重庆大学微生物实验报告

1、开课学院、试验室 城环学院市政与环境工程试验争辩中心 试验时间 ： 年 月 日课程名称 试验项目名 称 试验项目类型验证演示综合设计其他指导老师成 绩 一、试验目的1. 学习使用血球计数板进行微生物计数的方法。2. 生疏活性污泥中常见的微生物，后生动物的形态及菌胶团的外形色泽3. 生疏水中常见藻类。二、试验原理显微镜直接计数法就是利用血球计数板在显微镜下直接计数，其原理是：将经过适当稀释的菌悬液放在血球计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数由于计数室的容积是肯定的 （0.1mm2）， 所以可以依据在显微镜下观看到的微生物数目来换算 成单位体积内的微生物总数目。血球计数板通常是一

2、块特制的载玻片（如图3-1)，其上由四条槽构成三个平台，中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个 方格网 （如图3-2 ），方格网中间是边长为 1皿的计数室，当盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1mm，这样就形成一 图3-1 a. 正面图 b. 侧面图0.1mm3 的计数室个体积为0.1mm3 的计数室。 。 计数室的刻度一般有两种规格：一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成 16个小方格 （如图3-3A），另一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格 又分成25 个小方格（如图3-3B)。但无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数是相同的，

3、即16X25=400小方格。计数时如接受16中方格X25小方格的计数板时，就按对角线方位数取左上、左下、 右上、右下的四个中方格内的菌数。假如是25中方格X16小方格的计数板，除数取上述 四个中方格外，还须数取其中心的一中方格的菌数位于中方格线上的菌体，一般只计此中格的上方及右方格线上的菌体。16 中方格 X25 小方格计数板：菌数 （个毫升） =4 个中方格中总菌数 X16X101OOOX 稀释倍数4 25 中方格x16小方格计数板：菌数 （个毫升） = 5 个中方格内总菌数 X25XlOXlOOOX 稀释倍数5图3-2 图3-3三、使用仪器、材料四、试验步骤（一） 微生物计数1.在加样前，

4、先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗后才能进行计数。2.本试验以酵母菌液为样品。将酵母菌液摇匀，用无菌的细口滴管吸取少许，放一滴在血球计数室上，轻轻盖上盖玻片，不能有气泡，不能让多余的菌液顶起，多余的菌液让其自然溢出。3.将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜观看全貌，找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。假如酵母出芽，芽体太小达到母细胞的一半时，即作两个菌体计数。4.计数时若发觉菌液太浓或太稀 ，需重新调整稀释度后再计数，一般样品释释度要求每个中方格内有 20 个左右菌体为好，登记稀释倍数，以供计算。5.参考前面的计数公式，计数菌数。6.计数完毕，血球计数板要马上清洗洁净

5、，并用吸水纸吸干，最终用擦镜纸擦洁净并放回盒内。（二）活性污泥的观看在生物法处理废水中，对曝气池活性污泥的观看是废水处理过程中最常用的检验手段 之一。通过对活性污泥中微形动物（原生动物、后生动物）及菌胶团的观看，能准时了解处理请况，以利于准时实行补救措施。1. 取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净的载玻片中心。2. 当心地用洁净的盖玻片掩盖，掩盖后片内不能有气泡形成。3. 将制备好的标本片放在载物台上，先用低倍镜观看污泥中菌胶团的外形、色泽等，然后用高倍镜观看污泥中的微形动物，并画出形态草图。（三） 藻类的观看藻类常消灭在废水处理的氧化塘中，在给水水源中也经常大量消灭。1. 用吸管吸少许含有藻类的水样，放一滴在载玻片中心，盖上盖玻片（片内不能有气泡形成） 即成。2. 将制备好的标本片放