慢性肾小球肾炎与HLA免疫遗传强关联

1、    慢性肾小球肾炎与HLA免疫遗传强关联        摘要目的评估人类组织相容性抗原(HLA)在慢性肾小球肾炎所致肾功能衰竭病人中的免疫遗传学本质。方法用单抗免疫磁珠HLA-类分型和PCR-SSP-HLA-类分型技术，对广东地区219例汉族慢性肾小球肾炎病人和406例健康人进行HLA-、类抗原频率，基因频率，单倍型频率，风险系数等分析。结果疾病组HLA-B13、B35、B55、DR7、DR10、DR12、DQ7基因频率和All-B60、All-DR10、All-DR12

2、、All-DQ7、A24-DR14、DR10-B60、DR10-DQ7、DR12-DQ7单倍型频率显著升高(RR3.84，P均0.05)。结论慢性肾小球肾炎与HLA系统免疫机制有较强关联，HLA-B55、DR10、DQ7可能是广东人群易感慢性肾小球肾炎的风险因子。关键词慢性肾小球肾炎组织相容性抗原Chronic glomerulonephritis and HLAXIAO Lulu?,YU Lixin,CHEN Hongtao,et al.?Guangzhou Tissue Typing Center,Guangzhou 510095AbstractObjectiveTo evaluate t

3、he immune genetic function of HLA in end-stage renal diseases due to chronic glomerulonephritis(CGN).MethodsWith the use of monoclon antibody immunobeads HLA class typing technique and PCR-SSP HLA class typing technique,HLA class and antigen frequence,gene frequence,haplotype frequence and risk inde

4、x were analyzed in chronic glomerulonephritis patients and in normal Guangdong inhabitants of Han nationality as controls.ResultIn the patient group,HLA-B13,B35,B55,DR7,DR10,DR12 and DQ7 gene frequence and All-B60,All-DR12,All-DQ7,A24-DR14,DR10-B60,DR10-DQ7,DR12-DQ7 haplotype frequence were signific

5、antly higher than those of control group (RR3.84,P0.05).ConclusionsCGN is quite strongly related to immune system of HLA.This study is the first to report HLA-B55,DR10 and DQ7 which might be the risk factors of CGN in Guangdong population.Key wordsChronic glomerulonephritisHistocompatibility antigen

6、s近年国内外调查显示，HLA作为免疫遗传基因在不同民族慢性肾小球肾炎(CGN)中其易感基因表达出异质性，但绝大多数研究局限于HLA-类。我们对219例CGN病人和406例健康人HLA-A、B、DR、DQ进行了全分型并加以比较，以分析CGN的发病机理。材料与方法1方法，T淋巴细胞数量为2 000个/l；PCR-SSP-DR、DQ采用文献2方法，序列特异性引物为挪威Dynal公司产品，包含DRB1 24对和DQB1 9对引物，提取基因组DNA平均浓度为199g，DNA纯度平均达A260/280=1.98。四、统计学处理由电子计算机医学统计学软件包录入原始数据求出抗原、基因、单倍型频率及其风险关联系

7、数(RR)、2和P值。结果一、基因频率及比较分析疾病组和健康组各识别HLA-A、B、DR、DQ座位等位基因123个，其中在疾病组中显著升高(P0.05)的特异性为：HLA-B13(0.1087 vs 0.0674,RR=1.3,2=5.55)、B35(0.0516 vs 0.0274,RR=1.95,2=4.01)、B55(0.0349 vs 0.0136,RR=2.613,2=5.15)、DR7(0.0444 vs 0.0223,RR=2.05,2=3.89)、DR10(0.0278 vs 0.0025,RR=9.77,2=14.01)、DR12(0.189 vs 0.118,RR=1.81

8、,2=9.73)、DQ7(0.3109 vs 0.2162,RR=1.68,2=8.91)。三、单倍型频率及比较分析分辨HLA-A-B、A-DR、A-DQ、B-DR、B-DQ、DR-DQ共4 142条单倍型，经计算在疾病组中显著升高(23.84,P0.05)的单倍型有8条：All-B60(0.0965 vs 0.0505)、All-B10(0.0187 vs 0.0025)、All-DR12(0.01239 vs 0.055)、All-DQ7(0.1510 vs 0.0786)、A24-DR14(0.0403 vs 0.0082)、DR10-B60(0.0125 vs-5)、DR10-DQ7(

9、0.0145 vs 0.0009)、DR12-DQ7(0.1446 vs 0.0911)。显著降低的单倍型1条：B46-DR9(0.0053 vs 0.0721)。讨论人类HLA基因位于6号染色体短臂P23区段，类片断长度560bp，类片断长度265bp，具有控制免疫识别和应答反应始动环节等重要的生物学功能。HLA基因的遗传符合孟德尔显性遗传规律，其多态性超过20亿种，比任何已知的人类遗传系统更复杂，因此进行HLA与疾病关联研究难度大，相关文献局限于HLA-类基因。慢性肾小球肾炎病因机制尚未明了，肾小球基底膜免疫复合物形成是否受到HLA基因易感性的作用，90年代以来引起人们的重视。Freedm

10、an等3研究认为美国人原发性肾病与HLA-DR3、DR5关联。Shishkin等4调查82例俄罗斯肾病病人后发现HLA-A10、B13、B35、B41、DR2、DR7具有统计学意义，且高纯合子，RR均2。Vaughan等5检测了52例英国病人和29例希腊病人，发现DQB1 05显著升高；在英国病人中还有DRB1 0301(DR17) 显著升高(80% vs 27%)。Papasteriades等6的研究显示，希腊病人HLA-A26、A11显著升高，DR3显著减少，认为HLA基因产物可以影响肾脏疾病的临床表现和预后。Fisher等7认为，由自身抗体引起的抗肾小球基底膜病与HLA-A2强关联，与DR5关联，与DR3和DR7有潜在关联。国内研究中，周国平等8报道23例上海地区肾病综合征患儿与DR7、DR9关联。李惠刚等910调查30例原发性肾小球肾炎病人，发现与DR2-DQ1单倍型关联，其中与DQ1关联更强(P0.0017)。我们分析了4142条单倍型中呈显著升高者8条，其中A11-B60、A24-DR14在基因频率分析中为无关联抗原；DR10、DR12、DQ7在基因频率和单倍型频率分析中均呈显著升高，说明上述基因不仅具有独立的疾病易感作用而且具有集合的疾病易感作用，表达这些基因可视为预后不良的病人。显著降低的单倍型B46-