第34讲　微生物的培养和利用

1、.生物技术理论第34讲微生物的培养和利用考试说明 1.微生物的别离和培养实验与探究才能。2.某种微生物数量的测定实验与探究才能。3.培养基对微生物的选择作用实验与探究才能。4.微生物在其他方面的应用实验与探究才能。考点一微生物的实验室培养 1.培养基1概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其生长繁殖的。2营养成分:水、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。3类型:培养基含凝固剂,培养基不含凝固剂。 2.无菌技术1目的:获得。2关键:防止的入侵。3无菌技术的主要方法及适用对象连线 措施 操作对象 主要方法ya消毒b.灭菌.培养基.接种环.操作者双手.培养皿.

2、无菌室.牛奶灼烧灭菌干热灭菌巴氏消毒紫外线消毒化学消毒高压蒸汽灭菌 3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1步骤:计算溶化倒平板。2倒平板的过程在火焰旁右手拿锥形瓶,左手。右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过。左手将培养皿翻开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立即盖上。待平板冷却凝固后,将平板放置,使皿盖在下、皿底在上。 4.纯化大肠杆菌1原理:在培养基上将细菌稀释或分散成细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。图11-34-12平板划线法图11-34-1中:通过接种环在琼脂固体培养基外表的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表。3稀释涂布平板法图11-34-1中:将菌液进展一

3、系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到的外表,进展培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的。 5.菌种的保藏1对于频繁使用的菌种,可以采用法。2对于需要长期保存的菌种,可以采用法。 1.消毒和灭菌的区别条件结果消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部一部分对人体有害的微生物不包括芽孢和孢子灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 2.两种纯化细菌的方法的比较比较工程平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基外表连续划线一系列的梯度稀释涂布平板操作优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数缺点不能

4、对微生物计数操作复杂,需要涂布多个平板适用范围适用于好氧菌适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 3.平板划线操作3个易错点1灼烧接种环之后,要冷却后再进展接种,以免温度太高杀死菌种。2划线时最后一区域不要与第一区域相连。3划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。1.2019广东韶关一模 为了调查北江河中细菌的污染情况,某研究性学习小组同学进展了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请答复与此实验相关的问题。1实验中制备的牛肉膏蛋白胨培养基的部分成分列表如下:成分牛肉膏蛋白胨NaCl蒸馏水含量0.5 g1 g0.5 g100 mL表中各成分含量的比例确定的原那么是。2对培养基进展灭

5、菌,通常采用的方法是。为了使培养基到达良好的灭菌效果,一般在压力为100 kPa,温度为的条件下,维持1530 min。3为了更好地对细菌计数,一般采用的接种方法是,该方法的操作是将菌液进展一系列的,然后再分别到琼脂固体培养基的外表。4接种后放在恒温箱培养一段时间后,为保证结果准确,选择菌落数在的平板进展计数。该组同学在菌落计数时发现,统计的菌落数比实际数目要低,可能的原因是。2.2019福建漳州三模 如图11-34-2为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请答复以下问题:图11-34-21是制备培养基时中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是通过,防止瓶口的微生物污染培养

6、基。2该纯化醋酸菌的接种方法是。完成步骤的操作,接种共需要次灼烧处理。3纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋消费,那么可以采用的方法保存菌种,但这种方法保存的时间不长,原因是。4将醋酸菌参加果酒中,乙醇可为醋酸菌的生命活动提供,将温度控制在,可以获得较多果醋。考点二土壤中分解尿素的细菌的别离与计数 1.挑选菌株1自然界中目的菌株挑选的根据:根据它对的要求,到相应的环境中去寻找。2实验室中微生物挑选的原理:人为提供有利于生长的条件包括营养、温度、pH等,同时抑制或阻止其他微生物生长。3选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时和其他种类微生物生长的培养基。 2.统计菌落数目1常用方法:法。2统计根据:

7、当样品的足够高时,培养基外表生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。3其他方法:还可利用计数。 3.设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响,进步实验结果的,例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性,需以培养基培养作为空白对照。 4.实验设计工程内容实验原理1能合成的细菌才能分解尿素2配制以为唯一氮源的培养基,可以生长的细菌就是能分解尿素的细菌实验流程土壤取样富含配制土壤溶液和制备培养基涂布平板与培养菌落鉴定1方法:在以尿素为唯一氮源的培养基中参加指示剂培养分解尿素的细菌2原理:细菌分解尿素的反响中,细菌合成脲酶将尿素分解

8、成了,其会使培养基中的增强,pH升高 1.选择培养基的作用原理1在培养基中参加某种化学物质,如参加青霉素可以别离出酵母菌和霉菌;参加高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的参加是在满足根本所需培养成分的根底上参加。2改变培养基中的营养成分,如缺乏氮源时可以别离出固氮微生物;以石油作为唯一碳源时,可以别离出能消除石油污染的微生物。3改变微生物的培养条件,如将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。4通过某些特殊环境别离微生物,如在高盐环境中可别离出耐盐菌;在高温环境中可别离得到耐高温的微生物。 2.培养基的种类与应用分类根据种类特点应用物理性质液体培养基不加凝固剂工业消费半固体培养基加

9、凝固剂少观察微生物的运动、微生物的别离、鉴定固体培养基加凝固剂多微生物的别离、鉴定,活菌计数、保藏化学成分天然培养基含化学成分不明的天然物质工业消费合成培养基培养基成清楚确或用一定化学物质配制分类、鉴定用处选择培养基添加某物质,抑制杂菌生长,促进所需微生物生长培养别离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中参加某种指示剂鉴别微生物3.两种计数方法的比较比较工程间接计数法稀释涂布平板法直接计数法显微计数法原理当样品的稀释度足够高时,培养基外表生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微

10、镜下计算一定容积的样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数:CVM。C:某稀释度下平板上生长的平均菌落数;V:涂布平板时所用的稀释液的体积mL;M:稀释倍数每毫升原液所含细菌数:每小格平均细菌数40010 000稀释倍数缺点当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大【题组训练】1.2019南昌一模 下表为某微生物培养基的配方,请答复相关问题:成分含量成分含量Na2HPO43 g尿素1.0 gK2HPO41 gC6H12O630 gMgSO47H2O0.5 g琼脂15 gFeSO40.01 gH2O1000 mLNH4NO30.3 g1按物

11、理性质划分,该培养基属于培养基,无论配制何种培养基,在原料称量、溶化之后都要先,然后分装、包扎并灭菌,常用的灭菌方法是。2根据培养基的成分判断,该培养基能否用于别离土壤中分解尿素的细菌?,原因是。3为检测尿素分解菌是否存在,还应参加,假如存在,将出现反响。4微生物常用的接种方法有。2.某研究小组从牛的瘤胃中采集样本,进展分解尿素的微生物的别离与计数。实验根本步骤如图11-34-3所示。配制培养基灭菌、倒平板接种培养观察、统计图11-34-31分解尿素的微生物含有,因此,配制培养基时以尿素作为唯一氮源,尿素会被分解成,使培养基的碱性增强。2配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起的作用;培养基中添加作为

12、指示剂,可使目的菌落的周围产生红色环带。3对尿素溶液进展灭菌的最适方法是灭菌。A.高压蒸汽B.干热C.添加抗生素D.过滤E.紫外线照射F.70%酒精浸泡4该小组在接种前,随机取假设干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后将1 mL瘤胃样液稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为个,理论上,统计的菌落数往往填“低“等或“高于接种的实际活菌数目。易错点拨“选择菌落数在30300的平板的提醒1只得到1个菌落数在30300的平板是错误的,原因是不符合实验的重复

13、原那么,易受到偶尔因素的影响。2得到3个或3个以上菌落数在30300的平板,也不一定正确,原因是假如不同平板间差异较大,如得到3个平板,菌落数分别为230、34、240,虽然菌落数均在“30300,但由于34与另外两个平板差异较大,应找出原因并重新实验。考点三分解纤维素的微生物的别离 1.纤维素酶1纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括、和三种组分。2作用:纤维素。 2.纤维素分解菌的挑选1方法:法。纤维素分解菌2原理:刚果红纤维素红色消失,出现。3培养基:以为唯一碳源的选择培养基。4实验流程土壤取样:富含的环境选择培养:用培养,以增加纤维素分解菌的浓度 :制备系列稀释液涂布平板:将样品涂布

14、到的培养基上 挑选产生的菌落 1.别离纤维素分解菌所用的两种培养基比较别离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基,再用鉴别培养基。1选择培养基为液体培养基,以纤维素为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长;因培养基中无凝固剂,故其为液体培养基,利用液体培养基能使营养成分被充分消耗,以增加纤维素分解菌的浓度。2鉴别培养基含琼脂,为固体培养基,细菌可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法应用的就是鉴别培养基。 2.挑选微生物的两个实例比较比较工程土壤中分解尿素的细菌的别离分解纤维素的微生物的别离方法利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进展选择培养利用以纤维素为唯一碳源的选择培

15、养基进展选择培养续表比较工程土壤中分解尿素的细菌的别离分解纤维素的微生物的别离原理分解尿素的细菌可以合成脲酶,故能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长培养基中含有丰富的纤维素,可以分解纤维素的微生物具有更多的生存时机而大量繁殖鉴定在培养基中参加酚红指示剂,指示剂变红说明尿素被分解,从而说明菌落中的细菌为分解尿素的细菌刚果红染色法,菌落周围出现红色消失的透明圈,该菌落为分解纤维素的微生物的菌落1.2019成都一诊 牛的食物主要是草茎类,其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。答复以下问题:1纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,组成纤维素的单体为。牛胃中某

16、些微生物可以产生纤维素酶,这种酶是一种复合酶,其中的能使纤维素分解成纤维二糖。 2实验室培养牛胃内的微生物,别离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是。为防止周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进展;倒平板用的培养皿需要保持枯燥,可以采用法进展灭菌。3为了从牛胃的食糜中别离出纤维素分解菌,配制的选择培养基要以为唯一碳源。挑选纤维素分解菌时,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再参加刚果红进展颜色反响,另一种是。在涂布平板时滴加到培养基外表的菌悬液量不宜过多,原因是。2.2019河北石家庄二模 为了别离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进展如图11-34-4所示的

17、实验。图11-34-41配制好的培养基通常使用法灭菌。步骤与步骤中培养基成分相比,最大的区别是。2同学A进展步骤的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是,出现图乙结果可能的失误操作是。3同学B也按照同学A的接种方法进展了步骤的操作:将1 mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为个。4步骤需要振荡培养,原因是5步骤后取样测定石油含量的目的是。历年真题明考向1.2019全国卷 某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。答复以下问题:1有些细菌能分

18、解尿素,有些细菌那么不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是答出两点即可。2为了挑选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择填“尿素“NH4NO3或“尿素+NH4NO3作为氮源,不选择其他两组的原因是3用来挑选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有答出两点即可。2.2019江苏卷 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备根据图11-34-5操作步骤,从处理废水的活性污泥中别离挑选酚降解高效菌株。请答复以下问题: 图11-34-51酚降解菌富集培养基含

19、有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有。2将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐,以到达富集酚降解菌的目的。假设上图平板中菌落过于密集,应进一步,以便于菌落计数与别离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加。3图11-34-6为连续划线法示意图,在图中填图中序号区域更易获得单菌落。 图11-34-64采用比色测定法使用苯酚显色剂检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进展显色反响,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为管号123456苯酚浓度mg/L1 假如废水为50 mg/L 苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,那么需将残留液稀

20、释填序号:51020倍后,再进展比色。3.2019全国卷 空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板搜集教室空气中的微生物,以理解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下:配制培养基成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O; 制作无菌平板; 设置空白对照组和假设干实验组,进展相关操作; 将各组平板置于37 恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。答复以下问题:1该培养基中微生物所需的氮来源于。假设要完成步骤,该培养基中的成分X通常是。2步骤中,实验组的操作是3假设在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现

21、了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了现象。假设将30即36-6个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法填“正确或“不正确。4.2019全国卷 某同学用新颖的泡菜滤液为实验材料别离纯化乳酸菌。别离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。答复以下问题:1别离纯化乳酸菌时,首先需要用对泡菜滤液进展梯度稀释,进展梯度稀释的理由是。2推测在别离纯化所用的培养基中参加碳酸钙的作用有和。别离纯化时应挑选出的菌落作为候选菌。3乳酸菌在-20 长期保存时,菌液中常需要参加一定量的填“蒸馏水“甘油或“碳酸钙。第34讲微生物的培养和利用考点一【知识梳理】1.1营养物质营

22、养基质2碳源氮源pH氧气3固体液体2.1纯洁培养物2外来杂菌3a-a-a-b-b-b-3.1称量灭菌2拔出棉塞火焰培养皿的皿盖倒过来4.1单个2A连续划线3B琼脂固体培养基菌落5.1临时保藏2甘油管藏【题组训练】1.1根据所培养微生物对各营养成分的需求量或比例 2高压蒸汽灭菌1213稀释涂布平板法梯度稀释涂布430300某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成的解析 1培养基配制的过程中,成分含量的比例确定的原那么是根据所培养微生物对各营养成分的需求量或比例。2对培养基进展灭菌,通常采用的方法是高压蒸汽灭菌,即将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内,为到达良好的灭菌效果,一般在压力为1

23、00 kPa,温度为121 的条件下,维持1530 min。3为了更好地对细菌计数,一般采用的接种方法是稀释涂布平板法,该方法的操作是将菌液进展一系列的梯度稀释,然后再分别涂布到琼脂固体培养基的外表。4接种后放在恒温箱培养一段时间后,为保证结果准确,选择菌落数在30300的平板进展计数。由于某些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成的,因此统计的菌落比实际数目要低。2.1倒平板灭菌2平板划线法63临时保藏菌种容易被污染或产生变异4能量3035解析 1是制备培养基时倒平板中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是通过灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。2根据图可知,该纯化醋酸菌的接种方法

24、是平板划线法。平板划线时,每次划线前都要进展灼烧,最后一次划线完毕也要进展灼烧,因此共需要6次灼烧处理。3纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋消费,那么可以采用临时保藏的方法保存菌种,但这种方法保存的时间不长,原因是菌种容易被污染或产生变异。4将醋酸菌参加果酒中,乙醇可为醋酸菌的生命活动提供能量;果醋发酵的适宜温度是3035 。考点二【知识梳理】1.1生存环境2目的菌株3抑制阻止2.1稀释涂布平板2稀释度活菌3显微镜直接3.非测试因素可信度未接种的4.脲酶尿素有机质系列稀释计数酚红氨碱性【题组训练】1.1固体调pH高压蒸汽灭菌2不能培养基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源3酚红红色4平板划线法、稀

25、释涂布平板法和稀释混合平板法解析 微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求,对异养微生物来说,含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方向的作用。1分析题中表格可知,该培养基中参加琼脂作为凝固剂,因此属于固体培养基,不管何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要先调整pH,培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌。2根据培养基的成分判断,该培养基中含有NH4NO3,尿素不是唯一氮源,因此该培养基不能用于别离土壤中分解尿素的细菌。3为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的选择培养基中参加酚红指示剂,

26、假如存在尿素分解菌,那么指示剂将变红色。4微生物常用的接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法和稀释混合平板法。2.1脲酶或分解尿素的酶氨或NH32凝固剂酚红3D4检测培养基平板灭菌是否合格4.7108低解析 常用的灭菌方法:高压蒸汽灭菌法适用于一般培养基和玻璃器皿灭菌;干热灭菌适用于需要保持枯燥的玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基都不能进展干热灭菌;无菌室、缓冲间和接种箱常用紫外线进展空气灭菌;微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌;煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些生物的孢子和芽孢,一般适用于餐具和不耐高温的食品等的消毒。1分解尿素的酶是脲酶,所以分解尿素的微生物含有脲酶。尿素含有C

27、、H、O、N元素,其水解产物是二氧化碳、水和氨气,氨气使的培养基的碱性增强。2琼脂是凝固剂,使培养基呈固态;培养基中的碱性物质可以与酚酞反响产生红色环带。3对尿素溶液进展灭菌的最适方法是过滤灭菌。4空白平板的作用是检测培养基平板是否合格,根据题干提供的数据进展计算,每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为49+47+4531000101000=4.7108个。由于菌种可能重叠,所以统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。考点三【知识梳理】1.1C1酶CX酶葡萄糖苷酶2纤维二糖葡萄糖2.1刚果红染色2红色复合物透明圈3纤维素4纤维素选择培养基梯度稀释鉴别纤维素分解菌透明圈【题组训练】1.1葡萄糖C

28、1酶、CX酶 2防止外来杂菌的入侵酒精灯火焰干热灭菌3纤维素在倒平板时就参加刚果红培养基外表的菌悬液过多会导致菌体堆积,影响别离效果解析 1纤维素是一种多糖,其根本组成单位是葡萄糖;纤维素酶是一种复合酶,其中C1酶、CX酶能使纤维素分解成纤维二糖。2微生物别离和培养的关键环节是防止外来杂菌的入侵;为防止周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进展;倒平板用的培养皿需要保持枯燥,可以采用干热灭菌法进展灭菌。3为了别离出纤维素分解菌,配制的选择培养基要以纤维素为唯一碳源。挑选纤维素分解菌时,常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再参加刚果红进展颜色反响,另一种是在倒平板时就参加刚

29、果红。在涂布平板时滴加到培养基外表的菌悬液量不宜过多,原因是培养基外表的菌悬液过多会导致菌体堆积,影响别离效果。2.1高压蒸汽灭菌步骤培养基中石油是唯一碳源2稀释涂布平板法涂布不均匀35.71074进步培养液中溶解氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,进步营养物质的利用率5挑选出分解石油才能最强的细菌解析 1配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌。步骤与步骤中培养基成分相比,最大的区别是步骤培养基中石油是唯一碳源。2同学A进展步骤的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如题图乙所示。该同学的接种方法是稀释涂布平板法,出现图乙结果可能的失误操作是涂布不均匀。3同学B也按照同学A的接种方法进

30、展了步骤的操作:将1 mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为56+58+5730.11000100=5.7107个。4步骤需要振荡培养,原因是进步培养液中溶解氧的含量,通过振荡可使菌体与培养液充分接触,进步营养物质的利用率。5步骤后取样测定石油含量的目的是挑选出分解石油才能最强的细菌。历年真题明考向1.1脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料2尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用

31、NH4NO3,不能起到挑选作用3为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定解析 1催化尿素分解的酶为脲酶。分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物。进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是为细胞生命活动提供能量,葡萄糖的代谢中间产物可以作为合成其他有机物的原料。2能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,假如培养基中含有NH4NO3,那么不能起到挑选作用。3培养基中的KH2PO4和Na2HPO4可以为微生物生长提供钠离子、钾离子等,其还可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。2.1蛋白胨、苯酚2增加稀释涂布凝固剂340、0.2、0.4、0.6、0.8解析

32、 1蛋白胨、苯酚都可以作为碳源。2为了挑选酚降解菌,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。假设平板中菌落过于密集,说明浓度太大,为方便菌落计数与别离,应进一步稀释涂布。平板培养基为固体培养基,制备时必须添加凝固剂。3连续划线法中在划线的末尾区域菌种浓度最小,更易获得单菌落。41号比色管作对照,苯酚浓度为0,16号比色管苯酚浓度由0逐渐增加到1 mg/L,且有梯度,所以15号比色管的苯酚浓度应分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8 mg/L。废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,那么需将残留液稀释20倍后,再进展比色。3.1牛肉膏、蛋白胨琼脂2将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间3污染不正确解析 此题考察微生物的培养与计数,主要考察学生的识记、理解与实验设计才能。1培养基中的牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白质,可作为氮源。用于计数的培养基应为固体培养基,需参加琼