康即福尔番茄红素对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞影响pdf

1、中国公共卫生 2007 年 1 月第 23 卷第 1 期Chin J Public Healt h J an 2007 V ol . 23 No. 193文章编号: 100120580(2007)0120093203 中图分类号: R 96 文献标志码: A【实验研究】番茄红素对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞影响3董殿军 ,林晓明摘 要: 目的 观察番茄红素对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响。方法 以 015 ,110 ,310 mg/ ( kg·bw) 的番茄红素连续给雄性 Wistar 大鼠灌胃 30 d ,用脂多糖制造大鼠急性肺损伤模型 ,分别在 1 ,4 ,6 h 后支气

2、管肺泡灌洗 ,检测肺泡巨噬细胞吞噬功能、细胞计数以及肺相对重等指标。结果 在各剂量番茄红素作用下 ,肺泡巨噬细胞 吞噬功能明显增强 ,与模型组相比 ,注射脂多糖 1 h 后 ,喂饲番茄红素组吞噬功能增强 ,增强率分别为 1112 % ,2719 % , 3811 % ;4 h 后 ,增强率分别为 519 % ,414 % ,1710 % ;6 h 后 ,增强率分别为 1616 % ,1512 %和 2119 % 。番茄红素 3 个剂 量组之间呈剂量2反应关系( P < 0105) 。结论 番茄红素在 015 ,110 ,310 mg/ ( kg·bw) 剂量下能增强肺泡巨噬细胞

3、的吞噬功能。关键词 : 番茄红素 ;急性肺损伤 ;肺泡巨噬细胞 ;吞噬功能Effect of lycopene on f unction of pulmonary alveolar macrophages of rats acute lung injury DON G Dan2j un , L IN Xiao2m i ng . Depart ment of N ut rition and Food Hygiene , School of Public Healt h , Peki ng U niversity ( Beiji ng 100083 , Chi na)Abstract : Obje

4、ctive To study t he effect of lycopene on t he function of pulmonary alveolar macrophages ( PAMs) of rat组织结构清楚15 , 110 , 310 mg/ kg for 30s acute lung injury ( AL I) . Methods Male rats were gavaged continuously by lycopene wit h 0days ;Lipopolysaccharide was used to make t he model of AL I rats. Af

5、ter 1 hour ,4 and 6 hours , bronchoalveolar lavage wasdone ,and t he function of PAMs ,t he amount of PAMs and t he lung relative weight were determined. Results L ycopene couldincrease t he phagocytic function of PAMs significantly . Compared wit h t he model group ,t he phagocytic function ofPAMs1

6、1112 % ,2719 % ,3811was increased significantly in lycopene groups ,wit h increasing rates of 111 % after injection of L PS for 1hour ,wit h increasing rates of 5 9 % ,44 % ,17 0 % after injection of L PS for 4 hours ,and wit h increasing rates of 166 % ,1512 % ,2111112129 % after injection of L PS

7、for 6 hours ,respectivelely compared wit h t he model group . The phagocytic function ofPAMs was increased obviously by t hree different dose of lycopene ,showing a dose response relationship ( P < 0 05) . Conclusion L ycopene ,at t he dose of 05 ,10 and 30 mg/ kg ,could reinforce t he phagocytic

8、 function ofPAMs.Key words : lycopene ;acute lung injury (AL I) ;pulmonary alveolar macrophages ( PAMs) ;phagocytic function研究显示 ,番茄红素具有抗氧化、预防肿瘤和心血管疾病在同样条件下组予等量大豆色拉油 ,连续灌胃 30 d 。以及调节机体免疫功能等多种生理功能 , 是良好的抗氧化113 Wistar 大鼠肺泡巨噬细胞的获取11 - 6(lipopolysaccharide ,L PS)1311 支气管肺泡灌洗参照文献7进行。剂。为观察番茄红素对脂多糖112132 细

9、胞存活率测定取肺支气管原位灌洗(BAL F) 细胞致急性肺损伤(acute lung injury ,AL I) 大鼠肺泡巨噬细胞(pul1111 %台盼蓝溶液以 1 :1 的比例混合,立即用细monary alveolar macrophages ,PAMs) 吞噬功能的影响 ,为番茄悬液 10l 与 0红素的开发提供基础数据进行了本研究。胞计数盘镜下计数。细胞存活率在 95 %以上 ,方可进行细胞1 材料与方法计数和吞噬功能测定。11 主要仪器与试剂 L PS (美国 Sigma 公司) 。番茄红素14 观察指标及方法 (1) 肺的一般指标:肺的肉眼观察及由北京联合大学生物活性与功能食品重

10、点实验室应用超临界肺切片的镜下观察。(2) 细胞计数:BAL F 以 1 800 r/ min 离心12212112,弃流体萃取技术分离纯化,纯度 95 % 。RPM I 1640 培养基 ( 美5 min ,再以 RPM I 1640 培养液冲散细胞块、洗涤细胞 2 次国 Hy Clione pierce 公司) 。小牛血清 (天津市财慧生化制品去上清液。沉淀部分以含 10 %小牛血清的 RPM I 1640 培养厂) 。其他试剂均为国产分析纯。B80 型低速自动平衡离心液调匀细胞后 ,取少量细胞悬液加入等体积的 1 %冰醋酸 ,进机(河北省安新县白洋离心机厂) ;724 微机型可见光分光光

11、行细胞计数。按实验要求配制成细胞浓度为 1 0×105 个/ ml度计(上海光学仪器厂) ; CO2 培养箱( Yamato ,日本) ; 超净工的巨噬细胞悬液备用。( 3) 细胞吞噬功能的测定: 参照文献作台(北京半导体设备厂) 。8进行。1 2 实验动物及处理将体重为 160170 g 的清洁级雄性1 5 统计分析采用 SPSS 10 0 软件进行单因素方差分析。Wistar 大鼠(北京大学医学部实验动物科学部提供) 120 只 ,2 结果113111211 番茄红素对 AL I 大鼠肺脏的影响(表 1) 表 1随机分为正常对照组(对照组) 、L PS 损伤模型组(模型组) 及可

12、见,在番茄红素 0 5 ,10 和 30 mg/ ( kg·bw) 剂量组 ,每组 8 只。番本实验条件下 , 与对照组比较 , 模型组、番茄红素 0 5 , 1 0 ,茄红素避光水浴以大豆色拉油溶解 ,以灌胃方式给予 ,根据动310 mg/ ( kg·bw) 剂量组右肺重量和肺体比有增加趋势 ,但差物体重调整番茄红素浓度 ,灌胃量 12 ml ,对照组和模型组异无统计学意义。腹腔注射脂多糖后 ,模型组大鼠肺部肉眼可见体积略有基金项目: 北京市自然科学基金对外合作项目( SZ200511417020)增大 ,肺表面存在散在的出血点。对照组光镜下观察 ,可见肺作者单位: 北京

13、大学公共卫生学院营养与食品卫生学系 , 北京,肺泡内无白细胞浸润和红细胞。脂多糖损伤100083组光镜下观察 ,可见肺内血管充血 ,腔内有炎性细胞滞留 ,部作者简介: 董殿军( 1974 - ) ,男 ,内蒙古通辽人 ,主管医师 ,硕士在 读 ,研究方向:营养与食品卫生。 分血管壁上皮脱落 ,周围有中性粒细胞浸润 ;支气管壁呈炎性通讯作者: 林晓明94中国公共卫生 2007 年 1 月第 23 卷第 1 期Chin J Public Healt h J an 2007 V ol . 23 No. 1表 1 番茄红素对 AL I 大鼠右肺重量的影响( x ±s)组别番茄红素1 h4 h

14、6 h( mg/ kg)右肺重( mg)肺体比( %)右肺重( mg)肺体比( %)右肺重( mg)肺体比( %)注 肺体比0110849±792110112879±902111112889±63211112对照组±0±01 ±0模型组010861±77211 ±012925±9222±0 3899±7222 ±012低剂量组05897±3621±02868±162211±015970±149214 ±0411111

15、11中剂量组10853±10920±03965±11024±03944±7022 ±021111111高剂量组30901±5822±01978±9224±02889±13622 ±03:= 右肺(湿) 重( mg) / 体重(g) ; n = 8灶状细胞浸润 ,肺泡隔增宽变厚 ,肺泡内可见水肿液 ,部分可见肺泡结构破坏。但腹腔注射多糖 1 ,4 ,6 h 3 个时点之间的病理改变未见明显区别。212 番茄红素对 AL I 大鼠 BAL F 中 PAMs 数量的影响 ( 表2)

16、 本实验条件下 , 与对照组比较 , 在注射脂多糖 1 , 4 , 6 h后 ,模型组和番茄红素 015 ,110 ,310 mg/ ( kg·bw) 剂量组肺泡 巨噬细胞数量显著增高( P < 0105) ;与模型组比较 ,注射脂多 糖 1 h 后 ,番茄红素 015 mg/ ( kg·bw) 剂量组差异有统计学意 义( P < 0101) ;番茄红素各剂量组之间 ,随着蕃茄红素的剂量增加 ,肺泡巨噬细胞数量有下降趋势 ,但均高于对照组。表 2 番茄红素对 AL I 大鼠 BALF 中 PAMs 的影响( x ±s)番茄红素细胞浓度( ×1

17、05)组别( mg/ kg)1 h4 h6 hn = 8213 番茄红素对 AL I 大鼠 PAMs 吞噬功能的影响(表 3) 在本实验条件下 ,与对照组比较 ,模型组和番茄红素各剂量组 吞噬功能显著增强 ,差异有统计学意义( P < 0105) 。与模型组比较 ,番茄红素各剂量组肺泡巨噬细胞吞噬功能有增加趋势 ,且随番茄红素剂量增加而增强。与模型组比较 ,注射脂多 糖 1 h 后番茄红素 015 ,110 ,310 mg/ ( kg·bw) 剂量组的吞噬功 能分别增强了 1112 % ,2719 %和 3811 % ,且呈剂量2效应关系( r = 01891 , P <

18、 0101 ) ; 4 h 分别增强了 519 % , 414 % 和 1710 % ,呈剂量2效应关系 ( r = 01960 , P < 0101) ; 6 h 分别增 强了 1616 % ,1512 %和 2119 % ,呈剂量2效应关系( r = 01929 ,P < 0101) 。注射脂多糖 6 h 后 ,番茄红素 310 mg/ kg 剂量组肺泡巨噬注010117±014114±015117 ±013细胞的吞噬功能显著增强 ,与模型组相比差异有统计学意义对照组( P < 0105) 。在注射脂多糖后 ,模型组及番茄红素各剂量组1111

19、111111115a111111116a111111114a模型组0023±021±022 ±0肺泡巨噬细胞吞噬功能都有所增强;从时间上看 ,注射脂多糖低剂量组0 531 ±07 bc24 ±07b24 ±06a1 h 后各组增加更为明显。中剂量组1 024 ±03a22 ±05b22 ±08a3 讨论高剂量组3 022 ±02a17 ±06a23 ±05a本实验中 ,与对照组比较 ,模型组和番茄红素各剂量组右111肺重量和肺体比有增加趋势。与对照组比较 ,模型组肉眼和注:与

20、对照组比较,a P < 005 ,b P < 0 01 ;与模型组比较,c P < 0 01 ;光镜下可见肺病理结构明显改变 ,说明在本实验条件下 ,腹腔表 3 番茄红素对 AL I 大鼠 BALF 中 PAMs 吞噬功能的影响( x ±s)组别番茄红素1 h4 h6 h( mg/ kg)吸光度值( A )增强率( %)吸光度值( A )增强率( %)吸光度值( A )增强率( %)对照组011001111025011105±011017011130±011027136 ±0模型组0 00215 ±0 095a10 135 &

21、#177;0 031a10 151 ±0 0271低剂量组111052b1±01026a1±01025a0150239 ±0111120114315190117611616中剂量组1001068b2790141±0027a440174±0032a1521275 ±011111111高剂量组3001049b3810159±0016b1700184±0028 bc219297 ±0:与对照组比较 ,a P < 0105 ,b P< 0101 ;与模型组比较 ,cP < 0105 ;

22、 n = 8注射脂多糖 6 mg/ kg 造成了大鼠急性肺损伤。与对照组比较 ,脂多糖损伤组肺泡巨噬细胞数量增多明显。说明由于脂多糖造成肺损伤后 ,可能是大量的肺泡巨噬细胞向肺部聚集吞噬的结果。同时 ,随着番茄红素剂量的增加 ,肺泡巨噬细胞数量有减少趋势 ,但高于对照组。表明随着番茄红素剂量增加 ,可能在一定程度上缓解由于吞噬活动造成的肺泡巨噬细胞聚集作用。实验表明 ,在注射脂多糖 1 ,4 ,6 h 后的不同时点内 ,随着番茄红素剂量增加 ,肺泡巨噬细胞吞噬功能逐渐增强;在脂多糖 注射 6 h 后 ,与模型组比较 ,番茄红素 310 mg/ ( kg·bw) 剂量组肺巨噬细胞吞噬功

23、能差异有统计学意义。说明番茄红素在一定剂量下 ,可能对脂多糖造成的急性肺损伤的大鼠的肺泡巨噬细胞有一定的保护作用 ,从而维持其吞噬活性。参考文献1Matos HR ,Di Mascio P , Medeiros MH. Protective effect ofly2copene on lipid peroxidation and oxidative DNA damage in cell cultureJ . Arch Biochem Biophys ,2000 ,383 (1) :56 - 59 .2潘洪志 ,姜秀梅 ,万丽葵. 番茄红素对 S180 荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究J . 卫生研

24、究 ,2004 ,33 (4) :456 - 457 .23Moore EH ,Napolitano M ,Prosperi A ,et al. Incorporation ofly22copene into chylomicron remnant like particles enhances t heir induction of lipid accumulation in macrophagesJ . Biochem BiophysRes Commun ,2003 ,312 (4) :1216 - 1219 .4Garcia AL ,Ruhl R , Herz U ,et al. Ret

25、inoid and carotenoidenriched2中国公共卫生 2007 年 1 月第 23 卷第 1 期Chin J Public Healt h J an 2007 V ol . 23 No. 195diets influence t he ontogenesis of t he immune system in mice J .验研究J . 食品科学 ,2003 ,24 (4) :133 - 136 .Immunology ,2003 ,110 (2) :180 - 187 .7孙秀泓 ,罗自强. 肺的非呼吸功能基础与临床J . 北京: 人民卫5Hughes DA , Wrigh

26、t AJ , Finglas PM ,et al. Effects of lycopene and生出版社 ,2003 :328 - 329 .lutein supplementation on t he expression of functionally associated8魏雪涛 , 薛彬 , 张铣. 氯化镉对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响surface molecules on blood monocytes from healt hy male nonsmokJ . 中华预防医学杂志 ,1998 ,32 (3) :159 - 161 .ersJ . J Infect Dis , 200

27、0 ,182 ( Suppl 1) :S11 - 15 .226袁暾 ,魏大鹏 ,廖林川. 番茄红素对非特异性免疫功能的体外实2(蔡天德编辑 宋艳萍校对)收稿日期: 2006 04 15文章编号: 100120580(2007)0120095202 中图分类号: R 599 文献标志码: A【综述】湖北恩施地区地方性硒中毒研究进展3牟素华 ,胡启托 ,颜玲被誉为硒都的恩施自治州 ,地处湖北省西南 ,与四川、湖南接壤。该地区地质环境中 ,除含有丰富的硒元素外 ,同时还伴随着高镉和高氟的存在 ,其水平均为我国土壤背景值的数1 ,2十倍 。该地区为燃煤型氟中毒严重流行区 ,硒中毒偶尔发生与流行。特别

28、是硒中毒只发生在一定的时间和一定的小地域环境中。现将有关硒中毒的研究进展综述如下。1 恩施自治州硒中毒流行概况据调查统计 ,人硒中毒可上溯到 1923 年 ,至 1987 年后一直未见报道。19231987 年共发生 477 例 ,其中 70 %病人集中在 19591963 年 ,90 %以上病人集中分布在恩施市的沙地、新塘、双河 3 个区 ,尤以双河鱼塘坝村发病最为突出 ,当地19631964 年间全村 23 人有 19 人发生中毒 ,牲畜因中毒全部死亡。其余少数病人分布在恩施来抚、巴东的南潭、后门 ,3宣恩的沙坨等村 。猪硒中毒在牲畜中最具代表性 ,197941987 年间主要集中于宣恩沙

29、坨 ,巴东南潭、后门村 。无论是人或畜硒中毒的病例分布 ,都在特定时期、特定条件下集中在某一地区呈暴发流行。如人的硒中毒自 20 世纪 60 年代大规模暴发流行后 ,人群硒中毒现象已逐渐消失 ,猪的硒中毒还时有发生。2 硒中毒的流行因素211 地理因素研究结果表明 ,硒中毒主要发生在有石煤的 高硒环境地带。硒来源于石煤(硒含量均值为14319 mg/ kg) ,石煤风化释放至土壤 ,特别是出露表浅的高硒石煤给上覆地层造成影响。地层剖面分析表明 ,随着土层的加深直至成土母质(风化石煤) 和母岩(石煤) 含硒量逐级成倍增加。调查证实 ,恩施市有 240 个村为高硒区 ,总面积达 2 000 km2 ,以估计的岩石风化速率计算 ,全州每年因石煤风化释放的硒至少有2 ,37 722 kg 以上。由于地形地貌复杂 ,使高硒区的空间分布不具连续性 ,成点状、线状或小片状分布。因此 ,目前 240 个高硒村中只有 12 个村发生过硒中毒 ,其分布也呈点状或灶状。3 基金项目: 湖北省卫生厅重点资助课题( WJ 01587)作者单位: 湖北民族学院医学院预防医学教研室 , 湖北恩施445000作者简介: 牟素华( 1957 - ) ,女 ,湖北利川人 ,土家族 ,教授 ,本科 ,主要从事环境医学方面的研究及教学工作。212 食物营养因素在所有硒中