鸭圆环病毒病对禽流感疫苗免疫抗体产生的影响.docx

1、徭矗矗矗鸭圆环病毒病对禽流感疫苗免疫抗体产生的影响feyfeyfey石永胜I,温新瑞'，苏文广I,周伟胜'，蓝新文'，李媛'，梁振兴二郑日维2（1.北海市动物疫病预防控制中心，广西北海536000；2.北海市铁山港区动物疫病预防控制中心，广西北海536017）中图分类号:S858.235.3文献标识码:B据资料报道,鸭圆环病毒可侵染免疫系统，导致机体免疫功能下降,主要特征是引起鸭的免疫抑制，鸭生长迟缓并有零星死亡。为验证这一结论,2013年2014年本研究选择了一个被圆环病毒感染，而且出现临床症状的番鸭场,并在其周边0.720公里范围内，选择4个未被圆环病毒感染

2、的番鸭养鸭场（户）进行禽流感疫苗免疫效果对比试验。现将试验情况报告如下。1试验材料与方法1.1试验动物及地点1.1.1发病场情况该场位于北海市银海区平阳镇，每月养鸭1批2批，每批1500只，每年饲养10批15批。2014年3月发现约30日龄的小鸭均出现脱毛，羽毛凌乱下垂、没有光泽，羽轴出血、充血;病鸭生长缓慢（出栏时间推迟30-40天），消瘦,个别鸭拉稀。剖检病鸭,发现血液稀薄，心、肝、肾、脾、肺颜色比正常的稍淡，有贫血症状。采集肾、脾、肺和羽毛根带有血液的羽毛，经广西动物疫病预防控制中心PCR检测，结果是鸭圆环病毒阳性。在发病场设试验组。1. 1.2阴性场情况阴性场4个,分布于北海市银海区，

3、饲养规模为每批50只1500只，经临床诊断和病原学检测证实未被染圆环病毒感染。阴性场设为对照组。L2试验疫苗有3种，一是重组禽流感病毒灭活疫苗（鸡胚源，H5N1亚型Re-6株）（以下简称鸡胚源H5N1亚型Re-6株），是某生物公司生产，批号是2012059；二是重组禽流感病毒（H5N1亚型）灭活疫苗（细胞源,Re0株）（以下简称细胞源H5N1亚型Re0株），是某科技股份有限公司生产，批号收稿日期:2016-11-30作者简介:石永胜（1961-），男，农业推广研究员,长期从事动物疫病防控工作。文章编号：1002-5235（2017）04三是某生物药品有限公司生产水

4、禽专用禽流感灭活疫苗（H5N2亚型D7株）（以下简称水禽专用H5N2亚型D7株）批号2013010,有效期:20140811。上述疫苗均由广西动物疫病预防控制中心提供。1.3试验方法接种的疫苗分3种。一是接种鸡胚源H5N1亚型Re-6株疫苗;二是接种细胞源，Re0株疫苗;三是接种水禽专用H5N2亚型D7株疫苗。用于试验的疫苗，试验组接种鸭一批，对照组接种鸭14批（分布于鸭场（养鸭户）14个。疫苗试验组和对照组接种的疫苗批号、剂量均相同，剂量0.7毫升/只,免疫日龄相差07日。试验均仅做一免。一免后30天采血，分离血清送广西动物疫病预防控制中心检测免疫抗体。H5N1亚型Re-6株疫苗，仅用哈尔滨

5、维科生物技术开发有限公司生产的禽流感H5亚型血凝抑制抗原（以下简称哈兽H5抗原，下同，批号2013003）进行检测；H5N2亚型D7株除上述抗原检测外，还用华南农大生物药品有限公司生产的H5检测抗原（D7株）检测（以下简称华南农大H5D7株抗原），批号为20130715o方法按GB/T18936-2003高致病性流感诊断技术血凝抑制（HI）试验进行。15饲养管理试验和对照组均是放牧饲养,饲粮均是市场购进的配合饲料，饲喂是自由采食。2结果与分析结果分别见表1表4。2. 1不管是用鸡胚源或者细胞源H5N1亚型Re-6株灭活苗、水禽专用H5N2亚型D7株灭活苗免疫,用哈兽H5抗原检测免疫抗体，试验组

6、免疫抗体水平均比对照组低。除细胞源H5N1亚型Re-6株灭活苗对照组抗体水平是3.41og2比对照组21og2高出1.41og2,经生物统计t检验,差异达到显著（p<0.05）外,其余各试验点,对照组免疫抗体水平均表1鸡胚源H5N1亚型Re-6株免疫抗体结果(用哈兽H5抗原检测)单位:只试验组对照组t检验批次免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)鸭场免疫采样抗体水平(岫)HICV(%)11500202.5±2.183.6A500114.7±2.144.6p<0.01C550216.1±1.727.7p<0.01D512125.1±1

7、.529.4P<0.01合计1500202.5±2.183.61562445.5±2.036.4P<0.01注:合并对照组个体数据，与试验组对比,并进行t检验，结果：t=5.35tO.Ol=2.66,t>t0.01<0.01,表明对照组免疫抗体水平显著高于试验组,旦差异达到极显著。表2细胞源HSN1亚型ReG株免疫抗体结果(用哈兽H5抗原检测J)单位:只试验组对照组t检验批次免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)鸭场免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)11500212.0土24121.5B1500323.4±2.160.6p<

8、;0.05注:生物统计I检验结果:t=2.29t0.05=2.008,t>t0.05,p<0.05,表明对照组免疫抗体水平显著高于试验组。表3H5N2亚型D7株免疫抗体结果(用哈兽H5抗原检测)单位:只盘验0血组批次免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)鸭场免疫采样抗体水平(Iog2)HICV(%)t胸验11500180.7±1.3180.6A500203.4±2.246.2p<0.01B1500153.5±1.331.61p<0.01C1500215.2±1.716.8p<0.01D500154.0±2.92

9、1.7p<0.01合计1500180.7±1.3180.64000714.1±2.253.3p<0.01注:合并对照组个体数据，与试验组对比,并进行t检验，结果：t=8.46,t0.01=2.63。表明对照组免疫抗体水平显著高于试验组，且差异达到极显著。表4H5N2亚型D7株免疫抗体结果(用华南农大H5D7株抗原检测)单位:只试验组对照组批次免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)鸭场免疫采样抗体水平(log2)HICV(%)11500182.5±2.494.3A500203.9±1.333.3p<0.05B1500154.6

10、7;1.531.6p<0.01C1500213.6±1.716.81p<0.01D500155.5±1.221.7p<0.01合计1500182.50±2.494.34000715.1±1.631.4p<0.01注:合并对照组个体数据，与试验组对比,并进行t检验,结果:t=4.41,t0.01=2.63。表明对照组免疫抗体水平显著高于试验组，且差异达到极显著。高于试验组，差异达到极显著(p<0.01)。从变异系数看,对照组抗体均匀度显著高于试验组。华南农大H5D7株抗原检测一批试验鸭和对照组4个鸭场H5N2亚型D7株免疫抗体

11、，除A鸭场免疫抗体是3.9log2比试验组2.51og2高出1.41og2经生物统计t检验，差异达到显著(P<0.05)外,其余各试验点，对照组免疫抗体水平均高于试验组，差异达到极显著(P<0.01)o2.2以免疫疫苗种类归类，将对照组所有鸭场(养鸭户)鸭的个体免疫抗体合并后进行生物统计t检验，不管用哈兽H5抗原检测或者华南农大H5D7株抗原检测免疫抗体，对照组显著高于试验组,差异达到极显著(P<0.01)。从变异系数看，对照组抗体均匀度显著高于试验组。3讨论与小结1鸭圆环病毒病确实会引起鸭禽流感疫苗免疫抑制作和生长迟缓，而且十分显著。据陈翠腾等报道，圆环病毒病侵害鸭的免疫组

12、织,表现为淋巴细胞萎缩、坏死等，使得鸭群容易遭受其它疾病侵害，出现继发和混合感染。由此推测圆环病毒病也可能引起免疫抑制。3.2参加试验的圆环病毒发病场，鸭生长速度缓慢,禽流感免疫抗体水平明显低于阴性场,但鸭的死亡率不高。3批鸭共4500只，出现圆环病毒临床症状后死亡35只(每批死亡812只)，死亡率0.8%o致谢：本试验得到广西动物疫病预防控制中心郑敏总兽医师的指导,完成实验室检测工作，在此表示衷心的感谢！参考文献口万春和，施少华,傅光华，等.鸭圆环病毒研究进展J.福建畜牧兽医,2009,31（4）：22-232SoikeD,AlbrechtK,HattermannK,etal.Novelci

13、rco-virusinMulardduckswithdevelopmentalandfeatheringdisordersJ.VetRes,2004,(154)：792-793.3陈翠腾、傅光华、黄瑜.家禽病毒性免疫抑制病研究进展J.畜牧与兽医,2014(7):126-129.广西区内四种鸭蛋卵磷脂与氨基酸测定分析吴洁'，莫国东之，刘征凌钦润I,罗元义二万火福之，廖玉英之，韦凤英之（1.防城港市动物疫病预防控制中心，广西防城港530008；2,广西畜牧研究所/广西家畜遗传改良重点实验室，广西南宁530001；3.桂林市畜牧站，广西桂林541000；4.广西融水四夕生态农业开发有限公司，

14、广西融水545300）中图分类号:S834文献标识码：B文章编号：1002-5235（2017）04-0189-04摘要:本试验以广西区内桂林龙胜翠鸭、柳州融水香鸭、防城港上思那琴香鸭和红树林海鸭等四种产蛋鸭的蛋为材料，研究其卵磷脂含量和氨基酸成分差异。结果表明：（1）四种鸭蛋的卵磷脂含量差异极显著（P<0.01），其中防城港红树林海鸭蛋含量最高，达2.894"100g,其他三种依次为龙胜翠鸭蛋2.788g/100g、那琴香鸭蛋2.772g/100g、融水香鸭蛋2.211g/100go（2）四种鸭蛋的氨基酸总量（T）在12.01013.491/100g之间，其中桂林龙胜翠鸭蛋的

15、氨基酸总量最高，达13.491g/100g,其他三种依次为防城港红树林海鸭蛋13.367g/100g、柳州融水香鸭蛋13.347g/100g、上思那琴香鸭蛋12.010g/lOOg,各品种间差异极显著（p<0.01）。（3）龙胜翠鸭蛋中的必需氨基酸（E）、儿童必须氨基酸（CE）含量和鲜味氨基酸（F）的含量均为最高。（4）四种鸭蛋中各种必须氨基酸（E）占总氨基酸（T）的质量分数的比值（E/T）均接近或高于WHO/FAO氨基酸模式谱参考值。关键词:鸭蛋；卵磷脂;氨基酸我国养鸭业历史悠久，具有得天独厚的品种资源优势，特别是各地方品种长期进行闭锁繁育,遗传基础较纯，各地方品种间的生产性能存在较大

16、的差异。桂林龙胜翠鸭、柳州融水香鸭、防城港上思那琴香鸭和红树林海鸭均属于广西地方鸭品种小麻鸭系列，因地域差异和饲养方式不同，所产的鸭蛋在外观、口感和风味上具有比较明显的差别。本研究比较了广西区内四种小麻鸭鸭蛋中卵磷脂收稿日期：2017-04-12基金项目：现代化农业产业技术体系广西创新团队专项（nycytxgx-cxld-04-20）0作者简介:吴洁（1984-）,女，畜牧师，主要从事畜禽现代养殖技术推广和家禽繁殖育种方面的研究。*通讯作者。E-mail：315951610o含量差异,并对氨基酸组成成份和含量进行比较分析，旨在为今后开展广西地方鸭品种保护、选育及蛋品质选择等提供科学依据。1材料与方法1.1试验材料到四个小麻鸭原产地:桂林龙胜,柳州融水和防城港收集鸭蛋，在产蛋高峰期随机抽取同一天所产的50个鸭蛋，在产出后24h内进行测定。12仪器设备所用的主要仪器有电子天平（PL203-LC,美国METTLERTOLEDO公司）、高效液相色谱仪（LC2010AHT,日本岛津）、紫外分光光