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文档简介

1、霉菌、酵母菌检验（一）实验原理霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。（二）实验器材1.培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基马铃薯（去皮切块） 300 g 葡萄糖 20.0 g 琼脂 20.0 g 氯霉素 0.1 g 蒸馏水 1000 mL制法：将马铃薯去皮切块，加1000mL蒸馏水，煮沸10 min20 min。用纱布过滤，补加蒸馏水至 1000 mL。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装后，121 灭菌 20 min。倾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培养基中。2.器皿：已灭菌的平皿（9套

2、/组），1mL吸管（6支/组），试管（15×150）（6/组），三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL（内装蒸馏水250mL），10mL吸管。3.其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽菌锅，电烘箱，线绳，毛刷等。（三）操作步骤1.检验程序2.操作要点1）采样 选取有代表性的样品并避免采样时的污染。2）样品处理（1）以无菌操作称取检样25mL，放入含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中，振摇30 min，即为1:10稀释液。（2）用灭菌吸量管吸取1:10稀释液10mL，注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸量管反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。（3）取1mL 1:10稀释液注入含有

3、9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸量管吹吸5次，此液为1:100稀释液。（4）按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸量管。3）接种培养 根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿，然后将凉至45 左右的培养基注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于2528温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。4）计算方法 通常选择菌落数在10150之间的平皿进行计数，一个稀释度使用两个平板，采用两个平板的平均数；选择稀释度也选择平均菌落数在10150之间的稀释度，菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克（或毫升）检样中所含霉菌和酵母数。（四）实验报告平皿菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板的平均菌落总数。（1）将各稀释平板上的菌落数填入下表霉菌测定报告：表1 霉菌检测结果稀释度平板号123平均123平均123平均菌落个数根据试验结果，报告检测结果：每1mL（g）食品中的霉菌数是_。酵母菌测定报告：表2 酵母菌检测结

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