门脉高压性胃病动物模型复制及发病机理研究

1、门脉高压性胃病动物模型复制及发病机理研究【摘要】目的复制大鼠门脉高压性胃病(PHG)动物模型并研究其发病机理。 方法Wistar大鼠硫代乙酰胺(TAA)腹腔注射每日1次维持，双色素造影法直接观察大鼠病程中胃壁动静脉短路(A-V shunt)开放情况并作定量计数。 结果大鼠第8周肝硬变形成。单位面积胃壁A-V shunt 计数较正常轻度增加(P0.05)，第12周增加达显著性意义(P0.01)，16周最高峰。A-V shunt与门脉压上升呈正相关(r=0.910,P0.01)。 结论肝硬变门脉高压病程中，胃壁A-V shunt 异常开放致粘膜有效血量不足是并发PHG重要原因。大鼠TAA用药16周

2、适宜作为PHG模型。【关键词】门脉高压性胃病实验模型发病机理 Experimental model and pathogenesis of portal hypertensive gastropathyGuan Honggen, Chen Yiren, Qian Haixing, et al. Department of General Surgery, First Affiliated Hospital, Suzhou Medical College, Suzhou 215006【Abstract】ObjectiveTo investigate pathogenesis and establ

3、ish an experimental model of portal hypertensive gastropathy (PHG). MethodThioacetamide (TAA) were intraperitoneally injected into Wistar rats once a day. In the pathological process, arterio-venous shunts (A-V shunt) of gastric wall in the rats were observed by dual dye injection quantitatively. Re

4、sultA-V shunt number was increased slightly at 8th week(P0.05) when cirrhosis occurred, increased significantly at 12th week (P0.01), and reached the peak at 16th week. FPP was elevated with the increase of A-V shunts. A-V shunts were positively correlated with the elevation of portal pressure (r=0.

5、910, P0.01). ConclusionDuring the process of portal hypertension, abnormal opening of A-V shunts in gastric wall resulted in the decrease of gastric mucosal effective blood content, which might be the pathogenesis of PHG. The rats induced by TAA for 16 weeks may be used as experimental model of PHG.

6、【Key words】Portal hypertensive gastropathyExperimental modelPathogenesis我们用双色素造影法对硫代乙酰胺(TAA)诱发大鼠肝硬变并继续维持用药病程中，胃壁动静脉短路(A-V shunt)开放的动态变化进行形态定量计数研究，以A-V shunt异常开放作鉴定指标建立PHG模型，探讨门脉高压性胃病(PHG)发病机理。材料与方法1. 动物处理Wistar雄性大鼠，体重160180g(核工业总公司实验动物中心提供)。TAA蒸馏水配制成3%溶液，大鼠腹腔注射60 mg/kg(2 ml/kg)每日1次维持，于0、8、10、12、14、1

7、6、18周每次随机取8只用于研究，总数56只。2. 实验操作大鼠戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔注射麻醉，正中切口入腹，直接穿刺测自由门脉压力(free portal presse, FPP)换算成kPa单位记录。压迫止血后靠近肝门结扎门静脉、结扎肾动脉水平上方主动脉，从胸主动脉、门静脉分别插管，动静脉注入蓝色、静脉端注入红色明胶溶液11.5ml。操作要点是动静脉两端接微量注射器，等速缓慢推注，3ml/分钟，明胶均匀进入组织。游离食管下端、十二脂肠、大小网膜及全胃，将其取出，胃腔内用10%福尔马林充盈固定24时，按文献1方法制作透明标本。取胃体、窦部胃壁各10mm2一块展开，解剖镜附装测微器观

8、察A-V shunt并计数。肝脏送常规病检。附表胃壁A-V shunt(个/cm2)项目0周8周(肝硬变)10周12周14周16周18周胃底10.122.1411.442.3212.952.91*25.163.41*35.265.13*42.155.14*42.014.09胃窦8.312.918.762.949.012.969.103.019.153.119.153.169.143.01 注：*与正常组比较P0.01，每组均为8例。 3. 统计学方法t检验及相关回归分析。结果1. 肝病理及FPP肝组织第8周大量纤维增生，假小叶形成。符合肝硬变病理特征。第16、18周肝纤维化更趋成熟，假小叶更完

9、整。FPP正常组0.90.13kPa，第8周升高至1.600.30kPa(P0.01)，随用药时间延长FPP进一步升高，16周达2.410.22kPa，是正常的2.5倍。第18周与16周比较略低，为2.400.31kPa。2. A-V shunt计数红、蓝两种颜色的明胶溶液注入胃壁血管制作的透明标本在放大10倍解剖镜下观察，蓝色细动脉与棕红色细静脉都呈广泛树枝状分布，可以看到末梢直径为57m的毛细血管像，并发现有的血管为1015m，管内红蓝交汇向两侧追踪一侧为细动脉，另一侧为细静脉，即判定A-V shunt。通过测微器行A-V shunt计数，观察倍数经换算得出结果。胃窦部各组呈轻度增加趋势，

10、但无统计意义。胃体部各组随病程渐进性增加，到第12周有显著性意义(P0.01)，第16周最高42.155.14个/cm2，为正常4.2倍。第18周略下降(见表)。FPP与A-V shunt计数相关性分析y=1.684+0.510x,r=0.91(P0.01)。讨论1. PHG机理正常时，支配胃的动脉穿过浆膜层、肌层，在粘膜下层形成丰富纵状结构，再分出许多细动脉穿越粘膜肌层达粘膜表面形成毛细血管网。毛细血管再汇成小静脉下降至粘膜肌层后集成较大静脉，穿过粘膜下层最终达到胃壁外静脉回流至门静脉。胃壁在粘膜下层存在大量性动静脉短路即A-V shunt。在胃功能期呈闭锁状，以供粘膜足够血流；当处于间歇期

11、间，A-V shunt适度开放，粘膜血流减少，门脉高压时由于门静脉压力高于胃静脉压力，使胃静脉回流障碍，因而胃微循环发生改变。本实验在国内首次用双色素造影法1直接观察大鼠肝硬变门脉高压病程中胃壁A-V shunt开放情况，结果发现随肝硬变加重，FPP升高，胃壁单位面积内A-V shunt密度渐进性增加，并与FPP上升呈正相关(r=0.910,P0.01)。机制是FPP上升，毛细血管静脉压增加，处于锁闭状态的A-V shunt被动开放。另外，“液递物质(humoral factors)”如胰高血糖素、前列腺环素、一氧化氮等在门脉高压时含量增加使胃小血管扩张亦是可能原因。导致结果是(1) 动脉血直

12、接灌入静脉，经毛细管与组织交换的有效血容量不足，粘膜处于缺氧状态，对损伤易感性增加；(2) 动脉血流入静脉，再加原有回流障碍使胃充血、郁血；(3) 粘膜层及粘膜下层小静脉及毛细血管扩张渗透性增加使粘膜间质水肿。因此，胃壁A-V shunt异常开放是肝硬变门脉高压病程中并发PHG最直接、最基本的原因。2. PHG实验模型对门脉高压症病理生理的认识大多源于动物模型2。目前国内此类的四氯化碳法及TAA法仅仅是肝硬变而已，并不一定合并PHG。本实验TAA用药第8周虽肝硬变形成，但胃A-V shunt并未大量开放(P0.05)即是例证。因A-V shunt异常开放是PHG最根本原因，故在本实验TAA诱发肝硬变门脉高压病程的第16周，A-V shunt达最高峰时，适宜作为PHG实验模型。缺点是时间长，待进一步研究。作者单位： 215006苏州医学院