苯丙氨酸检测试剂盒(细菌抑制法)说明书

1、苯丙氨酸检测试剂盒（细菌抑制法）说明书【产品名称】通用名称：英文名称：【包装规格】【预期用途】【检验原理】【主要组成成分】【储存条件及有效期】【适用机型】【样本要求】【检验方法】【参考值（参考范围）】【检验结果的解释】【检验方法的局限性】【产品性能指标】【注意事项】【参考文献】【生产企业】【 医疗器械生产企业许可证编号】【医疗器械注册证书编号】 【产品标准编号】 【说明书批准及修改日期】【产品名称】通用名：苯丙氨酸检测试剂盒（细菌抑制法）英文名称： Phenylalanine Kit（BIA）【包装规格】96人份/盒 【预期用途】用于检测采集在S&S 903# 滤纸上的新生儿血样品中苯

2、丙氨酸的含量。适用于新生儿苯丙酮尿症（PKU）的筛查，仅用于体外检测。苯丙酮尿症（简称PKU）是一种较常见的常染色体隐性遗传性氨基酸代谢病，发病率约1/10,000。本病可因苯丙氨酸羟化酶缺乏引起，也可因辅酶因子BH4缺陷引起。这些缺陷致使苯丙氨酸不能被转化为酪氨酸，导致大量的苯丙氨酸及其代谢产物在体内堆积，引起中枢神经系统损害。其临床主要表现为：发育迟缓，毛发、皮肤及虹膜变浅，癫痫，进行性智力低下等。由于本病的早期发现早期治疗，对患儿的生长发育、智力发育不受影响，因此被我国列为新生儿疾病筛查项目之一。检测方法还有荧光法、酶法等。 【检验原理】 枯草杆菌在含有抑制剂的培养基中生长受到抑制，而当

3、外界提供苯丙氨酸环境时，抑制作用解除，枯草杆菌即可恢复生长且细菌生长环的直径与苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制备好的培养基上，放上滤纸干血片，血中的苯丙氨酸会扩散到周围培养基中，被抑制的枯草杆菌即可恢复生长。用被检样品的菌环直径与标准品的菌环直径相比，得出样品中苯丙氨酸的含量。 【主要组成成分】苯丙氨酸筛查试剂盒（细菌抑制法）组成表名称96人份/盒包装琼脂糖粉 （琼脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶无色透明玻璃瓶营养液（氨基酸、磷酸盐缓冲液等）10ml/瓶青霉素酶（青霉素酶、生理盐水）0.3ml/瓶抑制剂（-2-噻吩丙氨酸）1.0ml/瓶菌株孢子悬液（枯草杆菌）0.2ml/瓶一次性培养皿（透明聚苯乙

4、烯）1块无色透明塑料袋标准血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸)1份质控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸)1份说明书1份 注*：标准品或质控品的浓度若有改变，将在试剂盒内放通知单，同时电话通知。 【储存条件及有效期】 储存条件 28,防止冷冻。 有效期 个月，试剂盒开启后一次性使用。【适用机型】 无需仪器检测。 【样本要求】按照卫生部规定的“新生儿采血常规”采取足跟血。【检验方法】1.琼脂液配制：将琼脂糖倒入三角烧瓶中，加入100ml双蒸水（7日内）加热煮沸（建议沸腾三次）至完全溶解，（烧瓶中放入一支温度计监控温度）；2.混合液配制：将青霉素酶、抑制剂、菌株孢子悬液加入到营养液瓶中，

5、充分混匀备用；3.当琼脂糖液的温度降至5560时，将混合液全部倒入琼脂糖液中，充分混匀后（避免产生气泡）快速倒入一次性培养皿中，使其成为厚薄均匀、平整光洁的薄层（厚度约mm），待冷却后备用；4.用直径3mm打孔器分别打取标准血片、质控血片和待检血片，按照加样模板所示排列在培养皿上，将培养皿倒置放入37±0.5恒温箱中培养16-18小时；5.菌环量取：在菌环最致密处分别量取标准血片、质控血片和待检血片细菌生长环的直径，将待检血片的细菌生长环直径与标准品相比较，可得出待检血片的苯丙氨酸含量。标准品菌环范围：2 mg/dl时菌环直径为 0.75-1.05cm；4 mg/dl时菌环直径为 1

6、.25-.155cm；8 mg/dl时菌环直径为 1.55-1.85cm；20 mg/dl时菌环直径为2.05-2.35cm；质控品菌环范围： 阴性质控菌环直径应 2mg/dl浓度点的直径；阳性质控菌环直径应 4mg/dl浓度点的直径。【参考值（参考范围）】参考值< 4mg/dl【检验结果的解释】1. 苯丙氨酸含量4mg/dl为可疑阳性，原血片复查，苯丙氨酸含量仍4mg/dl，即召回复查；2. 检测结果本身不能成为治疗的惟一因素。必须与其他的临床观察和诊断试验相结合；3. 质控品的结果必须控制在试剂盒要求范围之内，否则实验结果可视为无效。【检验方法的局限性】1.应使用新生儿筛查专用S&a

7、mp;S 903#滤纸采集血斑。使用其他滤纸结果将不同；2.采血时间为出生后72小时，并充分哺乳6次以上，否则会导致假阴性结果。 【产品性能指标】1. 标准品浓度范围：2-20 mg/dl.；2. 批内精密度：CV不大于10 %；3. 批间精密度：CV不大于12 %；4. 准确性：回收率为100125；5. 灵敏度：小于1mg/dl.；6. 特异性：与酪氨酸、色氨酸无交叉反应。【注意事项】1. 本试剂盒为一次性使用产品；不同批号试剂不可混用；超出效期不可使用；仅用于体外检测；2.所有试剂、样本应视为有潜在的传染源，实验结束应采用高压或消毒液浸泡处理。 【参考文献】 卫生部卫生部关于印发新生儿疾病技术规范的通知，附件2。 黄雨三主编新生儿疾病筛查与临床诊断治疗技术操作规范全书2005，2：111-119【生产企业】企业名称：北京协和洛克生物技术研究开发中心地址：北京市海淀区恩济庄18号院4号楼2单元302号邮政编码：100142电话：01051295656 传真：01088140690网址：【医疗器械生产许可证编号】京药管械生产许20040085 号【医疗器械注册证书编号】国食药监械（准）字2005第34004