检测原理本试剂盒的原理为竞争elisa试剂盒利用萃取液通过均质及振荡

1、人脂联素定量ELISA试剂盒说明书脂联素在肥胖症患者和II型糖尿病患者血清中的浓度明显低于非肥胖者，其浓度的降低导致了胰岛素抵抗和高胰岛素血症，而脂联素有防止动脉粥样硬化斑块形成的作用，因此脂联素与肥胖症患者II型糖尿病及冠心病的发生发展密切相关，即脂联素的明显降低预示着II型糖尿病及冠心病的发生明显增加。本试剂盒采用双抗夹心法测定人血浆或血清中的脂联素，包被抗体及酶标记抗体采用鼠抗人脂联素单克隆抗体，测定人血清或血浆中的脂联素。试剂组成1 预包被板 12x8孔 2 样品液 35mlx23 标准品A 30ng4 10x清洗液 50ml (用前加蒸 馏水450ml)5 酶结合物 6 mlx16

2、显色液A 6 mlx17 显色液B 6 mlx18 终止液 12mlx19说明书 1份样品准备血清标本：用血清分离管收集血标本，凝结30分钟后立即离心，1000xg离心15分钟分离出血清。血浆标本：收集肝素或EDTA抗凝血（不得用枸橼酸抗凝血），30分钟内离心，1000Xg离心15分钟分离出血浆。上述标本如不立即检测，可置低于-20环境下冻存。长期冻存可置于-80。避免反复冻融。操作程序(恒温箱温育，微孔板直接放入箱内；水浴锅温育，微孔板放入温育盒内，盒内温度应达37)1 标本稀释：标本用样品液1:500稀释。举例：取待测标本10ul+样品液90ul混匀（样品I），取样品I 10ul+样品液4

3、90ul混匀（样品II）。2 标准品配制：取标准品1支加入500ul样品液，混匀（A：60ng/ml），取1ml小离心管7支（B、C、D、E、F、G、H），分别加入250ul样品液，H管为零对照管，从A管吸取250ul加入B管，混匀（B：30ng/ml）依次倍比稀释至G管（C：15ng/ml,D：7.5ng/ml，E：3.8ng/ml，F：1.9ng/ml,G：1.0 ng/ml）。3 取出与待测定样品相应量的板孔标记。其余板放回装有干燥剂的原包装袋里4 加样及酶结合物： 1:500稀释的标本每孔加50ul，各标准品每孔加50ul（做复孔）；上述孔加酶结合物每孔50ul；混匀，371小时。5

4、洗板：甩去样品。300ul/孔1x清洗液,甩去,在干净的吸水纸上拍干。如此洗五遍。6 显色：显色液A 50ul/孔，显色液B 50ul/孔（先加A液再加B液，不得先加B液，也可等量的A液与B液混合，100ul/孔），37 20分钟（从加B液算时间）。7终止：终止液100ul/孔，按显色液加样顺序加样。8测定450nm 的OD 值。用 OD值对已知浓度的标准品作图，测定样品浓度。样品脂联素的浓度应乘上样品的稀释倍数500。样品若不在线性范围，可对稀释度进行调整。技术指标1. 灵敏度，0.5ng/ml；2. 特异性，不与小鼠及其它动 物源脂联素交叉；3. 线性范围：1ng/ml 60ng/ml，结果重复可靠；4. 精密性：批内CV值8%，批间CV值12% 。注意事项1. 温育时勿需封膜或加盖板盖。2. 样品及标准品稀释应准确。血样品应按传染性材料处理。3. 稀释后的标准品若不能立即使用，应尽快放置在4。稀释后的标准品仅供当天使用。4. 洗板后应注意拍干，并应注意尽快 加下一步的反应液。5.