丹酚酸提取工艺研究

1、丹酚酸提取工艺研究 【摘要】 目的 优化丹酚酸的提取工艺，提高丹酚酸B的提取率。方法 以喷雾干燥法获得的丹酚酸固体粉末的收率和丹酚酸B含量为指标，采用均匀设计法优化丹酚酸的乙醇浸提工艺，考察乙醇浓度、提取时间和提取温度对丹酚酸B提取率的影响。结果 最佳提取工艺为：45(体积分数)乙醇，提取时间为1 h，提取次数为2次，提取温度为70 。结论 提取物中丹酚酸B纯度达到70%以上，优化工艺合理、可行。 【关键词】 丹酚酸B;提取工艺;均匀设计;大孔吸附树脂Abstract:Objective To Optimize the extraction process of Salvia acid fro

2、m Salvia miltiorrhiza. Methods Salvia acid of the spray drying powder and salvia acid B were used as use the standard. Uniform design was used to optimize the extraction procedure. The effect of ethanol concentration, extraction time and temperature on the extraction efficiency of salvia acid B were

3、 optimized. Results The optimal conditions were as followings: 45% of ethanol, 1 h of extraction time and 2 cycles of extraction at 70 . Conclusion The extraction yield could reach 70% under the optimal extraction procedure. Key words:salvia acid B; extraction process; uniform design; macroporous re

4、sin 丹参水溶性有效成分多具有酚酸性结构,丹参素（化学名为3,4二羟苯乳酸，3,4dihydroxybenyl lacticacid)是各种丹酚酸的基本化学结构：丹酚酸A是一分子丹参素与两分子咖啡酸缩合而成；丹酚酸B为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成；丹酚酸C 则为二分子丹参素缩合而成；其他丹酚酸亦有类似结构。丹参水溶性成分中的迷迭香酸(rosmarinic acid A,Ros)也是由一分子丹参素和一分子咖啡酸缩合而成。此外,还有四甲基丹酚酸(tetramethyl salvianolic acid A,Sal M)等等1。 目前,工业上提取丹参有效成分主要以热回流法为主,而酚酸类性质不

5、稳定、易氧化水解,因而提取工艺的研究应多指标综合考虑。选择不稳定成分作为提取工艺筛选的指标性成分,有利于筛选出合理的工艺条件,防止成分在提取工艺中损失过大2-3。本研究以提取物得率和丹酚酸B含量为指标,进行丹酚酸提取工艺研究, 以确定最佳的提取工艺，探索适合工业化提取的工艺条件。 1 仪器与试剂 1.1 仪器 FA1004N电子分析天平（上海精密科学仪器有公司），JZ8002天平（上海精密科学仪器有限公司），RE5298A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），LXJII型离心沉淀机(上海医用分析仪器厂)，YL015型实验型喷雾干燥机（上海雅程仪器设备有限公司），QT330型柱温箱（QM,旗美），L

6、C10ATVP型泵（日本岛津），SPD10AVP型紫外检测器（日本岛津），高效液相色谱柱（Diamonsil 钻石），电子天平（SHIMADZU AY120），KQ100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），pHS25型pH计（上海智光仪器仪表有限公司）。 1.2 试药与试剂 丹参药材系唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根茎（购自广州市天河宝润堂中药饮片厂），经广州中医药大学高英主任药师检验，符合中国药典2005版一部丹参项下规定。乙醇（分析纯，天津市富宇精细化工有限公司），甲醇、乙腈（色谱纯,迪马科技有限公司），甲酸（分析纯,广州化学试剂厂），D10

7、1大孔吸附树脂（天津市光复精细化工研究所），盐酸（分析纯，广州市白云区良田光明化工厂）， FeCl3（分析纯，天津市大茂化学试剂厂），丹酚酸B对照品（批号：200504，中国药品生物制品检定所）。 2 方 法 2.1 丹酚酸提取工艺 2.2 大孔吸附树脂分离纯化 2.3 丹酚酸B含量测定 2.4 样品的固形物含量 将洗脱液于60 恒温水浴，挥干乙醇和部分水分成稠膏状，膏状物移至真空干燥箱（60 ，0.09 MPa）减压干燥，置干燥器0.5 h（防回潮），待样品冷却后，精密称量。 3 结 果 丹酚酸提取工艺正交试验结果见表2。将实验数据进行多元回归, 求得回归方程Y=1961+2.0861X1+

8、5.4653X2-0.0356X12-2.055X22+0.0186X1X3,R2=0.954 5,F=6.150 1，方程显著有效，并得到最佳工艺参数为：乙醇浓度为45%，提取2次，每次1 h，温度为70 。对最佳处方进行验证，3批样品丹酚酸B含量分别为：70.23%、69.04%、69.69%。 4 讨 论 41 提取丹参药材中水溶性成分丹酚酸B，大部分文献采用水提醇沉法。本文采用乙醇浸提的方法提取，其目的是为了避免用水提取时提取液中含有糖类等水溶性杂质而使液体黏稠。表2 U9(96)均匀设计表及试验结果 4.2 丹酚酸B对热不稳定，易氧化水解，对受热温度和受热时间敏感，所以丹参提取液不宜

9、长时间高温浓缩。试验结果表明，丹酚酸提取宜采用减压浓缩和喷雾干燥等工艺，降低工艺过程的温度和受热时间，有利于提取物中丹酚酸保存率的提高4。 4.3 将浓缩液pH值调至3，可以使部分杂质析出，且酸性体系有利于丹酚酸B水溶液在受热条件下的稳定；同时调节溶液的pH可以改变丹酚酸在溶液中的游离状态，酸性条件下丹参酚酸的极性下降，有利于大孔吸附树脂对丹酚酸的吸附。 4.4 以体积分数为95%的乙醇湿法装柱，清洗，然后用水冲洗，冲洗速度宜慢，使大孔树脂堆实以利于吸附药液；药液通过D 101大孔树脂，流速控制为树脂体积2.03.0 BV/h,这样可以使药液与树脂充分接触,静置一段时间再用水进行冲洗,洗脱糖等水溶性杂质,而丹酚酸B类成分未被洗脱。用体积分数为30%的乙醇洗脱，丹酚酸B具有良好的解吸附性。参考文献】 1 周长新,罗厚蔚,丹羽正武.丹参水溶性化学成分的研究J.中国药科大学学报，1999，30 (6) : 411-416.2 孙金兰，韩伟. 丹参中丹酚酸B的提取分离及分析方法