免疫细胞治疗(1季度培训)ppt课件

1、克利斯蒂娜的世界4545岁进入了肿瘤发岁进入了肿瘤发病高峰，且肿瘤风险病高峰，且肿瘤风险随年龄增加呈几何倍随年龄增加呈几何倍数上升数上升6565岁的老年人患肿岁的老年人患肿瘤的几率是瘤的几率是2525岁年岁年轻人的轻人的5050多倍多倍40岁后肿瘤发病率逐年增长岁后肿瘤发病率逐年增长n 我国每年新发肿瘤病例约我国每年新发肿瘤病例约为为312万例万例n 平均每天平均每天8550人（全国人（全国每分钟有每分钟有6人人被诊断为癌被诊断为癌症）症）肿瘤的治疗肿瘤的治疗攻克癌症攻克癌症 人类人类的第一次的第一次1809年德国医生年德国医生McDowell第一次用手术切除卵巢癌，并取得第一次用手术切除卵巢

2、癌，并取得36年生存期的良年生存期的良好效果。好效果。1895 年伦琴发现了年伦琴发现了X 线线, 1896 年即用年即用X 线治疗了第线治疗了第1 例晚期乳腺癌。例晚期乳腺癌。化学治疗化学治疗 上世纪上世纪40年代用氮芥治疗恶性淋巴瘤取得显著疗效，自此开始了肿瘤年代用氮芥治疗恶性淋巴瘤取得显著疗效，自此开始了肿瘤的化学治疗。的化学治疗。50年代以环磷酰胺、氟尿嘧啶合成为标志是化疗的第二里程碑，年代以环磷酰胺、氟尿嘧啶合成为标志是化疗的第二里程碑，70年代顺铂及阿霉素进入临床并得以广泛应用是化疗的第三里程碑。年代顺铂及阿霉素进入临床并得以广泛应用是化疗的第三里程碑。90年代以年代以后，抗肿瘤的

3、新药不断推出。后，抗肿瘤的新药不断推出。Chester Southam: 在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞结果结果: :注射的癌细胞在注射的癌细胞在健康人健康人体内不生长体内不生长. .注射的癌细胞在注射的癌细胞在癌症病人癌症病人体内可长成大肿瘤。体内可长成大肿瘤。结论：结论：癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究结果为抗癌界带来极大提示，研究结果为抗癌界带来极大提示，19681968年被推选成全美抗癌学会主席。年被推选成全美抗癌学会

4、主席。Science，1957年年 一月一月 125: 158-160 首次证明人体内天然抗癌活性的存在首次证明人体内天然抗癌活性的存在临床信息部临床信息部肿瘤细胞免疫肿瘤细胞免疫 治疗治疗免疫器官免疫器官免疫细胞免疫细胞免疫分子免疫分子 免疫系统是人体的防御体系，一方面清除细菌、病毒等外来异物，另一方面清除体内衰老的无功能细胞以及发生突变的细胞。一个人身上每天有数万亿个细胞在复制，在复制中，约有万分之一到百万分之一的细胞会出现差错，也就是说，。有的突变细胞进一步变为癌细胞。、免疫自稳、免疫自稳编辑编辑ppt “In large, long-lived animals, like most o

5、f the warm-blooded vertebrates, inheritable genetic changes must be common in somatic cells and a proportion of these changes will represent a step toward malignancy. It is an evolutionary necessity that there should be some mechanism for eliminating or inactivating such potentially dangerous mutant

6、 cells and it is postulated that this mechanism is of immunological character.” Sir Frank Macfarlane Burnet 诺贝尔生理学或医学奖诺贝尔生理学或医学奖 1960 肿瘤免疫治疗理论肿瘤免疫治疗理论“免疫监视免疫监视”理论理论 (Immune Surveillance Theory)(Immune Surveillance Theory)“肿瘤免疫编辑肿瘤免疫编辑”(Tumor Immunoediting(Tumor Immunoediting） Elimination: 免疫消除免疫消除 E

7、quilibrium: 免疫平衡免疫平衡 Escape: 免疫逃逸免疫逃逸发病时发病时健康时健康时肿瘤的潜伏期长达肿瘤的潜伏期长达10年以上年以上癌细胞反复进行分裂，约癌细胞反复进行分裂，约3030次后大小约次后大小约0.7cm0.7cm时，初次被影像学识别为时，初次被影像学识别为 “癌症癌症” ；早期癌症被发现时的大小约是早期癌症被发现时的大小约是1cm1cm，重量约是，重量约是1g1g，其中癌细胞的个数约是，其中癌细胞的个数约是1010亿个；亿个；据统计，肿瘤发展到临床诊断，所经过的时间约为据统计，肿瘤发展到临床诊断，所经过的时间约为1010年，年，这期间是防治的黄金时间。这期间是防治的黄

8、金时间。肿瘤的治疗肿瘤的治疗清除微小病灶、残清除微小病灶、残余肿瘤细胞；余肿瘤细胞；增强机体免疫功能；增强机体免疫功能；增强放、化疗的敏增强放、化疗的敏感性；感性；无明显毒副作用。无明显毒副作用。局部快速切除肿瘤局部快速切除肿瘤组织，见效快；组织，见效快；局部减少肿瘤负荷，局部减少肿瘤负荷，对敏感的肿瘤见效对敏感的肿瘤见效快；快；全身减轻肿瘤负荷，全身减轻肿瘤负荷，见效快；见效快；临床信息部临床信息部FDA批准第一个免疫细胞批准第一个免疫细胞树突状细胞在抗肿瘤免疫中发挥重要作用树突状细胞在抗肿瘤免疫中发挥重要作用2010.4.29 2010.4.29 美国食品药品管理局批准美国食品药品管理局批

9、准 Provenge Provenge (sipuleucel-T)(sipuleucel-T)，作为一种治疗晚期前列腺癌患者，作为一种治疗晚期前列腺癌患者的免疫活性细胞，的免疫活性细胞，这标志着癌症进入一种新的治疗：这标志着癌症进入一种新的治疗：自身免疫活性细胞治疗。自身免疫活性细胞治疗。ProvengeProvenge诱导作用是通过抗原提呈细胞诱导作用是通过抗原提呈细胞(APCs)(APCs)负载负载前列腺癌酸性磷酸酶（前列腺癌酸性磷酸酶（PAPPAP）抗原，继而激活肿瘤）抗原，继而激活肿瘤特异的特异的CD8+TCD8+T细胞，诱导抗前列腺癌免疫应答。这细胞，诱导抗前列腺癌免疫应答。这是是

10、FDAFDA首次批准的自体免疫细胞用于治疗肿瘤。首次批准的自体免疫细胞用于治疗肿瘤。前列腺癌是一个比较前列腺癌是一个比较理想的生物治疗模型理想的生物治疗模型发病率高发病率高病情进展病情进展缓慢缓慢肿瘤相关肿瘤相关抗原表达抗原表达化疗疗效化疗疗效有限有限“非必需非必需”组织组织前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因PSA、PAP等等内分泌治疗无效的患者，此内分泌治疗无效的患者，此时肿瘤负荷较小，机体具有时肿瘤负荷较小，机体具有一定的抗肿瘤能力一定的抗肿瘤能力Nat Rev Immunol. 2010, 10: 580-593. ProvengeProvenge疫苗疫

11、苗治疗晚期前列腺癌的机制治疗晚期前列腺癌的机制治疗结果治疗结果受试者：受试者：512名名总体生存期：总体生存期：对照组对照组: 21.7个月个月，治疗组治疗组: 25.8个月个月。3年存活率：年存活率： 治疗组治疗组 32% ，对照组对照组 23%。副作用：主要是发烧、副作用：主要是发烧、发冷、疲劳和疼痛。发冷、疲劳和疼痛。 20112011年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖 Bruce A. Beutler Jules A. Hoffmann Ralph M. Steinman2011年诺贝尔生理学或医学奖揭晓，美国、法国三位科学家因在免疫学方面的发现获奖。其中一半的奖金归于Bru

12、ce A. Beutler和Jules A. Hoffmann，获奖理由是在“Toll样受体和先天免疫激活方面的发现”；另一半奖金归于Ralph M. Steinman，获奖理由是“发现树突状细胞及其在获得性免疫中的作用”。 美籍科学家比尤特勒和卢森堡籍科学家霍夫曼是因为发现“Toll样受体（Toll-like Receptors，TLRs）及其配体”获得2011年诺贝尔生理学或医学奖肿瘤的免疫治疗时代已经来临肿瘤的免疫治疗时代已经来临权威医学杂志纷纷刊文，高度评价免疫权威医学杂志纷纷刊文，高度评价免疫细胞治疗技术的前景细胞治疗技术的前景n肿瘤的免疫治疗时代已肿瘤的免疫治疗时代已经来临经来临n

13、癌症免疫疗法癌症免疫疗法是是2013年最年最值得关注的六值得关注的六大科学领域之大科学领域之一一nDC细胞治疗技术正走进肿瘤免疫细胞治疗技术正走进肿瘤免疫治疗的前沿治疗的前沿临床信息部临床信息部个体化体细胞免疫治疗方案个体化体细胞免疫治疗方案（一）（一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案抽血抽血30-40ml30-40ml外周血外周血第第1 1天天第第3 3次次CIKCIK回输回输第第2 2次次CIKCIK回输回输第第4 4天天第第8 8天天第第1212天天第第1414天天第第

14、1616天天开始下一个疗程的治疗开始下一个疗程的治疗第第1 1次次CIKCIK回输回输( (二）二）化疗联合细胞治疗的增效方案化疗联合细胞治疗的增效方案化疗前化疗前1天抽血天抽血50ml，进行进行CIK或或D-CIK免疫免疫细胞培养细胞培养第一周第一周第二周第二周7天天第第1次开次开始化疗始化疗第第2次开次开始化疗始化疗回输回输CIK或或D-CIK等细胞等细胞化疗前化疗前1天抽血天抽血50ml，进行，进行CIK或或D-CIK免疫细胞培免疫细胞培养养（三）（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案放疗前抽外放疗前抽外周血周血50ml50ml，上午放疗前上午放疗前放放疗

15、疗放放疗疗放放疗疗两周后，当两周后，当天放疗后回天放疗后回输免疫细胞输免疫细胞第第2天天周二周二第第3天天周三周三第第1天天周一周一第第4天天周四周四第第6天天周六周六第第7天天周日周日第第5天天周五周五回输培养回输培养的的CIK、NK、D-CIK等细等细胞胞休休息息休休息息（四）（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案抗肿瘤效应细胞交替使用方案第二周第二周D-CIKD-CIK第三周第三周NKNK第四周第四周D-CIKD-CIK抽抽血血30ml回回输输NKNK抽抽血血50ml抽血抽血30ml，回输回输NK细细胞胞抽血抽血50ml，回输回输D-CIK细细胞胞第五周第五周NKNK第六周第六周D-CIKD-

16、CIK回回输输D-D-CIKCIK第一周第一周NKNK临床信息部临床信息部细细 胞胞 产品产品一、一、CIK细胞细胞 CIK细胞细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)，即细，即细胞因子诱导的杀伤细胞，是一胞因子诱导的杀伤细胞，是一种新型的免疫活性细胞，该细种新型的免疫活性细胞，该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强，胞对肿瘤细胞的识别能力很强，如同如同“细胞导弹细胞导弹”，能精确，能精确“点射点射”肿瘤细胞，但不会伤肿瘤细胞，但不会伤及及“无辜无辜”的正常细胞。尤其的正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患者效果对手术后或放化疗后患者效果显著，能消除残留微小的转移显著，能消除残留微小

17、的转移病灶，防止癌细胞扩散和复发，病灶，防止癌细胞扩散和复发，提高机体免疫力。提高机体免疫力。 DC细胞寻找肿瘤细胞的细胞寻找肿瘤细胞的“雷达雷达”DC又称树突状细胞。又称树突状细胞。它是目前发现的功能最为强大的专职它是目前发现的功能最为强大的专职抗原递呈细胞，也是唯一能激活幼稚抗原递呈细胞，也是唯一能激活幼稚T细胞的抗原递呈细胞，在免疫应答细胞的抗原递呈细胞，在免疫应答的诱导中具有独特地位。经临床研究的诱导中具有独特地位。经临床研究的结果显示，的结果显示，DC细胞可促使患者细胞可促使患者T细细胞增殖分化，还可激活胞增殖分化，还可激活B淋巴细胞，淋巴细胞，全面启动抗体免疫系统产生高效而特全面启

18、动抗体免疫系统产生高效而特异的抗肿瘤效应，帮助重建肿瘤患者异的抗肿瘤效应，帮助重建肿瘤患者对肿瘤细胞的免疫监视功能。对肿瘤细胞的免疫监视功能。DC细胞的功能如同细胞的功能如同“雷达雷达”，通过在，通过在体内随着血液全身各处主动搜索、识体内随着血液全身各处主动搜索、识别肿瘤细胞，并把信息传递给免疫活别肿瘤细胞，并把信息传递给免疫活性细胞，促进其激活和大量繁殖性细胞，促进其激活和大量繁殖。二、二、DC细胞细胞三、三、DC-CIK通过负载肿瘤抗原的通过负载肿瘤抗原的DC与与CIK的有机的有机结合（即结合（即DC-CIK细胞）细胞）能产生特异性和非特异性的双重抗肿能产生特异性和非特异性的双重抗肿瘤效应

19、，二者具有一定的互补作用。瘤效应，二者具有一定的互补作用。DC-CIK细胞不仅能激发、增强肿瘤细胞不仅能激发、增强肿瘤患者特异性抗肿瘤免疫应答，有效清患者特异性抗肿瘤免疫应答，有效清除体内残留病灶，且在患者体内诱发除体内残留病灶，且在患者体内诱发免疫记忆，从而获得长期的抗瘤效应。免疫记忆，从而获得长期的抗瘤效应。DC-CIK自体细胞免疫治疗可以有效自体细胞免疫治疗可以有效杀灭术后的残留肿瘤细胞，防治复发杀灭术后的残留肿瘤细胞，防治复发和转移，减轻放化疗的毒副作用，减和转移，减轻放化疗的毒副作用，减轻患者痛苦，提高患者自身免疫机制轻患者痛苦，提高患者自身免疫机制和生活质量，延长患者生命。和生活质

20、量，延长患者生命。扩增活化的自体淋巴细胞（扩增活化的自体淋巴细胞（Autologous Immunotherapy Lymphocytes,AIL），又称为高效），又称为高效CIK细胞。细胞。 是从患是从患者自体外周血（者自体外周血（50-100ml）中分离单）中分离单个核细胞，经过体外激活扩增培养，得个核细胞，经过体外激活扩增培养，得到的一种在生理条件下能够杀伤肿瘤细到的一种在生理条件下能够杀伤肿瘤细胞的细胞群，主要效应细胞包括胞的细胞群，主要效应细胞包括MHC限制性效应细胞（限制性效应细胞（CD3+CD8+细胞毒细胞毒性性T细胞、细胞、CD3+CD4+辅助性辅助性T细胞）、细胞）、非非MH

21、C限制性效应细胞（限制性效应细胞（CD3+CD56+细胞、细胞、CD3-CD56+NK细胞），可有细胞），可有效辅助恶性肿瘤的治疗。效辅助恶性肿瘤的治疗。四、四、AIL细胞细胞AIL与与CIK培养方法比较培养方法比较50 ml50 ml外周血外周血PBMCA培养法：培养法： B培养法：培养法：A培养法（传统培养法（传统CIK）：）：DI：IFN-1000U.ml-1D2：OKT3 mAb.100ng. ml-1 、IL-2 1000U. ml-1、PHA 100ug.ml-1B培养法（培养法（AIL）：）：DI：IFN-1000U.ml-1 D2：OKT3 mAb.100ng. ml-1 、I

22、L-2 1000U. ml-1、PHA 100ug.ml-1 ，AIL扩增试剂扩增试剂 自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（Natural killer cell，NK）是一种细胞质是一种细胞质中具有大颗粒的细胞，来源于骨中具有大颗粒的细胞，来源于骨髓，主要存在于外周血、脾脏和髓，主要存在于外周血、脾脏和骨髓中。骨髓中。，因此，因此，NK细胞对癌细胞对癌症的监视作用已越来越受到重视。症的监视作用已越来越受到重视。五、五、NK细胞细胞一、一、NK细胞是人体内抗癌活性的第一道防线，可细胞是人体内抗癌活性的第一道防线，可，抑抑制肿瘤的生长及扩散制肿瘤的生长及扩散；二、二、NK细胞会细胞会，因此可限制肿瘤取得

23、所需，因此可限制肿瘤取得所需要的养份进而限制肿瘤生长；要的养份进而限制肿瘤生长；三、三、NK细胞可细胞可，间接提高患，间接提高患者之生活品质；者之生活品质；四、四、副作用低副作用低或几乎无副作用。或几乎无副作用。NK细胞作用原理细胞作用原理六、六、iAPA-细胞细胞SOCS1 是维持机体免疫耐受的重要分子是维持机体免疫耐受的重要分子Si-Yi Chen et al. 发现：发现： SOCS1 (Suppressor of Cytokine Signaling 1) 是一种重要的免疫负调节因子是一种重要的免疫负调节因子(antigen presentation attenuator, APA)

24、，对，对DC细胞的抗原呈递起负调细胞的抗原呈递起负调节作用，限制抗原呈递的时间和强度，节作用，限制抗原呈递的时间和强度，从而限制自体抗肿瘤免疫反应。从而限制自体抗肿瘤免疫反应。该研究第一次提出了抑制免疫负调控该研究第一次提出了抑制免疫负调控因子来增强因子来增强DC疫苗的概念疫苗的概念Nature Biotechnol. 2004; 22:1521-2评述：评述：Nature Biotechnol. 2004;22:1546-53 J. Clin. Invest. 2006;116:90100STATSOCS1JAKCytokineLPSMyD88TRAF6IKK IKK RelAp50I BI

25、KK IRAKMalSOCS1TLR TLR 配体配体TAA s-FlagellinSOCS1-siRNA: 解除解除DC免疫耐受免疫耐受(persistent and enhanced Signals 2/3)肿瘤相关抗原肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen , TAA) intracellular Survivin (T cells) surface MUC1 (T cells and Ab) 分泌型分泌型FliC: TLR5 ligand auto- and paracrine activation of APCs(enhanced Signals 2/3) s

26、iSOCS1-TTiAPA技术治疗肿瘤技术治疗肿瘤iAPA-细胞细胞与传统免疫细胞治疗相比，与传统免疫细胞治疗相比，iAPA技术的优势技术的优势n 结构新颖结构新颖：iAPA因子包含抑制因子包含抑制SOCS1的的siRNA、肿瘤抗原（、肿瘤抗原（Survivin, muc1）和鞭毛蛋白。）和鞭毛蛋白。n 机制新颖机制新颖：iAPA技术不但针对性增强技术不但针对性增强DC免疫活性，而且去除了免疫负性免疫活性，而且去除了免疫负性调控因素，从而更有效的增强了免疫效应。调控因素，从而更有效的增强了免疫效应。n 创新靶点创新靶点：iAPA技术作用的靶点独创性针对免疫活化通络上的关键性分子技术作用的靶点独创性针对免疫活化通络上的关键性分子iAPA分子分子-SOCS144452022年3月1日星期二 iAPA技术完全打破了传统的免疫治疗理念与方法，代表了免疫学理技术完全打破了传统的免疫治疗理念与方法，代表了免疫学理论的一场新的革命，为国际首创、世界一流。许多研究成果已分别发表在国论的一场新的革命，为国际首创、世界一流。许多研究成果已分别发表在国际一流权威杂志，包括际一流权威杂志，包括Nature biotechnology、Nature medicine与与JCI等。等。2008年年3月第月第14期期2004年年12月第月第22期期2006年年1