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1、白羽肉鸭高致病性禽流感疫苗免疫效果研究卫龙兴俞财荣王福泉戴莲群(上海市奉贤区动物疫病预防控制中心,上海201400)摘要对白羽肉鸭高致病性禽流感疫苗免疫效果进行了试验研究,结果表明,白羽肉鸭如能按照免疫程序规范实施免疫操作,能够获得较好的免疫效果,首免剂量以0.50.8mL为宜。关键词白羽肉鸭;高致病性禽流感疫苗;免疫效果中图分类号S834文献标识码A文章编号1007-5739(2009)21-0263-02ImmuneEfftectonWhiteMeat-typeDuckagainstHighlyPathogenicAvianInfluenzaWEILong-xingYUCai-rongWA
2、NGFu-quanDAILian-qun(FengxianDistrictCenterforAnimalDiseasePreventionandControl,Shanghai201400)AbstractInordercostudytheimmuneefiectonwhitemeat-typeduckagainstHighlyPathogenicAvianInfluenza,experimentswerecarriedout.TheresultsshowsthatifimmunizationwasoperatedfollowtheimmunecriterionofHPAIvaccine,th
3、ewhitemeat-typeduckwasabletobebetterimmunized.Thebestfirstimmunizationdosewas0.5S.8niL.Keywordswhitemeat-typeduck;HighlyPathogenicAvianInfluenza(HPAI);immuneeffect禽流感是由禽流感病毒引起的一种急性和高度接触性传染病,几乎所有的野生和家养禽类都能感染该病。自2004年亚洲高致病性禽流感暴发以来,该病已蔓延到世界上的许多国家和地区,给养禽业造成了毁灭性的打击,并已致数百人感染死亡。我国目前防控高致病性禽流感的主要措施仍依赖对该病的免疫预
4、防,并已在禽类上取得了确实的免疫效果,同时我国已将高致病性禽流感列为强制免疫的动物疫病名录,为禽流感的防控提供了保障。奉贤区是上海地区水禽饲养量较大的一个区,特别是在奉贤区的东部地区,白羽肉鸭的饲养量更是非常可观。但实际生产中经常会出现白羽肉鸭首免高致病性禽流感疫苗后免疫效果较差、免疫抗体水平较低的现象,这给高致病性禽流感的综合防控带来了隐患,也给基层兽医站对高致病性禽流感免疫工作的宣传和推动带来了负面影响。为弄清目前白羽肉鸭免疫高致病性禽流感疫苗后低免疫反应的症结所在,笔者在相关部门的大力协助下,组织实施了白羽肉鸭高致病性禽流感免疫效果的试验。1材料与方法1.1试验材料在上海市奉贤区四团镇随
5、机选择一专业养殖户的一栋棚舍作为试验的基地。该专业养殖户已有多年养殖白羽肉鸭的经验,工作责任心强,试验过程中的日常管理工作由该养殖户负责。由上海市云福种鸭场提供白羽肉鸭苗鸭,2007年6月25日出雏。该批苗鸭的种鸭已经过了3次禽流感H5N1疫苗的免疫,免疫抗体日常检测结果合格。试验用疫苗为重组H5N1禽流感灭活疫苗,来源于哈尔滨兽医研究所,批号2006348o试验用检测试剂为H5N1禽流感血凝抑制试验诊断试剂,来源于哈尔滨兽医研究所,批号为2007050704o1.2试验方法1.2.1分组。参与试验的白羽肉鸭分别在1日龄和6日龄作者简介卫龙兴(1965-),男,上海人,芮级兽医师,主要从事奶牛
6、结核、宠物诊疗及动物衣大疫病防控工作。收稿日期2009-09-23时采集20份血样检测母源抗体,并于6日龄采样后,将所有试验鸭随机分成A、B、C、D、E等5组,每组40羽。1.2.2免疫。试验鸭于11日龄时,每组分别采取20份血样后,按照A组每羽0.5mL、B组每羽0.5mL、C组每羽0.8mL、I)组每羽l.OmL的剂量,按规范的操作方法分别对4个试验组颈部皮下注射试验用疫苗;E组作为对照组,不免疫。B组试验鸭于41日龄时,按每羽l.OmL剂量以胸部肌肉注射途径强化免疫1次,其他3组不做加强免疫。1.2.3采样。所有参与试裁的5个组分别在11日龄、16日龄、21日龄、26日龄、31日龄、36
7、日龄、41日龄、46日龄时,每组分别采取20份血样,分离血清后冷冻保存。46日酸采血后,A、C、D等3组试验结束。B组和E组分别在51日龄、56日龄、61日龄、66日龄、71日龄时,每组继续分别采取血样20份,分离血清后冷冻保存。71日龄采血后,B组和E组的试验也同时结束。1.2.4检测。该次试验的所有血清样品,由上海市动物疫病预防控制中心兽医诊断中心采用血凝抑制试验(HI)进行检测。个体血凝抑制效价达到log25的判定为高致病性禽流感免疫抗体阳性。群体免疫抗体阳性率达到70%的判定为群体合格。2结果与分析2.1各组禽流感一免后抗体阳性数和平均效价该次试验1日龄和6日龄的各20份血样检测结果无
8、阳性样品,血凝抑制平均效价分别为0.07和0.05,母源抗体较差。各组禽流感一免后免疫抗体(至46日龄)的阳性数见表1和图1。各组禽流感一免后免疫抗体平均效价见表2和图2。由表1、表2和图1、图2可知,B组和C组的免疫效果表1各组试验鸭一免后抗体阳性数组别-抗体阳性数份lid16d21d26d31d36d41d46dA034612141612B04679101217C0031113171718D0013111397E00000000组别NBCDElid16<121d26d31d36d41d46d0.701.401.802.204.004.655.854.700.501.202.452.9
9、03.253.653.706.15000.904.204.205.205.806.55000.901.303.154.003.102.200.060.050.080.050000抗体平均效价组组组组组ABcDE最佳,一免后的抗体阳性数和平均效价稳定上升,至46日龄时,2个组的阳性数指标和平均效价指标均达到了合格要求;A组和D组的表现则相对较差,2项指标均未能达到合格要求,且至41日龄时,这2个组的各项指标均呈现下降趋势。表2各组禽流感一免抗体平均效价表2各组禽流感一免抗体平均效价冬W布丈£姓孵2/1-n_|*-,it_III_k»1116212631364146日龄d图2各
10、组禽流感一免免疫抗体平均效价曲线2.2各组禽流感二免抗体检测结果禽流感二免的抗体检测结果见表3。由表3可知,B组在进行加强免疫后,抗体水平又有了明显提高,至二免后10d,20份样品的免疫抗体全部达到阳性标准,平均效价也(上接第262页)大型鱼类体内浓缩,最终富集于人体,严重威胁人类的健康生存,所以应该引起人们足够的重视。应采取以下几点控制措施:一是建立健全法律法规,加强化学物质的管理,禁止使用含有或诱发环境激素的化学农药、渔药和各类洗涤剂、消毒剂等,实现无公害化养殖生产。二是尽快开展水产品中环境激素的体内、体外检测方法,以便对环境激素活性的相关化合物进行检测。目前重组基因酵母应用较多,而且易操
11、作,成本低。4参考文献11郭艳英,段昌群.环境激素研究进展探讨皿云南环境科学,2004,23达到了8.9的高位,且维持时间也较长,至该次试验结束时,该组的所有样品仍全部达到阳性标准。E组(对照组)的抗体情况未出现较大的波动,说明试验期间该批鸭未受到禽流感野毒干扰。参与该次试验的200羽白羽肉鸭的成活率大于95%。试验期间未发生任何疾病,每组正常死亡数小于2羽。表3禽流感二免后抗体检测结果汇总日龄d阳性数份平均效价B组E蛆B组E组411203.700461706.150512008.900562008.350.03612008.650662008.150712006.8503结论与讨论试验结果表
12、明,白羽肉鸭对禽流感疫苗的免疫比较敏感,通过高致病性禽流感疫苗的二次免疫能得到较高的免疫抗体。由于白羽肉鸭的饲养周期较短,一般50日龄左右已出售,因此很难做到禽流感二免。但在实践操作中,如能规范实施禽流感一免,也能得到较好的免疫抗体。虽然种鸭的高致病性禽流感的免疫抗体水平达到了合格的要求,但试验鸭的母源抗体水平则较低,同时由于白羽肉鸭的生长速度较快,故建议在今后的生产实践中,对白羽肉鸭可适当提早首免日龄。试验中首免0.5mL和0.8mL剂量的2个组,均得到了较好的免疫抗体,说明首免剂量在0.5y).8mL之间是完全合理的。但首免l.OmL剂量的D组的抗体水平反而较差,可能与应激和免疫麻痹等因素
13、有关,确切原因有待进一步研究。4参考文献刘胜安,王勇,何建强,等.不同免疫方式对白鸭禽流感免疫效果的研究养禽与禽病防治,2007(9):2-3.2 金大春,肖剑,王跃川,等.H5亚型禽流感疫苗对蛋鸭免疫效果影响的研究J.中国畜牧兽医,2008,35(4):96-98.3 刘宇卓,李银,张敬峰.H9亚型禽流感病毒NJ01株动物回归试验前后生物学特性比较U.江西农业学报,2008(9):102-104.4 占松鹤,刘华.不同家禽红细胞悬液检测水禽禽流感抗体对比试验U.畜牧与饲料科学,2009(5):11-13.5 兰玲,盛卓君.新丽地区高致病性禽流感的免疫抗体监测中国动物检疫,2007(2):35
14、-36.6 梅伟,周碧君,温贵兰,等.高致病性禽流感抗体水平监测及免疫程序制定J.山地农业生物学报,2007,1(4):22-25.(3) :12-15.2 吴燕燕,李来好,刁石强,等.环境激素对水产品安全性的影响及预防UL海洋科学,2008,32(1):94-96.3 张凤君,郑文彪,方展强,等.PCBs对斑马鱼蜩及肝脏细胞超微结构的影响的初步研究U.华南师范大学学报(自然科学版),2001(4):112-114.4 OLSSONPE,WESTERLUNDL,SWEEJ,etalTheeffectsofmaternalexposuretoestrogenandPCBondifferentlifeStagesofzebrafishQ.Ambio,1999,28(1):100106.5 ISLINGERM,WILLIMSKID,VOLKLA,etal.Eflfec
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