输血科配制自备试剂的标准操作规程

1、输血科配制自备试剂的标准操作规程1、目的本文件规定了输血科自备试剂的相关操作程序，以确保输血科试验的质量控制，使检验结果更准确。2、适用范围本文件适用于医院输血科 ABOffll型、RhD血型、盐水交叉配 血、凝聚胺交叉配血、柱凝胶法血型鉴定及交叉配血，新生儿溶 血筛查试验，抗人球蛋白试验等试验项目检验过程的质量控制管 理。3、职责输血科技术人员负责本实验室所用自备试剂的配制与确认。4、操作规程4.1 0.1mol/L2- 前基乙醇(2-Me)的配制材料：2-Me, PH7.4PBS配制方法：称取 2-Me80mg加入PH7.4PBS 10mL放4 c冰箱 可以保存4周。适用范围：该试剂为硫氢

2、化合物，能分裂19S的IgM抗体成为 7s单位。含IgM抗体的血清经2-Me溶液处理后，IgM抗体重链 之间的二硫键被打开，不能再凝集盐水介质中的对应红细胞， 用 于含IgG和IgM混合抗体血清中IgG的检测；鉴定抗体的免疫球 蛋白类别；消除被IgM抗体包被的红细胞的自身聚集。4.2 磷酸盐缓冲液（PBS配制材料：KH2PO4分析纯），Na2HPO4分析纯），去离子蒸储水配制方法1）溶液A: 1/15mol/L KHPO溶液：取 KHPO9.08g （若试剂含结 晶水请计算后加入相应重量），加少量蒸储水溶解后，移至 1000ml容量瓶稀释至刻度，调 PH至5.0 o2）溶液 B: 1/15mo

3、l/L NaHPO容液：取 NaHP（49.47g （若试剂含 结晶水请计算后加入相应重量），加少量蒸储水溶解后，移至 1000ml容量瓶稀释至刻度，调 PH至9.0。3）取两种溶液以适当比例混合，配制符合要求的PHE作缓冲液， 血清学试验常用PBS PH如下表：PH溶液A （ml）溶液B （ml）5.496.04.05.594.06.07.228.072.07.323.276.87.419.280.87.710.689.47.88.591.57.96.893.28.05.894.78.14.295.88.23.097.04)使用之前要检查工作液的 PH,若不符合要求，加少量酸性溶 液A或碱性

4、溶液B矫正。适用范围：广泛用于血型血清学试验、试剂稀释等。4.3 红细胞悬液的制备分别采取已知正常 A、B、O三种血型的红细胞，以盐水洗涤3 次以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液(见表)。红细胞悬液的配制悬液浓度(% 压积红细胞(滴)盐水(滴)2 ml (40)210.8 ml (16)511010.4 ml (8)2010.2 ml (4) 为了防止红细胞悬液敏感性不一致。可随机采取3个或3个以上 的健康成人血液，按A B。型分别混合后，按上述方法制备。如 用于不规则抗体筛查，则至少应选5人以上的红细胞混合。参照定型血清质控标准，进行质量检查合格，置4 c冰箱保存备用。如抗原性降低或长菌、溶血则应弃之。配置者应做好记录、 登记。如将红细胞保存，应严格注意无菌技术，以ACD呆存7按4:1抗凝。可保存三周。临时取出一部分，洗涤后配成所需浓度使用。2%勺红细胞悬液一般用于滴定抗体效价，5%勺红细胞悬液常用于 血型鉴定和间接抗人球蛋白实验，10%勺红细胞悬液用于测定抗体亲 和力。4.4生理盐水（NS）配制材料:NaCl （分析纯），去