紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素C

1、维生素C 又称抗坏血酸,是人体正常生理代谢不可缺少的一类有机物1,VC 缺乏会导致坏血病2。VC 在人体内不能合成。目前VC 的测定方法有荧光分析法3、碘量法4、2,4-二硝基苯肼法5、2,6-二氯酚靛酚法6、高效液相色谱法7、铁(-邻菲罗啉-BPR 体系分光光度法8、电位滴定法9。这些方法各有特点,但其操作过程复杂、实验条件难以掌握且准确度欠佳。还原型VC 在紫外区246.0nm 处有最大吸收,且线性良好。但果蔬中其他成分在紫外区也有吸收,干扰较大,需进行本底校正。溶液状态VC 不稳定易氧化,研究以Cu 2+作为催化剂,加速了溶解氧对还原型VC 的氧化。极微量Cu 2+催化效果就相当明显,加

2、热条件下,反应速度快,无需加掩蔽剂。方法简便、快速、准确,测定了香蕉、西红柿10等果蔬中的VC 含量,结果令人满意。1实验部分1.1主要仪器及试剂T 6普析通用紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司;0412-1型高速离心机(220V,50Hz,40W,BS 224S 电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司。35%HPO 3,36%HAc,葡萄糖,EDTA,Fe(NO 33,HCl,CuCl 2,酒石酸,柠檬酸,维生素C;10%的盐酸溶液;3%的HPO 3;8%的HAc;混酸:3mL 3%HPO 3+7mL 8%HAc 稀释定容至50mL 容量瓶;维生素C 标准溶液:称取0.0504g

3、抗坏血酸,以10mL 混酸溶解,并以蒸馏水定容到500mL 容量瓶;CuCl 2溶液(100g/mL :称取CuCl 20.6763g,以蒸馏水溶解并定容到500mL 的容量瓶中。试剂均为分析纯,实验室用水均为二次蒸馏水。1.2测定方法以蒸馏水作空白试剂,在246.0nm 下测定吸光度,以样品溶液与经加Cu(并加热处理后的样品溶液的吸光度之差做标准曲线,由标准曲线计算VC 的含量。还原型维生素C =(C ×V 2×1000/(V 1×W ×100式中C 由标准曲线上计算还原型VC的含量,g/g ;W 样品重,g;V 1测定用样液的体积,mL;V 2样液定

4、容后的体积,mL 。2结果与讨论2.1提取剂的选择VC 不稳定11,为延长VC 的稳定时间,实验采用偏磷酸和醋酸混酸溶液作提取剂。VC 在偏磷酸和醋酸(体积比为37混酸溶液中具有较好的稳定性(图1。2.2最大吸收峰的选择准确吸取2.0mL 的VC 标准溶液于50mL 容量瓶中用蒸馏水定容,然后以蒸馏水作空白,在190400nm 的波长范围内多次进行光谱的连续扫描,确定VC 最大吸收峰在246.0nm 。2.3维生素C 破坏剂的选择基金项目许昌学院科研基金计划预研项目(2008068收稿日期2008-10-07作者简介张立科(1979-,男,讲师,研究方向为环境分析。紫外可见分光光度法测定果蔬中

5、的维生素C(1.河南许昌学院化学化工学院,河南许昌461000;2.河南师范大学化学与环境科学学院,河南省环境污染控制重点实验室,河南新乡453007张立科1,田水泉1,谢太平1,张洪浩1,范顺利2摘要在0450g/mL 线性范围内,以Cu 2+作催化剂,以溶解氧将还原型维生素C (VC 氧化为246.0nm 处无吸收的氧化型VC,实现了样品各紫外干扰成分的本底校正,建立了一种测定果蔬VC 的新方法。方法RSD 在0.32%0.89%之间,实际测定了香蕉、西红柿等样品中的VC 的含量,检出限为0.279g/mL,加标回收率在97.16%100.18%之间。关键词维生素C;紫外分光光度法;果蔬中

6、图分类号O 657.32文献标识码B文章编号1003-5095(2009 01-0050-03吸光度t /min图1VC 在偏磷酸和醋酸中的稳定性·51·第1期张立科等:紫外可见分光光度法测定果蔬中的维生素C 还原VC 的破坏是关键,前人使用NaOH 、H 2O 2、Fe(NO 33等破坏还原VC 13,并对其破坏性进行研究。本文以Cu 2+作为破坏剂,观察Cu 2+的量对还原VC 的破坏作用(表1,发现加入破坏剂后还原VC 已经被完全破坏,测出的仅是Cu 2+的吸光度值。本文提出了反应中Cu 2+不作氧化剂而作为催化剂来催化溶液中的溶解氧去氧化还原型VC,使之在246.0

7、nm 无吸收,对Cu 2+加入量进行了选择(表2。Cu 2+的量不影响VC 在246.0nm 处的吸光度,Cu 2+本身本底吸收小。确定Cu 2+用量为30g 。表1不同用量Cu 2+破坏VC 后的吸光度值Cu 2+/g0.50.50.50.5表2不同用量Cu 2+的吸光度值Cu 2+/g 3050200400600VC/mL 00ABS0.00092.4温度对反应的影响实验考察了温度对催化反应的影响(图2,发现在6080之间吸光度较低,为Cu 2+的吸光度值;而20时吸光度很大,常温下VC 不能很快被破坏,由图2可知100时吸光度又有所增加,这可能是氧化后的VC 被氧化为古洛糖酸的缘故。故选

8、择实验最佳温度为70。 图2温度对反应的影响2.5时间对反应的影响加热时间对反应影响较大,实验发现加热时间在1922min 之间时吸光度值基本稳定,说明此时VC 已被完全破坏,而22min 后吸光度值又开始回升(图3,是氧化型VC 进一步转化成了古洛糖酸,选择加热时间为20min 。图3时间对反应的影响2.6干扰因素对实验的影响葡萄糖、柠檬酸、酒石酸的存在影响维生素C 的测定,上述3种物质100倍于维生素C 时的影响见表3。加入Cu 2+后,吸光度值有所增加,这是由于干扰物质的吸收与Cu 2+的吸收叠加所引起的,实验条件下,100倍干扰物质对测定无影响。表3干扰因素对实验的影响干扰干扰物质的0

9、.3g Cu 2+2mL 干扰物质吸光度物质的吸光度0.2690.280Tartaric acid /酒石酸0.3040.3212.7样品测定称取香蕉4.9362g 、西红柿5.2821g 分别溶于10mL 混酸,在研钵中快速捣碎离心,吸取2mL 的澄清液于50mL 的容量瓶中加入1mL 混酸以蒸馏水定容。取2份上述定容液样品,在相同条件下,每份样品各测定6次,测定吸光度值,精密度及回收率满足要求(表4、表5。表4精密度样品编号123456RSD/%香蕉/g ·mL -1表5回收率样品中VC 含标准VC 加入测定值回收率量/g ·mL -1量/g ·mL -1/g

10、 ·mL -1R /%0.6632.0162.684100.23结论测定维生素C 时,稳定剂和破坏剂的选择是关键。若稳定剂选得不合适,维生素C 就不能稳定存在,容易被氧化并且稳定剂本身也有吸收,影响维生素C 的准确测定。因此,通过实验本文选用偏磷酸和醋酸37的混酸溶液作稳定剂和稀释液,可以延长维生素C 的稳定时间,提高维生素C 的提取率。通过本实验,建立了一个简单、快速测定维生素C 含量的方法,其方法的精密度、准确度均符合要求。适用于水果和蔬菜中维生素C 含量的测定。参考文献123吸光度t /minT /吸光度平均值/g ·mL -1王喜生.人体营养状况的评价方法M.天津:

11、天津科学出版社,1987,323-326.孙振艳,赵中一.荧光分析法测定维生素C J.化学分析计量,2006,4(4.样品45678910111213素CJ.吉林大学学报(医学版,2004,30(5:821-822.耿立威.西红柿中维生素C 的分光光度法测定J.吉林师范大学学报,2003,91-92.叶在荣,周开志,叶红,等.测定维生素C 的提取剂的研究J.食品工业科技,1994,(40:65-67.李军.紫外分光光度法测定果蔬中维生素CJ.河北职业技术师范学院学报,2000,14(1:41-44.谭延华.紫外分光光度法测定还原型维生素CJ.药物分析杂志,1991,11(1:28.王美荣.直接

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13、getables with Ultraviolet Spectrophotom etryZHANG Li-ke 1,TIAN Shui-quan 1,XIE Tai-ping 1,ZHANG Hong-hao 1,FAN Shun-li 2(1.Henan Xuchang University College of Chemistry and Chemical Engineering,Xuchang461000,China;2Henan Key Labora-tory for Environmental Pollution Control,College of Chemistry and EnvironmentalSciences,Henan Normal University,Xingxiang453007,China Key words:VC;ultraviolet spectrophotometry ;fruits and vegetables河北化工·52·第1期通过回归曲线图和各元素的相关系数可以看出个待测元素的回归曲线的线性都很好,相关系数大部分都在0.999以上。2.2讨论采用ICP 测定盐水中的痕量金属,