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文档简介
1、消化管平滑肌的生理特性【实验目的】1. 学习哺乳动物离体器官实验的一般方法;2. 记录离体小肠在模拟体内环境中的活动;3. 研究不同药物对消化道平滑肌收缩的影响,了解平滑肌的生理特性。 【实验原理】哺乳动物消化管平滑肌具有肌组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。但是消化道平滑肌有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。 将离体组织器官至于模拟体内环境的溶液中,可以在一定时间内保持其功能。本实验以台氏液作灌流液,在体外观察及记录家兔离体肠段的一般生理特性。【实验动物与器材】实验动物:家兔实验器材:恒
2、温平滑肌浴管、生理信号采集处理系统、肌张力传感器、万能支架、大铁夹、螺旋夹、双凹夹2个、温度计、烧杯、台氏液、无钙台氏液、1:50000肾上腺素、1:1000000乙酰胆碱、1:50000阿托品【实验方法与步骤 】一、实验准备(一) 启动平滑肌浴管恒温系统 恒温平滑肌浴管是自供液式,中心管为平滑肌浴管。外部容器为恒温浴锅,加蒸馏水或自来水。使用前将浴管刷洗干净,加入台氏液至浴管高度的2/3处,约50ml。开启电源加热,恒温工作点定在38,浴管温度将自动稳定在38左右。(二) 标本制备 用槌猛击兔的头枕部使其昏迷,剖开腹部,找出胃与十二指肠交界处,用线结扎,在结扎
3、线近胃侧剪断小肠,将肠管的肠系膜沿肠缘剪开,分离出长约2030cm的肠管。把离体的肠管置于4左右的台氏液中,剪成数段,每段长23cm,然后用注射器向肠腔内注入台氏液,冲洗肠腔,待肠腔内容物基本洗净后,放入4台氏液中备用。 (三) 建立实验系统1.标本与张力传感器连接:取一段长23cm的肠段,一端固定于浴管底部的小钩上,另一端用手术线连接固定于肌张力传感器的应变簧片上。将标本浸置于含15台氏液的浴管中,取37的台氏液浸泡。2.通过调整使肠管及其连线有一定的紧张度,但要适度,勿牵拉过紧或过松。肠段勿与周围管壁接触,以免磨擦而影响实验记录。3. 连接仪器,打开实验软件选择消化
4、道平滑肌生理特性实验项目,记录家兔离体肠段正常的收缩曲线。 二、实验观察内容(一)启动恒温加热系统,使浴管内台氏液温度升至37,观察收缩曲线改变,然后温度恒定在38,再观察以下实验项目。(二) 将浴管内37台氏液放掉,向浴管内加入低温台氏液,观察在低温台氏液中的肠段平滑肌收缩情况,描记收缩曲线。 (三) 向浴管内台氏液中加入1:50000的肾上腺素0.2ml,描记观察肠段活动有何变化。待作用效果明显后,冲洗肠段,即放掉浴管中的台氏液,加入预先准备好的38新鲜台氏液,重复更换23次台氏液,使肠段活动恢复正常,再进行下一个实验。(四) 向浴管内台氏液中加
5、入1:1000000乙酰胆碱0.2ml,描记观察肠段运动,待作用出现后,同上法冲洗肠段。(五) 向浴管内台氏液中加入1:50000阿托品0.2ml,2分钟后,再加入1:50000的乙酰胆碱0.2ml,观察肠段活动变化,并与上一项结果比较。冲洗肠段,使肠段活动恢复正常。(六) 用37无Ca2+台氏液冲洗肠段至少3次,换上新鲜37的无Ca2+台氏液,观察小肠收缩曲线有何变化。(七) 向无Ca2+台氏液浴管内加入1:50000的乙酰胆碱0.2ml,观察肠段活动变化。如无反应,一分钟后用正常含Ca2+台氏液冲洗3次,观察有何现象发生。【实验分析与讨论】实验项目一:图一 平
6、滑肌肠段在正常情况下记录的收缩曲线图此图曲线为平滑肌肠段处于维持在38恒温台氏液内的收缩曲线,即模拟消化管平滑肌处于兔子体内生理环境的收缩情况。实验项目二:图二 平滑肌肠段记录对照运动曲线后在低温下的收缩曲线图此图中,曲线收缩幅度较大的前半段为平滑肌肠段处于正常情况下所记录的运动收缩曲线,打有“低温”标记处实验项目三:图三 平滑肌肠段记录对照运动曲线后滴加肾上腺素的收缩曲线此图中,曲线收缩幅度较大的前半段为平滑肌肠段处于正常情况下所记录的运动收缩曲线,打有“肾上腺素”标记附近肠段收缩强度下降,明显弱于前面的对照收缩曲线。实验项目四:图四 平滑肌肠段记录对照运动曲线后滴加乙酰胆碱的收缩曲线此图中,曲线
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