同批号试剂，不同仪器、时间、人员操作所测值比较河南华美、郑州安图试剂所测值比较河南华美、郑州安图试剂所测值列表：、组为河南华美试剂：同批号，不同时间、人员操作值。组和、组为同种不同批号试剂，不同时间、人员操作值。经统计学比较¨：河南华美试剂不同批号、人员、时间操作值有显著差异，同批号不同人员、时间操作值也有显著差异。、组为郑州安图试剂：同批号、仪器、人员、时问操作值。组与、组为郑州安图同批号，不同仪器、人员操作值。

8、、组为同种、批号试剂、人员，不同时间操作值，组与、组为同种不同批号试剂，不同人员、时间操作值。、组为不同种试剂，不同人员、时间操作值。经统计学比较郑州安图试剂同批号、人员、仪器、时间操作值无差异，不同批号、人员、仪器、时间操作值也无差异。河南华美、郑州安图试剂检测相同标本值有差异。表河南华美、郑州安图试剂检测值塑直堡羞塑刿塞圈批号有效期统计分析、组比较：，（有差异。组和组、组和组、组和组比较均三组之间有显著差异。，、组比较：，无显著差异。，三组比较：，无显著差异。、组相比：，（双），有显著差异。北京万泰试剂所测值比较北京万泰试剂所测值列表：、组为北京万泰试剂不同批号、人员、时间操作值。、组为同

9、种、批号试剂，同人员、仪器，不同时间操作值。经统计学比较口北京万泰试剂不同批号、人员、时间操作值无显著差异。同批号、人员、仪器、不同时间检测值无显著差异。表北京万泰试剂检测值统计分析、组比较：，总体有显著差异。、组比较无差异，、组比较有显著差异，、组比较无显著差异。、组比较：，无显著差异。上海科华试剂所测值比较上海科华试剂所测值列表：组为上海科华试剂同批号，不同人员、时间检测值，、组与、组还为不同仪器检测结果。、组为同种、批号试剂，不同人员、时间检测结果。、为同种不同批号试剂，不同人员、时间、仪器检测值。经统计学比较¨上海科华试剂同批号不同仪器、人员、时间检测值无差异，不同批号试剂，

10、不同人员、时间操作值有差异。表上海科华试剂检测值统计分析、组比较，无显著差异。、组比较，无显著差异。、组比较，有显著差异，两组之间比较，、组，、组，、组，、组，、组，、组，、组，、组，、组之间有显著差异。、组无显著差异。英科新创试剂所测值比较英科新创试剂所测值列表：、组为同种、批号试剂检测结果，而且、组、组、，组还分别为相同人员、仪器，不同时问操作结果。、，组为不同人员、时间操作结果。、组、组、组为同种、批号试剂，同时间、人员操作值。经统计学比较英科新创试剂大部分相同批号，相同人员、仪器，不同时间操作值无显著差异，只有一批号相同时间、人员操作值有显著差异。不同批号、人员、时间操作值无显著差异。

11、中国卫生检验杂志年第卷第期，；表英科新创试剂检测值样本号组组组组组组组组组组组组舒傩傩明傩统计分析、组之问比较，无显著差异，、组比较无显著差异。组比较，无显著差异。，组比较，无显著差异。、组比较有显著差异。、组比较，无显著差异。、组比较无显著差异。，组比较，无显著差异、组比较，无显著差异。、组比较：无显著差异。英科新创、荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科华、郑州安图、北京万泰试剂所测值比较英科新创、荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科华、郑州安图、北京万泰试剂所测值列表：、，、组分别为不同种试剂、不同人员、时间、仪器测得值，经统计学比较值：英科新创和荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科

12、华、郑州安图、北京万泰无显著差异。荷兰梅里埃和河南华美、北京万泰无显著差异，和珠海丽珠、上海科华、郑州安图有显著差异。珠海丽珠和河南华美、上海科华、郑州安图无显著差异。河南华美和上海科华、郑州安图、北京万泰有显著差异。上海科华和郑州安图、北京万泰有显著差异。郑州安图和北京万泰有显著差异。表英科新创、荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科华、郑州安图、北京万泰试剂检测值试剂英科新刨荷兰梅里埃珠海珠河南华美上海科华郑州安图北京万泰批号有效期嘶统计分析：、，、组比较：，有显著差异。两组比较：无显著差异：、组，、组组组，、组，、组、组，组，、组、组、组。两组比较有显著差异：、组。、组，、组，、组，组，

13、组组，、组，组，、组。分析不同种、同种不同批号、同种同批号试荆，不同人员、时间操作值有显著差异分析双抗原夹心法检测抗体的原理：将特异性抗原包被在固相检测板上，加入被检血清（血浆）后形成抗原抗体结合物，再加入酶标记抗原后形成抗原一抗体一酶标记抗原复合物，加入酶作用底物、显色剂后，在酶标仪上所测值与值比较来判断抗体的阴、阳性。其加样、保温、洗涤、显色、比色每一过程都受人员、仪器、环境条件影响：不同人员、时间操作所加试剂量准确性不一致、对实验条件控制不同。不同种、同种不同批号试剂生产所用抗原种类、数量、分子结构和抗体结合的位点数可能不同，所用板条的材料和质量不同等原因可能对同一标本反应的值不同。不同

14、种、同种不同批号，不同人员、仪器、时间操作值无显著差异分析不同种、同种不同批号试剂生产所用抗原种类、数量、分子结构和抗体结合的位点数、所用板条的材料和质量可能相差不大。同时，每次检测都采用内部和外部对照质控血清进行检测质量控制，所有值都在氏质控图或即刻法控制范围内，可能是除河南华美、上海科华试剂外其余试剂不同批号、人员、时间、仪器操作值无显著差异的原因。酶标仪、洗板机对值是否有显著影响有待继续研究本研究仅统计了三家单位采用不同的酶标仪及洗板机发现：不同的酶标仪及洗板机对值无显著影响，没有统计各个检测单位所用酶标仪、洗板机的厂家、型号及所测值有无显著差异，因此有待增加资料进一步研究。结论河南华美试剂：批号、人员、时间对值有显著影响。郑州安图、北京万泰试剂：批号、人员、时间对值无显著影响，郑州安图试剂：仪器对值无显著影响。上海科华试剂：仪器、人员、时间对值无显著影响，批号对值有显著影响。英科新创试剂：人员、大部分批号、时间对值无显著影响，只有一批号试剂值重复性差。英科新创、荷兰梅里埃、珠海丽珠、河南华美、上海科