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文档简介

1、A卷全国卷微生物的试验室培育1.(2012·全国,5)下列关于细菌的叙述,正确的是()A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源B.常用液体培育基分别获得细菌单菌落C.细菌大量培育过程中,芽孢形成于细菌生长的调整期D.培育基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选解析本题考查微生物的养分、生长等相关学问。金黄色葡萄球菌能在含有高浓度NaCl的培育基中正常生长、繁殖,其他微生物则不能,故可用含高浓度NaCl的选择培育基来筛选金黄色葡萄球菌,选项D正确;自养型细菌(如硝化细菌)可直接利用空气中的CO2作碳源,异养型细菌(如大肠杆菌)只能利用培育基中现成的有机碳源(如葡萄糖),选项A错误;

2、常利用固体培育基分别获得细菌单菌落,选项B错误;细菌的生长曲线包括调整期、对数期、稳定期、衰亡期四个阶段,芽孢形成于细菌生长的稳定期,选项C错误。答案D2.(2016·全国课标卷,39)生物选修1:生物技术实践某同学用新颖的泡菜滤液为试验材料分别纯化乳酸菌。分别纯化所用固体培育基中因含有碳酸钙而不透亮,乳酸菌产生的乳酸能溶解培育基中的碳酸钙。回答下列问题:(1)分别纯化乳酸菌时,首先需要用_对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是_。(2)推想在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有_和_。分别纯化时应选择出_的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在20长期保存时,菌液中常需要加入肯定

3、量的_(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。解析(1)分别纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释;进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的菌落。(2)在分别纯化所用的培育基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分别;分别纯化时应选择出在平板上有透亮圈的菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在20 长期保存时应使用甘油管藏法,故菌液中常需要加入肯定量的甘油。答案(1)无菌水泡菜滤液中菌的浓度高,直接培育很难分别得到单菌落(2)鉴别乳酸菌中和产生的乳酸(或酸)具有透亮圈(3)甘油3.(201

4、3·课标全国,39)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药试验。试验时,首先要从病人身上猎取少量样本,然后依据肯定的试验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中猎取致病菌单菌落,可用_法或_法将样本接种于固体培育基表面,经过选择培育、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用_法接种于固体培育基表面,在37 培育箱中培育24 h,使其均匀生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培育一段时间后,含A的滤纸片四周消灭透亮圈,说明该致病菌对抗生素A_;含B的滤纸片四

5、周没有消灭透亮圈,说明该致病菌对抗生素B_;含C的滤纸片四周的透亮圈比含A的小,说明_;含D的滤纸片四周的透亮圈也比含A的小,且透亮圈中消灭了一个菌落,在排解杂菌污染的状况下,此菌落很可能是抗生素D的_。(4)依据上述试验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素_。解析微生物纯化的方法主要为平板划线法和稀释涂布平板法。依据微生物的特点对其进行一系列浓度梯度稀释,然后用涂布法接种于固体培育基表面,然后在适宜条件下培育;抗生素是由真菌产生的,可以抑制生长、繁殖或杀死细菌等致病菌的一类物质,含A的滤纸片四周消灭透亮圈,说明有抗生素A的地方该致病菌受到抑制;B的四周没有透亮圈,说明致病菌对抗生素B不敏感

6、,C的透亮圈要比A的透亮圈小,说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱;D消灭了透亮圈,说明该致病菌对D敏感,但是在透亮圈上消灭一个菌落,又排解杂菌污染,推断此菌落的微生物对抗生素D产生了耐药性。依据以上分析,为达到抗菌的目的,最好选择抗生素A。答案(1)划线稀释涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(4)A微生物的分别和计数4.(2016·全国课标卷,39)生物选修1:生物技术实践空气中的微生物在重力等作用下,可以肯定程度地沉降。某争辩小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布状况。试验步骤如下:配置培育基(成分:牛肉

7、膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);制作无菌平板;设置空白对比组和若干试验组,进行相关操作;将各组平板置于37 恒温箱中培育一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题:(1)该培育基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤,该培育基中的成分X通常是_。(2)步骤中,试验组的操作是_。(3)若在某次调查中,某一试验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对比组的一个平板上消灭了6个菌落,这种结果说明在此次调查中消灭了_现象。若将30(即366)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法_(填“正确”或“不正确”)。解析(1)牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白质的水解产物,都可以作为氮源;平板为固体培育基

8、,故需要加入凝固剂琼脂。(2)试验探究的是教室内“不同高度空气”中微生物的分布,其中变量为不同高度,故需在不同高度下放置开盖平板。同时,为了保证单一变量,需要保证开盖放置时间全都。为了保证明验牢靠性,需要设置多个平行组。(3)在完全正确的操作状况下,空白对比组中不应消灭菌落。若消灭菌落,表明操作过程中存在杂菌污染,属于试验失误,全部试验数据均不应接受。答案(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂(2)将各试验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间(3)污染不正确5.(2015·全国卷,39)生物选修1:生物技术实践已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生

9、物柴油的生产。回答有关问题:(1)显微观看时,微生物A菌体中的油脂通常可用_染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用_(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以_为碳源的固体培育基进行培育。(3)若要测定培育液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用_直接计数;若要测定其活菌数量,可选用_法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,_ 条件下该酶活

10、力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕_ 设计后续试验。解析(1)生物组织中的油脂能被苏丹(或苏丹)染成橘黄色(或红色)。(2)为了筛选出能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,我们应选用只能让该菌落生长的选择性培育基,因此培育基中只能选用油脂作为唯一碳源的固体培育基。(3)血细胞计数板可用于直接计数培育液中的菌体数,但是不分死活,因此要计数活菌数量要通过稀释涂布平板法来计数。(4)温度影响酶的活性,在三个温度中,45 需酶量最高,说明酶活性最低;在三个温度试验中40 所需酶量最少,低于35 和45 所用酶量,说明酶的最适温度介于35 和45 之间,因此应围绕40 设计不同温度梯度,进行后续试验

11、。答案(1)苏丹(或苏丹)萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板稀释涂布平板(4)45406.(2014·新课标全国卷)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将_分解成_。(2)在含纤维素的培育基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成_色复合物。用含有CR的该种培育基培育纤维素分解菌时,培育基上会消灭以该菌的菌落为中心的_。(3)为从富含纤维素的土壤中分别获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培育基(成分见下表):酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培育基甲培育基乙

12、注:“”表示有,“”表示无。据表推断,培育基甲_(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是_;培育基乙_(填“能”或“不能”)用于分别和鉴别纤维素分解菌,缘由是_。解析(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,如下图:(2)刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,消灭以纤维素分解菌为中心的透亮圈,我们可以通过是否产生透亮圈来筛选纤维素分解菌。(3)分别和鉴别纤维素分解菌的培育基为固体培育基,且需以纤维素为唯一碳源。答案(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透亮圈(3)不能液体培育基

13、不能用于分别单菌落不能培育基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,即使消灭单菌落也不能确定其为纤维素分解菌7.(2014·课标,39)为了调查某河流的水质状况,某争辩小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分别等工作。回答下列问题:(1)该小组接受稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培育了一段时间,这样做的目的是_;然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培育后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组接受平板划线法分别水样中的细菌,操

14、作时,接种环通过_灭菌。在其次次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开头划线。这样做的目的是_。(3)示意图A和B中,_表示的是用稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培育基中并混匀,一部分进行静置培育,另一部分进行振荡培育。结果发觉:振荡培育的细菌比静置培育的细菌生长速度快。分析其缘由是:振荡培育能提高培育液中_的含量,同时可使菌体与培育液充分接触,提高_的利用率。解析本题通过微生物培育考查灭菌的方法、微生物数量计算和培育条件。(1)为了确定培育基的灭菌是否合格,通过随机取若干灭菌后的空平板培育一段时间,观看培育基上是否有菌落生长,用来进行对比。三个培育基上

15、平均菌落数为38,所以每升水样中活菌数为38×10×100×10003.8×107。(2)接种环用灼烧法进行灭菌。在其次次及以后划线时,总是从上一次的末端开头划线,这样做的目的是:通过划线次数的增加,使每次划线时菌体的数目渐渐削减,以便得到单个菌落。(3)A表示平板划线法接种培育后得到的结果,B表示稀释涂布平板法接种培育后得到的结果。(4)振荡培育可以增加液体培育基的氧气含量,促进好氧型微生物的生长;同时还能使菌体与培育液充分接触,提高养分物质的利用率。答案(1)检测培育基平板灭菌是否合格3.8×107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个

16、菌落(3)B(4)溶解氧养分物质B卷地方卷微生物的试验室培育1.(2013·四川理综,10)一般酵母菌直接利用淀粉的力量很弱,有人将地衣芽孢杆菌的一淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。(1)图甲中,过程需要的酶有_。为达到筛选目的,平板内的固体培育基应以_作为唯一碳源。过程需重复几次,目的是_。(2)某同学尝试过程的操作,其中一个平板经培育后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_;推想该同学接种时可能的操作失误是_。(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和一般酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种_菌的发酵罐需要先排气,其缘由是_。(4

17、)用凝胶色谱法分别一淀粉酶时,在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质,相对分子质量较_。解析本题综合考查基因工程、微生物的培育、蛋白质的分别等相关学问,意在考查考生的理解力量和综合运用力量。(1)由题目所给信息可以直接看出,工程酵母菌比一般酵母菌利用淀粉的力量强。在以淀粉为唯一碳源的培育基上,工程酵母菌可以正常增殖,而一般酵母菌不能正常增殖。(2)微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,依据图乙菌落分布状况可确定该同学所接受的接种方法是后者;由图乙中菌落分布不均匀可推想该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀。(3)在以淀粉为原料的培育液中,一般酵母菌繁殖慢,发酵产生气体少;工程酵母菌繁殖快

18、、发酵产生气体多。(4)当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的蛋白质不易进入凝胶内部的通道、只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小的蛋白质简洁进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢。答案(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶淀粉进一步筛选纯化获得分解淀粉力量强的酵母菌(2)稀释涂布平板法涂布不均匀(3)工程酵母工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的力量强,导致酒精发酵产生CO2的速率更快(4)小微生物的分别和计数2.(2016·江苏卷,25)漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分别、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正

19、确的是(多选)()A.生活污水中含有大量微生物,是分别产漆酶菌株的首选样品B.筛选培育基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,在通过划线进一步纯化D.斜面培育基中含有大量养分物,可在常温下长期保存菌株解析漆酶降解“木质”,则漆酶菌株多存在于“木质”丰富的场所,故生活污水中含有大量微生物,但不肯定含有产漆酶的菌株,A错误;筛选生活污水中含有大量微生物,B正确;在涂布平板上长出的菌落,再通过划线进一步纯化,C正确;斜面培育基中含有大量养分物,可在低温下长期保存菌株,D错误。答案BC3.(2016·四川卷,10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程,图

20、乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。(1)图中选择培育基应以_为唯一氮源;鉴别培育基还需添加_作指示剂,产脲酶细菌在该培育基上生长一段时间后,其菌落四周的指示剂将变成_色。(2)在5个细菌培育基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品液0.1 mL,培育一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程实行的接种方法是_,每克土壤样品中的细菌数量为_×108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的细菌数较_。(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活,突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸,使图乙序列中消灭终止密码(终止密码

21、有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中,终止密码为_,突变基因表达的蛋白质含_个氨基酸。解析(1)脲酶能够催化尿素分解为氨,故图中选择培育基应以尿素作为唯一氮源。由于尿素被分解成了氨,氨会使培育基的碱性增加,pH上升,使酚红指示剂变红色。(2)用于计数细菌菌落数的接种方法是稀释涂布平板法,统计的菌落数应介于30300之间,故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数,每克土壤样品中的细菌数量为(156178191)/3÷0.1×1051.75×108。由于两个或多个细菌连接在一起时,往往统计的是一个菌落,故用此方法测得的细菌数偏少。(3)密码子

22、由三个相邻的碱基组成,271个碱基和后面2个碱基一起共构成91个密码子,插入的70个核苷酸和后面2个碱基一起共构成24个密码子,紧随其后是UGA,应为终止密码,翻译结束,因此表达的蛋白质含115个氨基酸。答案(1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75少(3)UGA1154.(2014·四川卷,10)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。争辩发觉,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分别降解苯磺隆的菌株和探究其降解机制的试验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要养分物质有碳源、水、_四类,该试验所用的选择培育基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其缘由是_。(2)与微生物培育基相比,植物组织培育的培育基常需添加生长素和

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