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文档简介

1、第2讲微生物的培养与应用一、选择题(每小题6分,共24分)1.(2015·江苏三模)培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础,下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是(A)A.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、生长因子及琼脂B.不论何种培养基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.接种微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可以鉴定分解尿素的细菌【解析】微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊营养物质,固体和半固体培养基需添加琼脂,液体培养基不添

2、加琼脂,A项错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌,若出现红色的环带的菌落,则说明其为分解尿素的细菌,D项正确。2.微生物接种方法很多,平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为。下列操作方法错误的是(A)A.划线操作时,将沾有菌种的接种环插入培养基B.平板划线后培养微生物时要倒置培养C.不能将第区域的划线与第区域的划线相连D.在区域中划线前后都要对接种环进行灭菌【解析】划线操作时,将沾有菌种的接种环放在培养基的表面轻轻划线,以避免损坏培养基,A项错误;为避免培养皿盖上水的污染,划线后应进行倒置培养,B项正确;第区域的划线是经过稀释的划线,不能与第区域

3、的划线相连,否则可能观察不到单菌落,C项正确;在区域中划线前后均需对接种环进行灭菌,以使下次划线的菌种只来源于上次划线的末端,D项正确。3.(2015·江苏扬州中学模拟)科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株Q,步骤如图所示,下列相关的叙述中,错误的是(C)A.步骤中,培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源B.步骤中,将锥形瓶放在摇床上充分振荡,使菌株与培养液充分接触C.步骤是利用平板划线法纯化菌株Q,图中所示接种环最少灼烧2次D.为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈越大,说明其降解能力越强【解析】接种环在每次接种前和接种后都要经过灼

4、烧灭菌处理,题图中所示接种环要灼烧6次,C项错误。4.(2015·广州质检)利用农作物秸秆为原料可生产乙醇,生产过程中可采用微生物将秸秆水解或用酶水解,其主要技术流程如图所示,下列相关说法错误的是(B)秸秆碎屑反应罐水解压滤出渣酒精发酵真空分馏A.可用刚果红染色法筛选过程所需的纤维素分解菌B.过程加入的是葡萄糖苷酶C.酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D.酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌【解析】筛选纤维素分解菌可采用刚果红染色法,若产生透明圈,则该细菌能分解纤维素,A项正确;过程加入的是纤维素酶,它是一种复合酶,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,B项错误;酵母菌无氧呼吸产生酒精

5、,C项正确;酒精发酵时为防止杂菌污染,需对培养基进行高压蒸汽灭菌,D项正确。二、非选择题(共76分)5.(15分)(2015·银川一中模拟)醋酸菌和纤维素分解菌是工业中常用的微生物。请分析回答下列问题:(1)在氧气和糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇氧化为乙醛,进而生成醋酸。 (2)为了从某细菌样品中筛选出纤维素分解菌,可采用刚果红染色法进行筛选。如果样品中细菌浓度较低,可以通过选择培养来增加纤维素分解菌的浓度,该过程所用的培养基为液体(填“固体”或“液体”)培养基。为了纯化纤维素分解菌,某同学采用平板划线法进行接种,在做第二次以及其

6、后的划线操作时,应该从上一次划线的末端开始划线。为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (3)将菌种进行临时保存时,可在低温下使用试管斜面保存,但该方法除保存时间短外,菌种还易被污染;若需较长时间保存菌种,可用的方法是甘油管藏法。 【解析】(1)在氧气和糖源都充足时,醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇氧化为乙醛,进而生成醋酸。(2)筛选能够产生纤维素的细菌,可采用刚果红染色法,如果样品中细菌浓度较低,可以通过选择培养来增加纤维素分解菌的浓度。为使菌落逐渐稀释,从而得到单个菌落,故每次划线时应从上一次划线的末端开始划线。为了避

7、免环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(3)临时保藏的菌种易被污染或产生变异;若需较长时间保存菌种,可用的方法是甘油管藏法。6.(15分)(2015·郑州二模)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:(1)巴氏消毒的方法是7075 煮30 min(或80 煮15 min),使用这种方法对生鲜

8、牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不会被破坏。 (2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是图中的B。 (3)图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测每毫升生牛奶中含细菌数为3.4×106个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小(填“偏大”或“偏小”),原因是个别菌落可能由2个或多个细菌形成。 (4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做的改动是减少稀

9、释次数。 【解析】(1)巴氏消毒的方法是指7075 煮30 min或80 煮15 min,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不会被破坏。(2)将液体菌种接种到固体培养基上常用的方法是稀释涂布平板法,所用的接种工具是涂布器,即题图中的B。(3)分析题图可知,牛奶被稀释了104倍,根据培养结果可得每毫升牛奶中含细菌数为(35+33+34)÷3÷0.1×104=3.4×106个。由于经此方法接种培养时当两个或多个菌落重叠在一起时按一个菌落计算,所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。(4)消毒后的牛奶中细菌数目减少,再次用稀释涂

10、布平板法检测细菌数量时应减少稀释次数。7.(16分)(2015·太原外国语中学模拟)回答下列关于微生物的问题。阿拉伯胶是一种多糖,研究者从某地合欢树下距离地表深1015 cm处的土样中初筛到能降解阿拉伯胶的菌株SM01,以下为该菌株的鉴定过程。(1)筛选所用的选择培养基只能以阿拉伯胶作为唯一碳源,其原因是只有能降解阿拉伯胶的微生物能正常生长和繁殖。 (2)SM01的菌落为粉白色,菌落初期呈突起絮状,在显微镜下观察到其菌丝白色致密,且有分生孢子,细胞核直径约1 m,初步推测为真菌。下列属于SM01肯定具有的结构和特征的是ABF(多选)。 A.细胞膜B.核糖体C.拟核

11、D.荚膜E.芽孢F.细胞核(3)在分离纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环。如图是某种划线法操作后菌落生长状况,数字表示划线顺序。某同学以同样方法对某个平板划线后,经一段时间培养,发现第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落的操作失误可能是接种环灼烧后未冷却(或划线未从第一区域末端开始)(填一种)。 (4)为探究阿拉伯胶的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做如图所示实验。该实验的假设是目的菌株(菌株SM01)能分泌降解阿拉伯胶的蛋白质。该实验设计是否合理?为什么?不合理,缺少空白对照。 (5)请根据

12、第(4)小题的分析完善其实验设计:另设置两组同样装置的对照组,其中一组只用上清液,不添加蛋白酶,取出10 mL加入阿拉伯胶溶液中,测定阿拉伯胶的降解率;另一组不用上清液,只用含蛋白酶的溶液,取出10 mL加入阿拉伯胶溶液中,测定阿拉伯胶的降解率。 【解析】(1)筛选能降解阿拉伯胶的菌株SM01需要使用以阿拉伯胶为唯一碳源的选择培养基,因为只有能降解阿拉伯胶的微生物才能在此培养基上正常生长和繁殖,从而可筛选出所需菌株。(2)菌株SM01为真菌,其具有细胞膜、核糖体和细胞核,而没有拟核、荚膜、芽孢等。(3)在分离纯化菌株时,通常使用的划线工具是接种环,接种环在使用前和每一次划线后要进行灼

13、烧灭菌,待接种环冷却后再进行划线,以免高温杀死菌种,导致划线区无法形成菌落。(4)分析题图可知,该实验的假设为目的菌株(菌株SM01)能分泌降解阿拉伯胶的蛋白质;由于该实验设计缺少空白对照,所以设计不合理。8.(15分)(2015·枣庄一模).洗衣机内部的环境非常潮湿,洗衣机使用时间越长,内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机,其内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学,利用内桶背面的污垢进行了相关实验。(1)培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有水、无机盐、碳源和氮源。 (2)鉴定洗衣机污垢是否有菌落时要制备固体培养基,在制备完毕后要进行倒平板操作,将平板

14、倒置的主要目的是防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染。 .我国生活饮用水本质标准中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL,总大肠杆菌菌群不得大于3个/L。(1)检测大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释浓度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为稀释涂布平板法。 (2)用该方法统计样本菌落数时需要(填“需要”或“不需要”)设置对照组,原因是需要判断培养基是否被污染。 (3)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用高压蒸汽灭菌,不可(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。 

15、;【解析】.(1)培养微生物的培养基中一般含有水、无机盐、碳源和氮源等。(2)培养基倒置培养的主要目的是为了防止培养皿盖上的水珠落入培养皿造成污染。.(1)稀释涂布平板法可用于微生物的计数,题述方法即为稀释涂布平板法。(2)计数时为排除其他杂菌的干扰,需要判断培养基是否被污染,所以用稀释涂布法统计样本菌落数时需要设置对照组。(3)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌;由于抗生素能将大肠杆菌杀死,所以不可用加入抗生素的方法防止杂菌感染。9.(15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的

16、葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。 (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成红色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈。 (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲+-+培养基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示无。据表判断,培养基甲不能(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是液体培养基不能用于分离单菌落;培养基乙不能(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌。 【解析】本题考查分解纤维素的微生物的分离的相关知识,同时考查考生对相关知识的识记能力和理解能力。(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高

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