一种取代抗生素的安全、高效、广谱的新型添加剂——溶菌酶的介绍

1、一种取代抗生素的安全、高效、广谱的新型添加剂溶菌酶的介绍    文章来源：杭州康源饲料科技有限公司前 言近年来,随着畜牧产业的高度集约化生产,畜禽疾病的发生也日趋上升,由于疾病造成的死淘率逐年增加,给畜牧业造成重大的经济损失。目前，国内外在对畜禽的防治型添加剂仍以抗生素为主，抗生素添加剂虽有疗效，但抗生素诸多副作用却不容忽视，由于大剂量的长期使用，不仅效果下降，同时存在多种不利因素。其中尤以肉品中的抗生素残留问题更为社会所关注。含有抗生素的肉，对人体健康能产生严重的危害，世界卫生组织专家已经认定牲畜携带的各种抗药性病菌可以通过食品传给人，产生难以治愈的疾

2、病。因此，养殖单位和消费市场都迫切需要高效、广谱、无毒、无残留的新型防治畜禽疾病的抗菌药，溶菌酶就是理想的候选添加剂。 溶菌酶是一种生物酶,它是由水解酶辅以保护剂而成，它能通过裂解细胞壁，进而溶解及杀灭各种致病菌，达到防治疾病的目的。通过已开展的临床试验证明，它具有以下几个方面的特点：1)防治效果好,确切；2)抗菌谱广,对革兰氏阳性、阴性菌有效,特别是对耐药菌株效果尤佳；3)不会造成药害残留和蓄积,安全可靠；4)没有任何副作用及不良影响；5)能提高机体的免疫能力,加快机体损伤组织的修复. 我们研制的治疗家禽家畜多种炎症的溶菌酶糸列添加剂产品，是在研究溶菌酶的药理作用特性中，增强了其杀菌谱范围，

3、同时利用溶菌酶广泛分布于生物体内，具有生物相容性好，对组织无刺激、无毒性等优点，结合家禽家畜的发病机理和特点，研制开发出了具有高效、广谱、无毒、无药害残留的新型产品，并针对家禽家畜的疾病防治开展了临床应用性研究，能完全替代抗生素,取得了令人满意的效果。 溶菌酶的药理作用1、抗菌消炎。溶菌酶是一种水解粘多糖的碱性水解酶，此类粘多糖为细菌细胞壁的主要成分之一。该酶能催化水解细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性多糖分解成可溶性糖肽，细菌内容物逸出而使细菌溶解。达到消炎、修复组织的目的。2、抗病毒。溶菌酶内服，可以阻止流感和腺病毒繁殖,同带负电荷的病毒蛋白直接

4、作用，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。3、增强免疫力。溶菌酶作为机体非特异性免疫因子之一，参与机体多种免疫反应，在机体正常防御功能和非特异免疫中，具有保持机体生理平衡的重要作用。溶菌酶本身具有T细胞表位，能诱导2型(Th2) T辅助细胞反应；口服溶菌酶能诱导小鼠产生全身性的Th1 和Th2免疫反应，增强免疫功能，因此口服溶菌酶具有控制上呼吸道感染的功能并能治疗痢疾。 此外，溶菌酶还具有激活血小板的功能,可以改善组织局部血液循环障碍,分解脓液,增强局部防卫功能,从而体现其止血、消肿、加快机体损伤组织的修复作用。它还可以作为一种宿主抵抗因子,对组织局部起保护作用。即用本产品治疗过

5、的仔猪治愈后在整个生长期内,复发率为2.5%。而用抗生素治疗治愈后复发率为18.5%。 4、兽用溶菌酶制剂抑菌效果对兽医临床常见且危害较大的金黄色葡萄球菌等17种致病菌的抑菌效果，见下表： (单位cm、ug/ml)对兽医临床常见3种有益菌（乳酸杆菌、双枝杆菌、腊孢杆菌）48ug/ml浓度抑菌，无效果。 5、毒理学检验结论：（1）、急性经口毒性试验：小鼠LD505.0g/kg，属实际无毒级。 （2）、皮肤刺激试验：属无刺激性。 （3）、眼刺激试验：属无刺激性。（4）、阴道粘膜刺激试验：属无刺激性。 （5）、蓄积毒性试验：即蓄积系数K>5，属弱蓄积毒性。 （6）、微核试验：无致微核作用 6、

6、溶菌酶的稳定性从加速试验结果看，三批溶菌酶样品经过6个月的加速试验，样品的外观性状没有变化，而含量下降第1个月较快；但加速试验1个月后，含量下降变化不大。 从光加速试验结果看，三批溶菌酶样品经过6个月的加速试验，样品的外观性状、含量等均基本不变。 长期试验结果看，12个月中含量下降平均在3-4%。经有效期的统计分析估算，标示量不小于85%时的有效期平均为28.13个月。（回归直线：Y = -0.542x + 100.79 ，r=0.9578）而从结果可以看出，溶菌酶样品稳定性在长期高温高湿的情况下，对样品的含量影响较大，因此样品应密闭保存在25左右的干燥处。 实验结果一、溶菌酶粉剂预防仔猪腹泻

7、病的应用观察： （一）材料与方法试验材料：供试药物：10%溶菌酶粉剂，500单位/毫克。对照药物：强力霉素预混剂（上海五洲药厂生产，批号：010212）；土霉素预混剂（南京药械厂生产，批号：010620）。 试验方法：试验时间：2001年9月10日至12月10日。试验地点：宝山区罗店种畜场。试验设计： 设计一：仔猪日粮中添加溶菌酶粉剂：选用25窝7日令仔猪，随机分成5组，每组5窝，设计三种处理，第一处理为试验组，分高、中、低三个剂量组，第二处理为常规药物对照组，第三处理为空白对照组。试验组在仔猪诱食补料、开食料中添加溶菌酶粉剂，每100千克饲料中添加40.0、20.0、10.0克；常规药物对照

8、组每100千克饲料中添加强力霉素预混剂200克和500克土霉素预混剂；空白对照组不添加任何药物；观察试验至仔猪60日令时结束。 设计二：临产母猪日粮中添加溶菌酶粉剂：选用200头临产母猪，随机分成4组，每组50头，设计二种处理，第一处理为试验组，分高、中、低三个剂量组，第二处理为空白对照组。试验组在临产母猪日粮中每100千克添加20.0、10.0、5.0克溶菌酶；空白对照组不添加任何药物；试验连续9天。 观察记录：对不同试验阶段的仔猪称重，记录腹泻头数、治愈头数、死亡头数、饲料消耗数。 （二）观察结果：仔猪日粮中添加溶菌酶粉剂观察结果：表一：仔猪日粮中添加溶菌酶粉剂综合生产性能表： 表一显示：

9、试验组、药物对照组综合生产性能明显优于空白对照组；试验组中、高剂量组综合生产性能明显优于低剂量组（利润除外）；试验中剂量组、高剂量组平均日增重比药物对照组分别提高5.41%、5.65%，差异显著（P<0.05），仔猪腹泻率分别下降86.37%、93.06%，差异极显著（P<0.01），饲料报酬分别提高7.56%、6.40%，差异显著（P<0.05）；试验中、高、低剂量组每只出售仔猪毛利分别比药物对照组提高27.13%、21.71%、15.76%，比空白对照组提高278.8%、262.6%、244.9%。 临产母猪日粮中添加溶菌酶粉剂观察结果：表二：临产母猪日粮中添加溶菌酶粉剂

10、综合生产性能表 表二显示：试验组的综合生产性能明显优于空白对照组；试验中、高、低剂量组60日令增重比空白对照组分别增加1.45公斤、1.59公斤、1.26公斤，差异显著（P<0.05），腹泻率分别降低94.18%、100%、90.94%，差异极显著（P<0.01），比空白对照组分别增加毛利7.52元、7.16元、6.95元；试验组中、高、低剂量组之间综合生产性能无显著差异，而综合经济效益以中剂量组为最好。二、溶菌酶粉剂治疗仔猪腹泻的应用观察：（一）材料与方法：试验材料：供试药物：溶菌酶粉剂（口服）5000单位/毫克。对照药物：强力霉素（上海五洲药厂生产，批号010212）5mg/K

11、g体重。其他材料：试验用培养基：自制；药敏试纸：由上海伊华医学科技有限公司提供的标准药敏试纸，批号20001。 试验方法：自然发病仔猪治疗观察：选用160头腹泻仔猪，随机分成4组，每组40头，设试验与常规药物对照二种处理，试验处理分高、中、低三个剂量组，分别在500毫升生理盐水中溶入2.0、1.0、0.5克溶菌酶，每头仔猪每日口服2次，每次10毫升。通过二天治疗，观察治愈头数、好转头数、死亡头数。致病菌分离：采集腹泻仔猪的粪便，接种于普通琼脂和血琼脂平板，培养后挑取可疑菌落接种于SS培养基，经初步鉴定后备用，然后进行生化试验。人工感染与治疗：将分离并鉴定的大肠杆菌菌株制成悬液，选取7日令仔猪2

12、4头接种分离菌，每头0.2毫升（约30万活菌），观察致病情况，对20头致病的仔猪用溶菌酶进行治疗，每头每日2次，每次10ml，留出4头病猪作空白对照。药物敏感性试验：用接种环取大肠杆菌纯培养物置于5毫升灭菌生理盐水中，用灭菌L分离棒充分混均；取此液滴于普通琼脂培养基上，用灭菌L棒涂布于培养基表面，置于37培养8-10分钟，使其琼脂表面干燥，然后用灭菌镊子取8种抗菌素纸片（其中两种药液分别为溶菌酶和中华1号自制纸片），分别对称地贴到培养基表面（每个平皿贴4种纸片），置于37培养18-20小时后观察结果，测出抑菌圈直径进行统计分析，并判断其敏感性程度。 （二）观察结果：自然发病仔猪治疗观察结果：表

13、三：溶菌酶粉剂治疗自然发病仔猪情况表 表三显示：2天用药后试验中、高、低剂量组治愈率分别为90%、90%、80%、，死亡率为0；而药物对照组的治愈率为40%，死亡率为10%，差异显著（P<0.05）。 致病菌分离：分离到的细菌在普通琼脂平板上长出中等大小、乳白色、边缘整齐、光滑湿润的菌落，在SS培养基上生长出均匀一致、粉红色、光滑突起、边缘整齐的小菌落。生化试验结果见表四。表四：大肠杆菌分离株生化试验结果 注：+产酸，培养基变黄或阳性反应；产酸产气，培养基变黄，含气泡；-阴性反应。动物致病性试验：24头仔猪接种菌液后表现为精神抑郁、呼吸困难、食欲废绝、喘气、腹泻，随机对20头发病的仔猪用

14、溶菌酶进行口服治疗，每头每日口服2次,每次10ml，经2天服药后，有17头康复，3头好转，4头空白对照仔猪2天后死亡。剖检发现心包积液、肝脏肿大、淤血。取肝脏病料接种SS培养基，生长出粉红色、均匀一致、光滑突起、边缘整齐的小菌落。 药敏试验结果： 注：10以下表示不敏感；11-15表示中度敏感；16及以上表示高度敏感。 （一）试验材料：供试药物：2%溶菌酶粉剂。对照药物：饲用金霉素，由内蒙古金河集团生产，添加浓度为10%。空白对照：不添加任何抑菌、抗菌、杀菌性物质。试验动物：1日令AA商品肉鸡1620羽，由江苏省海门京海肉鸡集团公司提供，未经任何药物性疾病预防。饲料：根据AA商品肉鸡各阶段的营

15、养需要，由申藤畜禽有限公司配制基础日粮，不含任何抗菌性药物。 （二）试验方法：试验时间：2001年8月25日至10月5日，共计六周。试验地点：上海申藤畜禽有限公司棋杆肉鸡场。试验分组：一栋鸡舍分割成十小间，每间面积24M2 ，放置三组供试药物组（高、中、低各一组）、一组对照药物组、一组空白对照组，共计五种处理即五组，各组分别设立一个重复。 四、结论： 溶菌酶粉剂具有预防仔猪腹泻的功效。通过7日令仔猪日粮中添加、临产前2天母猪日粮中添加二种途径证实了这一结论，60日令仔猪腹泻率比传统药物下降86.37%以上，与空白对照组的差异更加明显。 溶菌酶粉剂具有提高日增重与饲料报酬的作用。二种添加途径分别证实，60日令仔猪日增重比传统添加药物提高5.41%以上，饲料报酬提高6.40%以上，与空白对照组之间的差异则更加明显。 溶菌酶粉剂能提高养猪经济效益。以仔猪日粮添加途径中剂量组为例，比添加传统药物提高综合经济效益27.13%，比空白对照提高278.8%。 溶菌酶粉剂中剂量组综合生产性能、经济效益分别优于高、低剂量组。 .溶菌酶粉剂治疗仔猪腹泻效果优于传统用药，治愈率达80%以上，中、高剂量组治愈率达90%。 .药敏试