色谱分析步骤

1、化学化学化学12样品的采集样品的采集3样品中各组分样品中各组分的分离测定的分离测定4数据处理与结果的表达数据处理与结果的表达样品的制备样品的制备样品的处理样品的处理色谱分析色谱分析色谱分析的四个步骤色谱分析的四个步骤化学样品中欲测组分的含量很低样品中欲测组分的含量很低原始样品的基体干扰大原始样品的基体干扰大样品是粘滞的流体、胶体溶液或者固体样品是粘滞的流体、胶体溶液或者固体 样品的处理样品的处理需要进行样品处理需要进行样品处理化学样品的处理样品的处理样品的采集样品的采集v取样点的选择取样点的选择v样品的收集样品的收集v样品的运输与储存样品的运输与储存化学 固体试样固体试样 不均匀试样，应选取不

2、同部位进不均匀试样，应选取不同部位进 行采样，以保证所采试样的代表性。行采样，以保证所采试样的代表性。液体试样液体试样 一般比较均匀，取样单元可较少。一般比较均匀，取样单元可较少。 当物料的量较大时，应从不同的位当物料的量较大时，应从不同的位 置和深度分别采样，混合均匀后作置和深度分别采样，混合均匀后作 为分析试样。为分析试样。样品的处理样品的处理化学气体试样气体试样泵：用泵将气体泵入取样容器。泵：用泵将气体泵入取样容器。固体吸附剂采样：是让一定量气体通过装有固体吸附剂采样：是让一定量气体通过装有吸附剂颗粒的装置，收集非挥发性物质。吸附剂颗粒的装置，收集非挥发性物质。过滤法采样：用于收集气溶胶

3、中的非挥发性过滤法采样：用于收集气溶胶中的非挥发性组分。组分。样品的处理样品的处理化学样品的处理样品的处理样品的制备样品的制备 将样品中预测组分与样品基体和将样品中预测组分与样品基体和干扰组分分离、富集和转化成色谱仪干扰组分分离、富集和转化成色谱仪器可分析的形态。器可分析的形态。化学样品的处理样品的处理样品的制备样品的制备制样程序制样程序破碎破碎过筛过筛混匀混匀缩分（四分法）缩分（四分法）先用粗筛，随试样颗粒逐渐先用粗筛，随试样颗粒逐渐减小改用细筛减小改用细筛粗、中、细碎粗、中、细碎化学 粗碎粗碎中碎中碎弃去弃去粗副样粗副样细碎细碎过筛过筛混匀混匀缩分缩分细副样细副样分析试样分析试样过筛、混过

4、筛、混匀匀、缩分、缩分弃去弃去过筛、混过筛、混匀匀、缩分、缩分制样程序制样程序样品的处理样品的处理化学样品的处理样品的处理样品处理技术样品处理技术液液萃取液液萃取液液液萃取液液液萃取固固萃取技术固固萃取技术固固液萃取技术固固液萃取技术萃取技术萃取技术液体样品液体样品 索式提取索式提取超声提取超声提取加溶溶萃取加溶溶萃取液声提取技术液声提取技术超临流体超临流体 萃取技术萃取技术固体样品固体样品化学色谱方法选择色谱方法选择色谱方法色谱方法适用对象适用对象 GC GC HPLC HPLC SFC SFC TLC TLC CE CE气体气体液体液体固体固体 专一性专一性 样品样品气体样品；气体样品；挥

5、发性液体挥发性液体异构体；异构体；化学性质化学性质稳定的样品稳定的样品液体样品；液体样品；热不稳定热不稳定的样品；的样品；异构体；异构体；离子性样品离子性样品固对分子固对分子质量约质量约10000的的低聚物低聚物液体液体样品样品离子离子;中性样品中性样品;固对分子固对分子质量大的样品质量大的样品化学气相色谱分析方法气相色谱分析方法气相色谱基本流程气相色谱基本流程气路系统气路系统进样系统进样系统分离系统分离系统温控系统温控系统检测系统检测系统数据记录数据记录与处理与处理化学气相色谱分析方法气相色谱分析方法GCGC仪器基本结构示意图仪器基本结构示意图化学高效液相色谱分析方法高效液相色谱分析方法高效

6、液相色谱基本流程高效液相色谱基本流程化学超临界流体色谱分析方法超临界流体色谱分析方法超临界流体色谱仪基本流程超临界流体色谱仪基本流程化学薄层色谱分析方法薄层色谱分析方法制板制板点样点样展开展开定位分析定位分析化学 毛细管电泳毛细管电泳清洗系统清洗系统电极槽和电极槽和进样系统进样系统毛细管毛细管检测器检测器铂电极铂电极电极槽电极槽恒温系统恒温系统 记录和记录和数据处理数据处理毛细管电泳系统基本流程毛细管电泳系统基本流程化学色谱分析色谱分析进样系统进样系统分离系统分离系统检测系统检测系统数据记录数据记录与处理与处理v确定仪器配置确定仪器配置 v确定初始操作条件确定初始操作条件 v分离条件优化分离条

7、件优化 v定性鉴定定性鉴定 定量分析定量分析 化学色谱分析色谱分析考虑考虑v采用什么进样装置、色谱柱、检测器？采用什么进样装置、色谱柱、检测器？v采用什么载气？采用什么载气？v采用什么电源装置？采用什么电源装置？仪器配置仪器配置化学进样装置进样装置v手动进样系统手动进样系统-微量注射器微量注射器 、固相微萃取进样器固相微萃取进样器 v液体自动进样器液体自动进样器 v阀进样系统阀进样系统 - 液体进样阀液体进样阀、气体进样阀气体进样阀 v吹扫捕集系统吹扫捕集系统 v热解吸系统热解吸系统 v顶空进样系统顶空进样系统 v热裂解器进样系统热裂解器进样系统 色谱分析色谱分析化学色谱柱参数色谱柱参数色谱分

8、析色谱分析柱长，内径柱长，内径粒径粒径孔径孔径比表面积比表面积基质：硅胶，聚合物等基质：硅胶，聚合物等硅胶表面性质硅胶表面性质载碳量载碳量键合试溶键合试溶柱的物理性质柱的物理性质柱的化学性质柱的化学性质分离目的分离目的决定决定 样品性样品性质决定质决定化学气固色谱检测器气固色谱检测器v1.1.热导池检测器（热导池检测器（TCDTCD）v2. 2. 氢火焰离子化检测器（氢火焰离子化检测器（FIDFID）v3. 3. 电子捕获检测器（电子捕获检测器（ECDECD）v4. 4. 火焰光度检测器（火焰光度检测器（FPDFPD）高效液固色谱检测器高效液固色谱检测器v1 1、紫外可见分光光度检测器、紫外可

9、见分光光度检测器v2 2、荧光检测器、荧光检测器v3 3、示差折光检测器、示差折光检测器v4 4、二极管阵列检测器、二极管阵列检测器色谱分析色谱分析化学色谱分析色谱分析载气载气v常用的载气有氢气、氮气、氦气等。氢气、常用的载气有氢气、氮气、氦气等。氢气、氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载氦气的分子量较小常作为填充柱色谱的载气；氮气的分子量较大，常作为毛细管气；氮气的分子量较大，常作为毛细管气气固色谱固色谱的载气；气固色谱的载气；气固色谱质谱质谱用氦气作为用氦气作为载气。载气。化学色谱分析色谱分析高加电源高加电源v（1 1）0 03030 kV kV 稳定、连续可调的直流电稳定、连续可调的直流

10、电源；源；v（2 2）具有恒加、恒流、恒功率输出；）具有恒加、恒流、恒功率输出；v（3 3）电场强度程序控制系统；）电场强度程序控制系统；v（4 4）电加稳定性：）电加稳定性：0.1%0.1%；电源极性易转换；电源极性易转换；化学色谱分析色谱分析确定初始操作条件确定初始操作条件v当样品准备好，且仪器配置确定之后，就当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，主要包括进样量、进样口温度、分离条件，主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和流动固流速等检测器温度、色谱柱温度和流动固流速等。 化学色谱分析色谱分析分离

11、条件优化分离条件优化v分离条件优化目的就是要在最短的分析时分离条件优化目的就是要在最短的分析时间内达到符合要求的分离结果。间内达到符合要求的分离结果。v如根据实际情况改变柱长、流动固以及其如根据实际情况改变柱长、流动固以及其流速、柱温或者更换固定固等来达到更好流速、柱温或者更换固定固等来达到更好的分离效果。的分离效果。v 分析速度分析速度 分离度分离度灵敏度灵敏度化学色谱分析色谱分析定性鉴定定性鉴定v利用保留值及其规律定性利用保留值及其规律定性 利用纯物对照定性利用纯物对照定性 利用文献值对照定性利用文献值对照定性v利用选择性检测器定性利用选择性检测器定性v联用方法定性联用方法定性v化学方法辅

12、助定性化学方法辅助定性化学色谱分析色谱分析定量分析定量分析v归一化法：归一化法：要求试样中所有要求试样中所有n个组分全部流出色个组分全部流出色谱柱，并全部出峰！谱柱，并全部出峰！ v标准曲线法：标准曲线法：准确称取样品准确称取样品m，入一定量的，入一定量的某纯物质作内标物某纯物质作内标物ms，然后进行色谱分析。根据，然后进行色谱分析。根据待测组分和内标物的峰面积及内标物的重量就可待测组分和内标物的峰面积及内标物的重量就可求得待测组分的含量。求得待测组分的含量。 v标准入法标准入法化学参考文献参考文献11杜斌，郑鹏武杜斌，郑鹏武. .实用现代色谱技术实用现代色谱技术M.M.郑州大学出版社，郑州大学出版社，2009200922苏立强，郑永杰苏立强，郑永杰. .色谱分析法色谱分析法M.M.北京：清华大学出版社，北京：清华大学出版社，2009200933傅若农傅若农. .色谱分析概论色谱分析概论M.M.北京：化学工业出版社，北京：化学工业出版社，19991999 44王立，汪正范王立，汪正范 . . 色谱分析样品处理色谱分析样品处理M.M.北京：化学工业出版社，北京：化学工业出版社，2006200655