生物学实验复习

1、生物学实验复习一、光学显微镜操作技术一、光学显微镜操作技术 1. 1.制作临时装片制作临时装片 2. 2.临时装片的染色临时装片的染色 3. 3.使用低倍镜、高倍镜观察玻片标本使用低倍镜、高倍镜观察玻片标本1.1.显微镜的使用显微镜的使用（高倍镜下视野暗，看到的细胞大，但数量少）（高倍镜下视野暗，看到的细胞大，但数量少）例题例题1：某同学用显微镜观察装片时，见视野中有甲、：某同学用显微镜观察装片时，见视野中有甲、乙、丙三异物。为判断异物的位置，他先转动目镜，见乙、丙三异物。为判断异物的位置，他先转动目镜，见甲异物动，然后转换物镜，三异物仍然存在。据此，三甲异物动，然后转换物镜，三异物仍然存在。

2、据此，三异物可能在异物可能在A、目镜上、目镜上B、物镜上、物镜上C、反光镜上、反光镜上D、装片上、装片上甲甲乙、丙乙、丙A、D例例2用普通光学显微镜观察切片，当用低倍物镜看清用普通光学显微镜观察切片，当用低倍物镜看清楚后，转换成高倍物镜却看不到或看不清原来观察到的物楚后，转换成高倍物镜却看不到或看不清原来观察到的物体，可能的原因是体，可能的原因是 A物体不在视野中央物体不在视野中央 B切片放反，盖玻片在下面切片放反，盖玻片在下面 C低倍物镜和高倍镜的焦点不在同低倍物镜和高倍镜的焦点不在同一平面一平面 D未换目镜未换目镜ABC例例3用显微镜的一个目镜分别与用显微镜的一个目镜分别与4个不同倍数的物

3、镜个不同倍数的物镜组合来观察血细胞涂片。当成像清晰时组合来观察血细胞涂片。当成像清晰时,每一物镜与载每一物镜与载玻片的距离如图所示。如果载玻片位置不变玻片的距离如图所示。如果载玻片位置不变,用哪一物用哪一物镜在一个视野中看到的细胞最多镜在一个视野中看到的细胞最多D例例4显微镜目镜为显微镜目镜为10，物镜为，物镜为10，视野中被相连，视野中被相连的的64个分生组织细胞所充满。若物镜转换为个分生组织细胞所充满。若物镜转换为40后，后，则在视野中可检测到的分生组织细胞数为则在视野中可检测到的分生组织细胞数为A2个个 B4个个 C8个个 D16个个B思考思考:a.a.滴水滴水b.取材取材c.展平：将材

4、料在载玻片水滴中展平展平：将材料在载玻片水滴中展平d.d.盖片：放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，盖片：放盖玻片时应从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生防止气泡产生e.e.染色或改变溶液浓度时，从一侧滴染色液染色或改变溶液浓度时，从一侧滴染色液或溶液，另一侧用吸水纸吸引或溶液，另一侧用吸水纸吸引f.吸取吸取 例例5植物叶片表皮上分布有大量的气孔，气孔结构如图植物叶片表皮上分布有大量的气孔，气孔结构如图所示。当组成气孔的细胞（保卫细胞）吸水后，会膨胀所示。当组成气孔的细胞（保卫细胞）吸水后，会膨胀变形，气孔开启；反之细胞失水收缩，气孔关闭。请以变形，气孔开启；反之细胞失水收缩，气孔关闭。请以放置一

5、小段时间的菠菜为材料设计一个实验，证明气孔放置一小段时间的菠菜为材料设计一个实验，证明气孔具有开启和关闭的功能。要求写出实验材料与主要用具、具有开启和关闭的功能。要求写出实验材料与主要用具、实验步骤、预测实验结果并作出解释。实验步骤、预测实验结果并作出解释。 实验材料与主要用具：实验材料与主要用具：实验步骤：实验步骤：预测实验结果并作出解释：预测实验结果并作出解释：实验步骤：实验步骤：取菠菜叶，用镊子剥取表皮。取菠菜叶，用镊子剥取表皮。在载玻片上滴一滴清水，将表皮放入清水中，盖上盖玻片，在载玻片上滴一滴清水，将表皮放入清水中，盖上盖玻片，制成临时装片。制成临时装片。将临时装片放在显微镜载物台上

6、，先在低倍镜下找到气孔，将临时装片放在显微镜载物台上，先在低倍镜下找到气孔，移动到视野中央。再换高倍镜进行观察，记录观察到的气孔状移动到视野中央。再换高倍镜进行观察，记录观察到的气孔状态。态。 在盖玻片的一侧滴上浓盐水，在另一侧用吸水纸吸取盖玻在盖玻片的一侧滴上浓盐水，在另一侧用吸水纸吸取盖玻片下的液体，反复做几片下的液体，反复做几 次。次。 继续观察气孔的变化，并做记录。继续观察气孔的变化，并做记录。预测实验结果并作出解释：预测实验结果并作出解释： 在清水中气孔应开启。因为当细胞液浓度大于细胞外溶在清水中气孔应开启。因为当细胞液浓度大于细胞外溶液浓度时，保卫细胞吸水膨胀变形，气孔开启。液浓度

7、时，保卫细胞吸水膨胀变形，气孔开启。在浓盐水中气孔应关闭。因为当细胞液浓度小于细胞外在浓盐水中气孔应关闭。因为当细胞液浓度小于细胞外溶液浓度时，保卫细胞失水收缩，气孔关闭。溶液浓度时，保卫细胞失水收缩，气孔关闭。1.1.淀粉、还原糖、脂肪、蛋白质和淀粉、还原糖、脂肪、蛋白质和DNADNA的鉴定的鉴定2.2.叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离3.3.DNADNA的粗提取的粗提取二、生物体内物质的分离、鉴定技术二、生物体内物质的分离、鉴定技术例题例题: 下列关于可溶性还原性糖、脂肪、蛋白质和下列关于可溶性还原性糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定的鉴定实验，不正确的是：实验，不正确的是：A

8、、在四个实验中，只有两个实验需要进行水浴加热、在四个实验中，只有两个实验需要进行水浴加热B、鉴定用的主要化学试剂依次是：斐林试剂、苏丹、鉴定用的主要化学试剂依次是：斐林试剂、苏丹IV染液、染液、双缩脲试剂、二苯胺试剂双缩脲试剂、二苯胺试剂C、鉴定可溶性还原性糖和蛋白质，都使用、鉴定可溶性还原性糖和蛋白质，都使用NaOH和和CuSO4溶液，原理基本相同溶液，原理基本相同D、在四个实验中，鉴定的都是细胞中的化学成分，一、在四个实验中，鉴定的都是细胞中的化学成分，一般先提取组织样液般先提取组织样液C叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同例题例题.（2005广东卷第广

9、东卷第4题）叶绿体色素的纸层析结题）叶绿体色素的纸层析结果显示。叶绿素果显示。叶绿素b位于层析滤纸的最下端，原因是位于层析滤纸的最下端，原因是 A分子量最小分子量最小 B分子量最大分子量最大 C在层在层析析液中的溶解度最小液中的溶解度最小 D在层析液中的溶解度最大在层析液中的溶解度最大C例题例题:分别在分别在A、B、C三个研钵中家三个研钵中家2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。即：深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。处理处理ABC

10、SiO2（少量）（少量）+CaCO3 （少量）（少量）-+95%乙醇（乙醇（10毫升）毫升）+-+蒸馏水（蒸馏水（10毫升）毫升）-注：注：“+”表示加；表示加；“-”表示不加。表示不加。试回答：试回答：(1)A处理得到的溶液颜色是处理得到的溶液颜色是_，原因是，原因是_.(2) B处理得到的溶液颜色是处理得到的溶液颜色是_，原因是，原因是_.(3) C处理得到的溶液颜色是处理得到的溶液颜色是_，原因是，原因是_.黄绿色黄绿色几乎无色几乎无色深绿色深绿色部分叶绿素受到破坏部分叶绿素受到破坏叶绿素不溶于水叶绿素不溶于水大量叶绿素溶于乙醇中大量叶绿素溶于乙醇中原理原理: a.DNA在氯化钠溶液中的

11、溶解度在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改是随着氯化钠的浓度的变化而改变的变的.当氯化钠的物质的量浓度为当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时时,DNA的溶解度的溶解度最低最低. b.DNA不溶于酒精溶液中不溶于酒精溶液中,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液精溶液过程过程: 1.提取鸡血细胞的细胞核物质提取鸡血细胞的细胞核物质 2.溶解细胞核内的溶解细胞核内的DNA 3.析出含析出含DNA的粘稠物的粘稠物 4.滤取含滤取含DNA的粘稠物的粘稠物 5.将将DNA的粘稠物再溶解的粘稠物再溶解 6.过滤含有过滤含有DNA的氯化钠溶液的氯化钠溶

12、液 7.提取含杂质较少的提取含杂质较少的DNA思考思考:1.可否用哺乳动物血细胞可否用哺乳动物血细胞 代替鸡血细胞作为实验材料代替鸡血细胞作为实验材料?2.本实验两次加蒸馏水本实验两次加蒸馏水,两次析出两次析出DNA,三次过滤三次过滤,其目的及所其目的及所用析出剂分别是什么用析出剂分别是什么?第一次加入蒸馏水是为了促使鸡血细胞吸水膨胀第一次加入蒸馏水是为了促使鸡血细胞吸水膨胀,得核内得核内DNA第二次加入蒸馏水是为了降低第二次加入蒸馏水是为了降低NaCl的浓度的浓度,以便析出以便析出DNA第一次析出第一次析出DNA利用的是利用的是DNA在在0.14mol/L NaCl中溶解度最低的原中溶解度最

13、低的原理理第二次析出是利用第二次析出是利用DNA极不溶于冷酒精极不溶于冷酒精,而其他杂质而其他杂质(如蛋白质如蛋白质)在冷在冷酒精中溶解度较高的原理酒精中溶解度较高的原理第一次过滤为了得核物质滤液第一次过滤为了得核物质滤液第二次过滤为了得纱布上粘稠物第二次过滤为了得纱布上粘稠物第三次过滤为了得含第三次过滤为了得含DNA的滤液的滤液不能不能,因为哺乳动物成熟红细胞中无细胞核因为哺乳动物成熟红细胞中无细胞核,无无DNA例题例题.（广东卷第（广东卷第32题）下表是关于题）下表是关于DNA粗提取与鉴定实粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正

14、确的是 试剂试剂操作操作作用作用A柠檬酸钠溶柠檬酸钠溶液液与鸡血混合与鸡血混合防止血液凝固防止血液凝固B蒸馏水蒸馏水与鸡血细胞混合与鸡血细胞混合保持细胞形状保持细胞形状C蒸馏水蒸馏水加入到溶解有加入到溶解有DNA的的NaCl中中析出析出DNA丝状物丝状物D冷却的酒精冷却的酒精加入到过滤后加入到过滤后DNA的的NaCl中中产生特定的颜色反产生特定的颜色反应应（AC）种群密度的取样调查种群密度的取样调查n样方法样方法n标志重捕法标志重捕法四、调查、统计法四、调查、统计法例题：（例题：（20042004天津高考题）调查天津高考题）调查B B草原某种双子叶草本植物种群密度时，设草原某种双子叶草本植物种

15、群密度时，设计如下调查步骤：计如下调查步骤：选取选取40404040cmcm为最佳样方面积；为最佳样方面积；在该物种分布较密集的地方取在该物种分布较密集的地方取5 5个样方；个样方；计算每个样方该植物个体数，若计算结果由多到少依次为：计算每个样方该植物个体数，若计算结果由多到少依次为：N N1 1、N N2 2、N N3 3、N N4 4、N N5 5, ,则将则将N N3 3种群密度的估计值，作为种群密度的估计值。种群密度的估计值，作为种群密度的估计值。请指出以上设计方案的错误，并加以改正。请指出以上设计方案的错误，并加以改正。 五、实验设计的一般步骤五、实验设计的一般步骤完成该实验的最佳程

16、序完成该实验的最佳程序)现象（胚芽鞘向光弯曲生长）现象（胚芽鞘向光弯曲生长） 提出问题（此现象是否与单侧光提出问题（此现象是否与单侧光照有关）照有关） 假设（此现象与单侧光照有关）假设（此现象与单侧光照有关）设计实验（单侧光照与常态均匀设计实验（单侧光照与常态均匀光照对照）光照对照）结果（单侧光照处理向光弯曲结果（单侧光照处理向光弯曲生长，对照处理则直立生长）生长，对照处理则直立生长）结论（证实了假设成立）。结论（证实了假设成立）。科学性原则科学性原则等量性原则等量性原则单一变量原则单一变量原则对照性原则对照性原则2.2.实验设计的原则实验设计的原则a.a.空白对照空白对照不给对照组任何处理因

17、素不给对照组任何处理因素c.c.相互对照相互对照不单设对照组，而是几个实验组相互对照不单设对照组，而是几个实验组相互对照对照的常用对照的常用方法方法：b.b.自身对照自身对照对照和实验都在同一研究对象上进行对照和实验都在同一研究对象上进行3.3.实验设计的基本思路实验设计的基本思路探究性实验题和验证性实验题的特点和答题技巧探究性实验题和验证性实验题的特点和答题技巧【例例1】补充完成下面探究性实验中的缺项补充完成下面探究性实验中的缺项部分。部分。（1）实验目的：探究）实验目的：探究C3植物和植物和C4植物叶植物叶片中淀粉粒的存在位置。片中淀粉粒的存在位置。（2）实验假设：）实验假设：（3）材料用

18、具：盆栽天竺葵（）材料用具：盆栽天竺葵（C3植植物）、盆栽玉米（物）、盆栽玉米（C4植物）、酒精、植物）、酒精、碘液、显微镜、大烧杯、酒精灯、碘液、显微镜、大烧杯、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、清载玻片、盖玻片、镊子、滴管、清水等。水等。（4）实验步骤：）实验步骤： （5）结果预测：）结果预测：【例例2】补充完成下面验证性实验中的缺项补充完成下面验证性实验中的缺项部分。部分。（1）实验目的：验证）实验目的：验证C3植物和植物和C4植物叶片植物叶片中淀粉粒的存在位置分别是叶肉细胞中淀粉粒的存在位置分别是叶肉细胞和维管束鞘细胞。和维管束鞘细胞。（2）实验原理：）实验原理： （3）材料用具：盆

19、栽天竺葵（）材料用具：盆栽天竺葵（C3植物）、盆植物）、盆栽玉米（栽玉米（C4植物）、酒精、碘液、显植物）、酒精、碘液、显微镜、大烧杯、酒精灯、载玻片、盖微镜、大烧杯、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、清水等。玻片、镊子、滴管、清水等。（4）实验步骤与结果）实验步骤与结果 （5）实验结论：）实验结论： 答案答案（2）实验假设：）实验假设： 如果如果C3植物叶片中淀粉粒只存在植物叶片中淀粉粒只存在于叶肉细胞中，那么于叶肉细胞中，那么C3植物叶片植物叶片经酒精脱色、碘液染色后叶肉细胞经酒精脱色、碘液染色后叶肉细胞就会变成蓝色；就会变成蓝色； 如果如果C3植物叶片中淀粉粒只存在于植物叶片中淀粉粒只

20、存在于维管束鞘细胞中，那么维管束鞘细胞中，那么C3植物叶植物叶片经酒精脱色、碘液染色后维管片经酒精脱色、碘液染色后维管束鞘细胞就会变成蓝色；束鞘细胞就会变成蓝色； 如果如果C3植物叶片中淀粉粒既存在植物叶片中淀粉粒既存在于叶肉细胞中又存在于维管束鞘细于叶肉细胞中又存在于维管束鞘细胞中，那么胞中，那么C3植物叶片经酒精脱植物叶片经酒精脱色、碘液染色后叶肉细胞和维管色、碘液染色后叶肉细胞和维管束鞘细胞都会变成蓝色；束鞘细胞都会变成蓝色；C4植物植物也是如此也是如此。（2）实验原理：）实验原理： 因为因为C3植物叶片中只有叶肉细植物叶片中只有叶肉细胞中含有淀粉粒，所以天竺葵胞中含有淀粉粒，所以天竺葵

21、叶片经脱色、碘液染色后，叶叶片经脱色、碘液染色后，叶肉组织变成蓝色，而肉组织变成蓝色，而C4植物叶植物叶片中只有维管束鞘细胞中含有片中只有维管束鞘细胞中含有淀粉粒，所以玉米叶片经脱色、淀粉粒，所以玉米叶片经脱色、碘液染色后，维管束鞘细胞变碘液染色后，维管束鞘细胞变成蓝色。成蓝色。 （4）实验步骤）实验步骤 实验前，将天竺葵、玉米在暗处放置实验前，将天竺葵、玉米在暗处放置几小时几小时,将天竺葵、玉米在光下照射几小时。将天竺葵、玉米在光下照射几小时。（目的是使叶片中形成淀粉粒）（目的是使叶片中形成淀粉粒） 各摘取一片健康的叶片，分别水浴酒精加热脱各摘取一片健康的叶片，分别水浴酒精加热脱色，清水冲洗

22、后用碘液染色。（酒精脱色便色，清水冲洗后用碘液染色。（酒精脱色便于观察）于观察）对比观察上述处理过的两种叶片对比观察上述处理过的两种叶片 。 （不（不出现对实验现象的描述）出现对实验现象的描述） 或为或为: 将上述处理的叶片分别做成叶片横将上述处理的叶片分别做成叶片横切的临时装片，用显微镜观察两种叶片染切的临时装片，用显微镜观察两种叶片染成蓝色的部位。（显微观察，以便确定淀成蓝色的部位。（显微观察，以便确定淀粉粒存在的位置。不出现对实验现象的描粉粒存在的位置。不出现对实验现象的描述）述） （4）实验步骤）实验步骤实验前，将天竺葵、玉米在暗处放置实验前，将天竺葵、玉米在暗处放置几小时几小时,然后将天竺葵、玉米在光下照然后将天竺葵、玉米在光下照射几小时。射几小时。 （目的是使叶片中形成淀（目的是使叶片中形成淀粉粒）粉粒）各摘取一片健康的叶片，分别水浴酒各摘取一片健康的叶片，分别水浴酒精加热脱色，清水冲洗后用碘液染精加热脱色，清水冲洗后用碘液染色。（酒精脱色便于观察）色。（酒精脱色便于观察）对比观察上述处理过的两种叶片对比观察上述处理过的两种叶片 。 可可以看到天竺葵叶片的叶肉组织被染成以看到天竺葵叶片的叶肉组织被染成蓝色，网状叶脉没有变蓝；玉米叶片蓝色，网状叶脉没有变蓝；玉米叶片中的平行叶脉被染成蓝色，叶肉组织中的平行叶脉被染成蓝色，叶肉组织没有变蓝。