（公开课学案修改）动物细胞融合与单克隆抗体

1、精选优质文档-倾情为你奉上高 二 级 生物 科选修3专题2课 题动物细胞融合和单克隆抗体主备人黎金兰审核人梁碧秋 使用时间2011年4月15日第八周星期五【学习目标】1、理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。2、列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。3、理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。【温故知新】1、抗原：能够引起机体产生_的物质；抗体：能够与抗原发生特异性结合的_。能产生抗体的细胞是_。2、 体液免疫过程 直接刺激 记忆B细胞吞噬细胞B细胞（ ）抗原（ ）抗体抗原与抗体结合，抗原失去活性，最终被吞噬细胞清除。【学习过程】一、动物细胞融合1、概念：动物细胞融合也称_，就是

2、指_动物细胞结合形成_的过程。2、动物细胞融合过程：复习植物体细胞杂交过程，自学书P52，完成下表。比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合融合原理细胞膜的流动性融合前处理用_、_去除细胞壁后诱导原生质体融合用_使细胞分散后诱导细胞融合诱导融合的方法离心、电刺激、振动、PEG等除应用植物体细胞杂交手段外，还有_杂种植株（或杂交细胞）特点杂种植株含有两种生物的遗传物质杂交细胞具有_意义和用途克服远源杂交不亲和的障碍，获得杂种植株突破_，使_成为可能。获得杂交细胞，用于_【例1】只能使动物细胞融合的常用诱导方法是 （ ）APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点？

3、 （ ）A. 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁【例3】动物细胞融合的目的中最重要的是 （ ）A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞三、单克隆抗体思考传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ B淋巴细胞、肿瘤细胞各有什么特点？1、原理：一种B淋巴细胞只分泌一种_，B淋巴细胞在体外_繁殖，而肿瘤细胞具有_增殖的特点，将单个B淋巴细胞与_融合，可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特性，既能_增殖，又能产生_，即单克隆抗体。2、单克隆抗体：_。3、单克隆抗体的制备过程（1）过程：B淋巴细胞+骨髓瘤细胞 _细胞、_细胞、_细

4、胞、_细胞、_细胞_ 杂交瘤细胞 克隆化培养和专一抗体检测_ 单克隆抗体（2）杂交瘤细胞的特点：既能在体外大量_，又能产生_抗体。（3）单克隆抗体的优点：_、_，并能大量制备。4、在生产上的应用：（1）作为诊断试剂，准确识别各种_物质并特异性结合。（2）用于治疗疾病和运载药物，制成“_”。【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 （ ）A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 （ ）A.B淋巴细胞 BT淋巴细胞 C骨髓瘤细

5、胞 D杂交瘤细胞【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体【达标练习】1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞A.B. C.D.2、动物细胞融合和植物原生质融合决定于 （ ） A.细胞膜的流动性 B细胞膜的选择透过性C.细胞质的流动性D细胞质

6、酶的活性3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是 （ ）B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A B C D4、单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是( ) A能使杂交细胞大量增殖 B产生特异性更强的个体 C使细胞融合容易进行 D使产生的抗体纯度更高5、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ） A可以制成诊断盒用于疾病的诊断 B可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C可以利用基因工程技术生产 D可以在生物体内生产，不能体外生产6、单克隆抗体制备过程

7、中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋 呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基 上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存 活并能产生单克隆抗体的细胞是 （ ）A骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞 B脾细胞之间形成的融合细胞C骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞 D脾细胞7、“生物导弹”是指 （ ）A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物8、关于杂交瘤细胞的不正确叙述 （ ）A.含有双亲细胞的遗传物质 B.含有两个染色体组 C.能产生特定抗体 D.体外培养可大

8、量增殖9、（双选）运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是 ( )A.对小动物注射特定抗原 B. 融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞 D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔10、（双选）下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是（ ）AB淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，也能无限增殖D单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显11、（多选）1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是（ ）A.效应B

9、细胞 BT淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D杂交瘤细胞12、（多选）基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞融合，用灭活的仙台病毒处理后，可能获得下列哪些基因型的细胞 （ ）AAAaa BAaBb C Aabb DBBbb13、下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_类物质。（2）d过程是一个_过程，该过程的进行常用_或_的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用_培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_。(4)在培养时通过_分裂方式大量繁殖。

10、D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）_。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_。15、下列是制备分泌抗原X抗体的过程，根据图解回答问题：（1）单克隆抗体是指 。（2）制备单克隆抗体的步骤：将_注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。将步骤获得的B淋巴细胞与步骤培养的骨髓瘤细胞在_的诱导下融合。将诱导后产生的多种细胞，放在_培养基的多孔培养板上培养，筛选。这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_的能力，又具有_的本领。检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量

11、抗该抗原的单克隆抗体。（3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：体外培养法，可获得10g/mL的抗体；动物体内诱生法可获得520mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。（4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_细胞制备的，其化学本质是_，应用于人体，会作为 产生 ，解决这个问题的方法是_。15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？。原因是_。（2）图中为 过程，常用 作为诱导剂。该细胞继承了 ，因此不仅能分泌_ ，还有 本领。（3）该方案的目的是_ _。选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）

12、细胞融合 聚乙二醇（PEG） 灭活的病毒（3）3 选择 杂交瘤细胞 既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2） 抗原 聚乙二醇或灭活的病毒 选择性 产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选，小规模生产选 （4） 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备15、（1）不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合 灭活病毒（或PEG） 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合 聚乙二醇（PEG） 灭活的病

13、毒（3）3 选择 杂交瘤细胞 既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2） 抗原 聚乙二醇或灭活的病毒 选择性 产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选，小规模生产选 （4） 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备15、（1）不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合 灭活病毒（或PEG） 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合 聚乙二醇（PEG） 灭活的病毒（3）3 选择 杂交瘤细胞 既能在体外无限增殖又能产生特异性抗体（4）特异性强、灵敏度高14、（1）化学性质单一，特异性强的抗体（2） 抗原 聚乙二醇或灭活的病毒 选择性 产生专一抗体、无限增殖（3）大量生产选，小规模生产选 （4） 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备15、（1）不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞（2）细胞融合 灭活病毒（或PEG） 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖（3）制备单克隆抗体选择题答案看原题目13、（1）效应B抗原（2）细胞融合 聚乙二醇（PEG） 灭活的病毒（3）3 选择 杂交瘤细胞 既能在体外无限增殖又能产