无神经系统疾病老年人血清脑自身反应抗体改变对早期脑衰老的诊断价值

1、无神经系统疾病老年人血清脑自身反应抗体改变对早期脑衰老的诊断价值中国临床康复第8卷第7期200403.05出版1284ChineseJournal0,ClinicalRehabilitatton.1farch5200410z8,07?基础研究?无神经系统疾病老年人血清脑自身反应抗体改变对早期脑衰老的诊断价值张京立,尚立新,马向晨,吴青,陶国枢,王忠良,韩志涛,房征宇,王鲁宁张京立,尚立新,马向晨,吴青,陶国枢,王忠良,韩志涛,房征宇,王鲁宁,解放军总医院老年医学研究所,北京市100853张京立,男,1962年生,北京市人,汉族,2001年军医进修学院神经病学医学博士毕业,助理研究员,主要从事老

2、年性痴呆的基础与临床的研究.zilphdhotmail.cam电话:+86.1066939654国家计委攻关项目(85.722.35.02)中圈分类号:R3921文献标识码:A文章编号:16715926(2004)07128,402收稿日期:20031206修回日期:20040203(04/SN)Diagnosisofearlybrainagingvariationofbrain?reacveau-toantibodyin伪口elderswithoutdiseasesofcentralnervoussys.temJing?LiZhang,Li-XinShangXiang?ChenMaOingW

3、u,Ouo?ShuTao.ZhongLiangWang.Zhi-TooHan,Zheng-YuFang,Lu?NingWangJing?LiZhang,U-XinShang,Xiang?ChenMa,OingWu,Ouo?ShuTao,Zhong?LiangWang,Zhi-TaoHan,Zheng?YuFang,Lu?NingWang,InstituteofGeriatricsandGerontology.ChinesePLAGeneralHospita1.Beijing100853,ChinaJing?LiZhang,Male,HanNationality,Bornin1962inBeij

4、ing,China,DoctorofMilitaryMedicalPostgraduateSchoolin2001,Assistantinvestiga-tor.Researchdirection:basicandclinicalstudyonseniledementialphdhotmail.camTelephone:+86?10?66939654Supportedby:thegrantsfromEighthFiveyearPlanofStatePlanCornmission.No.85?722?35?02Received:200312一O6Accepted:2004一O2一O3Abstra

5、ctAIM:Toobservethechangesofserulnbrain.reactiveantibodies(BRA)intheelders.METHoDS:Theslicesoffrozenbrainobtainedfrom3.mOBthWistarratswereusedasantibodyfLxation,Positivebrain.reactiveantibodieswereobservedunderfluorescencemicroscopefollowingFITcconjugatedgoatantihumanpolyvalentimmunoglobulinsbindingh

6、umanserulnantibodies,RESULTS:ThepositiveratesofserumBRAintheelderswithoutCNSdiseaseswere36.8%(+Jand52.6%(+Jrespectively,bothhigherthanthoseofthyoung(+:O:+:10.5%;bothP<0,O1J,CoNCLUSIoN:BRAisincreasedwithanginthebloodscramofthee1ders.eveninthosewithoutCNSdiseases.Itisindicatedthatweshouldattach

7、importancetotheeffectsofautoantibodiestobrainfunction,Zhang儿,ShangLx,MaXC,Wu0,TaoGS,WangZL,HanZTFangZYWangLNDiagnosisofeartybrainagingbyvaria(ionofbrainreaCfiveautoanflbodyintheelderswithoutdiseasesofcentralnervoussystemZhongguo,inchtngKangfu2004;8I7】:12845IChinal张京立.尚立新,马向晨,吴青,陶国枢,王忠良,韩志涛,房征宇,王鲁宁无神

8、经系统疾病老年人血清脑自身反应抗体改变对早期脑衰老的诊断价值中国临床康复,2004,8I7l:12845hltp:/www.zglckfcom/2OO4ml/0407zypdf摘要目的:观察老年人血清中脑自身抗体改变.方法:用3月龄Wistar大白鼠脑组织冷冻切片作固定抗原,用FITC一山羊抗人多价免疫球蛋白与人血清标本中抗体结合,在荧光显微镜下判断人血清脑自身反应抗体阳性反应.结果:无神经系统疾病老年人血清脑自身抗体阳性率(+:36.8%:+:52,6%)均显着高于年轻人(+:O;+:10,5%;均为P<0.01)结论:随着年龄增长,在即使无神经系统疾病老年人血清中脑自身反应抗

9、体也明显增高.提示脑自身反应抗体对大脑功能的影响应引起注意主题词:脑;衰老;老年人;自身抗体0引言一般认为由于血脑屏障的存在,机体中枢神经系统组织特异性抗原不被自身的免疫系统所识别.文献报道可用成年大鼠大脑组织为抗原,在冷冻切片上观察免疫荧光反应,借此推断人血液内是否有脑自身反应抗体的存在:本文用此法观察无神经系统疾病青年人和老年人血清中抗脑抗体阳性率的差异,评价增龄时机体内脑自身反应抗体的变化1对象和方法设计:非随机的临床对照研究.地点和对象:实验地点:解放军总医院老年医学研究所:对象:老年组:19例,男7例,女12例;年龄6075岁,平均年龄66.6岁,为病史和体检无神经系统疾病的军队干休

10、所离退休干部及家属.青年组:l9例,男l5例,女4例;年龄l930岁,平均年龄20.7岁,为第三.七医院健康献血员.均自愿参加本临床和血液检测.参与者:研究设计者:张京立,陶国枢:资料收集和干预实施者:张京立,尚立新,吴青,陶国枢等.评估者:张京立,尚立新,陶国枢.本实验评估用单盲法,经预实验统一阳性诊断标准.干预措施:分别观察1930岁的青年组和6075岁的老年组血液中血清脑自身反应抗体阳性率的升高改变:取3月龄雄性Wistax大白鼠大脑组织,用磷酸缓冲液(PBS,pH7,4)洗净后做冷冻切片,在20g/LAPES一丙酮液中固定30min,在PBS中清洗3次,将1:10稀释人血清滴加在载玻片

11、的组织上,室温(18)30min后倒掉,在PBS中清洗3次,将1:10稀释FITC一山羊抗人多价免疫球蛋白(IgA,I,IgM)滴加在载玻片上,30min后倒掉,在PBS中清洗3次,将0.02g/LNaN,500g/L甘油液滴在组织片上,用盖玻片封固,在FX.2型落射式荧光显微镜下(x10)阅片并照相存档:荧光染色分级标准,+:满视野内布满黄染细胞;+:黄染颗粒细小,不充满整个细胞;一:整个视野呈绿色,内无黄染颗粒.见图13=主要结局观察指标:两组每例血清样本加于鼠脑冷冻切片上后,用免疫荧光法分别判定为强阳性,弱阳性或阴性等结果.统计学分析:两组强阳性,弱阳性或阴性等计数资料由张京立进行统计学

12、处理,应用确切概率法统计P值,P<0.01为差异有非常显着性意义.2结果2.1老年组背景资料19例老年组病例中多有一至数种非神经系统疾病,按出现频率多少依次为:高血压47%(9/19),高血脂42%(8/19),心律失常32%(6/19),冠心病26%(5/19),高血糖26%(5/19),临床正常16%(3/19)和其他疾病【包括颈椎病11%(2/19),腰椎间盘突出5%(1/191,心脏瓣膜疾病5%(1/19)和甲状腺腺瘤5%(1/19)】.2,2血清脑自身反应抗体阳性率老年组中典型的抗脑抗体反应阳性率(+:36.8%)显着高于青年组(H:0,P=0.OO40;若以鼠脑冷冻切

13、片中非典型荧光染色为判断标准,老年组抗脑抗体阳性率(+:52.6%)亦高于青年组(+:10.5%,P=0.0058)Issl67l一5926CN2l一1470/Rutu.zglckfcornkf23385083!r?!墅:量.重墅垂里,自星垦堕哩望早!堕3讨论在阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)患者中枢神经系统以外的组织细胞寻找病理生理性改变,并作为AD的生物学标志.是AD早期诊断的研究者所追求的目标.文献证实,AD患者血清中有几种抗体明显高于对照组,如:针对乙酰胆碱能神经元的抗体,膜上阴离子转运蛋白的抗体等.理论认为,在AD中产生脑组织自身反应抗体是由于一些神经细胞不断死

14、亡,其组分被吸收,入血后能刺激免疫细胞,形成免疫应答,产生相应抗体.AD中Meynert基底核的乙酰胆碱能神经元大量死亡,因此在AD患者血清中产生抗乙酰胆碱能的脑自身反应抗体很好理解.而band3蛋白在所有的细胞中均存在,该蛋白质随着增龄会被酶降解,其降解产物为衰老细胞抗原(SCA),它诱发产生针对细胞膜上SCA的抗体.该抗体有助于机体清除衰老细胞.本文用大白鼠大脑代替人脑做抗原,用免疫荧光组织切片方法,观察人血清中脑自身反应抗体的存在.切片中阳性反应细胞上结合的人血清中的抗体为对神经组织特异性的抗体,如band3蛋白质抗体,抗乙酰胆碱能神经元抗体等.具体针对神经组织的何种抗原,用本法尚不能区

15、分.本方法属于宏观地观察人体中抗多种脑组织抗原的脑自身反应抗体存在的方法.本文青年组中无典型抗脑抗体反应存在.而在无神经系统疾病的6O岁以上的老年组中,31,6%患者血液中出现了典型的抗脑抗体反应,说明部分老年人体内可产生脑自身反应抗体,老年人体内出现抗脑抗体,提示自身免疫反应在正常大脑的衰老占有一定的地位.即使在临床上无神经系统症状的老年1285人,也多有脑萎缩等大脑衰老性改变,如将抗脑抗体等免疫学因素考虑在内,对老年脑衰退的解释会更加全面.结论:老年人自身抗体免疫反应多有增高,本文的结果支持这一观点,而且揭示在部分老年人血清内出现脑自身反应抗体.它可与大脑组织细胞相结合,并与之相互作用,影

16、响神经细胞生理功能.脑自身反应抗体可能参与尚无神经系统临床表现的老年人大脑的衰老性改变.(图13见插图73页)4参考文献1SinghVK.HoffmanMADetectionofantlb0d】toth?mi('tissueinhumansFumlmmunolog)Letters】984;7f5J:249522诸兴明,臧洁,王军脑脊液Tau蛋白测定存老年性痴呆诊断中的意义Jl中国临床康复,2002,6(131:1909103SinghVK.FudenbergHHDetectionofbrainautoantibodiesintheserdmofpa?tientswithAlzheime

17、rdiseasehutnotDown's,ndromelmmunolog?Lettersi986;j2(56):2778O4邰开利,漆静,张守华,等重庆两路口街道老年期痴呆横断而研究J中国临床康复,2003,7(10J:155015闵宝明,贾建平,楚长彪,等认知功能检查量表在老年期痴呆临床诊断中的应用fJ】中国临床康复,2002,6(11:30l6AmadueciL,FalciniM,LippiAHumoralandcellularimmunotoDrepertoireinMzheimer'sdiseaseAnnNYAcdSci1992.663:349567FoP.Brador

18、dHF.DoeheavM.etalEvident矗'rthepresenceofantibodiestocholinergieneuronsinthesenlmofpatientswithMzheimer'sdiseaseeuroll998.235(8l:466718BosmanGJ.JanzingJG.BartholomeusIG.etrfEr3throe?teagingchat-atteristiesinelderbilldividualswithbeginningdementia,"H)hiolog)4ging1997:l8I31.19I一59CmerCC.Po

19、ulinJE.GustafsonMR.etalP0sffrantIatl0nalchangesinbtmd3inadubHparisontochangesobservedinAlzheimer'sdiseaseL/J;il996;58【8):6556410KMM.xantT,GoodmanJAutoantilmdiestoband3duringa印nganddiseaan(1aginginterventions4nn,'adSm1994:'I9.4l947IIKay'MMBand3inagingandneurologicaldisease4nn,'rnS

20、cl991.62il79204微波电脑中频配合康复训练治疗偏瘫肩痛30例高敏(昆明市延安医院康复科.云南省昆明市65005¨摘要:脑卒中后偏瘫患者的肩关节疼痛直接影响到患者的上肢功能恢复及日常生活活动.应用微波电脑中频并配合康复训练治疗偏瘫肩痛取得较满意疗效.主题词:偏瘫;肩痛;微波;康复1对象和方法1.1对象30例偏瘫患者,男18例,女12例;年龄4270岁,平均59岁;左侧瘫21例,右侧瘫9例,病程2周一1年,全部病例均经CT或MRT检查,诊断明确,并排除脑损伤和周围神经病变所至上肢运动功能障碍者1.2方法物理疗法:患者仰卧或座位,使肩胛骨充分前伸,上肢予以适当支撑,使患肢于无痛

21、范围采用珠海市和佳医疗设备有限公司生产的WKDV型馓波治疗仪,给以微波治疗2Omin,1次/d,将辐射器置于疼痛部位进行治疗,工作频率2450MHz,波长为12.25cm,治疗功率l030W,一般调节到患者感觉到微热温热为宜,15d为1疗程治疗结束后,采用北京产K8832一T电脑多功能电疗仪,硅橡胶电极一对,患肩部前后对置法,选择机存处方4(治疗肩周炎,肱骨外上髁炎,腱鞘炎)或4(镇痛),电极下衬一层湿绒布垫,治疗剂量耐受量,冶疗2Omin/次,15d为1疗程,进行13个疗程.康复训练:双手上举训练:患者双手叉握,即双手十指交叉,患侧拇指处于上方,掌心相对,在坐位或仰卧位下,由健手带动患手上举

22、过头.肩胛骨的上提与下降,其训练方法为:患者在治疗台上取患侧在上的侧卧位;治疗者坐于患者后方,靠住患者,使其躯干稳定,一手放在患者的肩胛骨上,另一手放在胸大肌上.夹住雇胛肌,用双手做肩胛骨的上提,下降运动.上肢负重训练上肢屈肌痉挛的抑制,活动伸展的上肢:患者仰卧,肘伸展.治疗者辅助患者上举,外展,内收或旋转上肢.活动范围由小到大,并随着主动性的增加,逐渐减少辅助量.滚桶训练i雇胛骨的上方旋转训练.肩关节外展,肩关节屈曲训练2结果根据Partridge等的方法进行改良.对宿关节上举(至180.),屈曲,外展(至90.)分别进行疼痛程度的评估.并且对肩痛的频度进行评估.治疗前后疼痛程度积分为上举治

23、疗前2.73±0.28)分,治疗后(1.56±0.36)分;外展治疗前(2.52±0.32)分,治疗后(1.06±0.30)分;屈曲治疗前(23l±0.26)分,治疗后(0.88±025)分;总分治疗前(756±0.86)分,治疗后(3.51±0.92)分.频度治疗前3.42±0.29.治疗后1.53±0.21治疗前后疼痛程度频度积分比较,经统计学r检验,差异有显着性意义(t=14.0528.91.P<0.05)3讨论微波可直接辐射病区,其电磁能量深达肌层,改善深部血液循环,使代谢

24、旺盛,促进深层炎症的吸收.缩短疼痛时间,限制功能障碍的发展.中频的治疗作用以低频调制的中频电流最显着,治疗后使局部的痛阈增高,通过中频电的电刺激,还能兴奋周围神经.将刺激反馈到中枢,促进中枢与周围神经的联系,促进瘫痪肢体肌力和肌张力的恢复.在理疗的基础上进行隶复训练,纠正已紊乱的关节结构,对缓解症状,扩大局部活动范围,增加肌力,防止肌肉萎缩有良好的作用收稿日期:20031212(13/SZY)雌激素对大脑皮质细胞的神经保护作用Neuroprotectiveeffectofestrogenoncerebralcorticalcells一(正文见第1280页)_)p2000l000750500250l00图1对照组核仁消失,染色质边聚,细胞凋亡,线粒体空泡变性,基质密度低透射电镜(1×6000)图2雌激素组线粒体,糖原丰富,线粒体嵴清晰,基质密度大透射电镜(1×6000)图3对照组Bc1.2蛋白表达免疫组化(1×200)图4雌激素组Bc1.2蛋白表达免疫组化(1×200)图5对