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文档简介
1、精选优质文档-倾情为你奉上冰冻切片苏木素伊红染色步骤1. 组织包埋,OCT1.用铝箔纸盖子造个模出来 2.在里面放入一些OCT 3.将96孔板垫在液氮上,再将放入OCT的模子放在96孔板上,防止铝箔纸模接触液氮 4.待OCT凝固后,取出,将修剪好的组织放在凝固的OCT上,然后再用OCT将组织包埋起来,不要包埋太多 5.继续放回液氮,待OCT全部凝固后,放入-80°冰箱保存 6.需要切片时,取出,放入冰冻切片机中,使之恢复一段时间,大约30min-60min2. 冰冻机上切片3. 固定:1.将切好的片子自然晾干; 2.固定液A 30s60s 3.水冲洗30s 4.固定液B 60s 固定
2、液A配置方法:80%中性福尔马林+19%-95%乙醇+1%冰醋酸 固定液B配置方法:75%无水乙醇+25%冰醋酸 中性福尔马林:90%PBS+10%-40%甲醛4. 取出已经切好及固定好的冰冻切片(存放方法:短期放入泡沫盒中,放少许水,制作成湿盒保存切片;长期放入-20度冰箱保存,防止组织变形)5. 苏木素染色10min(成熟苏木素制作方法,加入碘酸钠:0.2g碘酸钠/L苏木素)6. 水冲洗7. 1%盐酸乙醇5s(方法:放进去,取出来,重复五次,使得细胞核与细胞质分化)1%hcl+99%无水乙醇8. 放入水中10min9. 放入伊红 5min10. 然后80%,95%,100%乙醇依次洗过,每个2s,将伊红洗净11. 放入二甲苯1-2s12. 第一滴中性树脂在组
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