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文档简介

1、.乙肝五项乙肝五项胶体金定性实验胶体金定性实验滨医附院检验科滨医附院检验科.认识乙肝病毒认识乙肝病毒.乙肝五项检测v HBsAgv HBsAbv HBeAgv HBeAbv HBcAb.认识乙肝五项认识乙肝五项.在认识乙肝五项前,在认识乙肝五项前,先了解乙肝病毒感染的相关临床先了解乙肝病毒感染的相关临床.急性肝炎急性肝炎 慢性肝炎慢性肝炎 来源来源 之前从来未感染过 l 急性乙肝转变而来。l 乙肝携带者发病后转变而来l 原发性慢性乙肝新近感染病毒后表现为慢性乙肝的过程 ALT ALT升高幅度升高幅度 较大500-1000U或更高 不大多在正常值5倍左右感染时间感染时间一般不超过半年 半年以上病

2、程特点病程特点 病程顺利,无需特殊治疗,一般不用抗病毒药 反复,复杂,迁延不愈预后预后预后良好若有不良因素,5-10%成慢性抗病毒为主的综合治疗完全可控制病情发展、推迟和预防肝硬化,肝癌的发生结果结果 6个月内sAg、eAg、DNA可转阴并出现抗HBs,获得对乙肝的免疫 病毒不会被彻底清除不存在大 、小三阳全转阴.急性肝炎?慢性肝炎?携带者?急性肝炎?慢性肝炎?携带者?T T细胞免疫功能细胞免疫功能能否清除病毒、引起损伤能否清除病毒、引起损伤疾病疾病完全完全、并产生抗体急性肝炎低下不足以、持续引起病理反应慢性肝炎完全缺乏不清除、不引起病理反应无症状携带者.乙肝五项及血清学诊断乙肝五项及血清学诊

3、断.vHBsAgHBsAg 已感染已感染标志标志 不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱vHBsAbHBsAb 中和性抗体标志,中和性抗体标志,是否康复是否康复或或是否有抵抗力是否有抵抗力的主要标志。的主要标志。 乙肝疫苗接种者,若仅此项阳性,应视接种成功 若感染病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人体内也会产生vHBeAgHBeAg 病毒病毒复制复制标志。持续阳性标志。持续阳性3 3个月以上则有慢性化倾向个月以上则有慢性化倾向 vHBeAbHBeAb 病毒病毒复制停止复制停止标志。病毒复制减少,标志。病毒复制减少,传染性较弱传染性较弱vHBcAbHBc

4、Ab 曾感染或正感染曾感染或正感染者都会出现的标志者都会出现的标志 HBcAb-IGM是新近感染或病毒复制标志 HBcAb-IgG是感染后就会产生的.两对半检查两对半检查 判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查 两对半两对半 评估病情严重程度价值不大评估病情严重程度价值不大 肝功能肝功能 衡量肝脏是否有肝细胞坏死或炎症存在衡量肝脏是否有肝细胞坏死或炎症存在的重要检查(的重要检查(转转氨酶价值最高氨酶价值最高),治疗的重要参考指标。),治疗的重要参考指标。 HBV DNA HBV DNA 判断如何治疗的参考依据,也可评估传染性。判断如何治疗的参考依据,也可评估传染性。 一般一般DNAD

5、NA越高,传染性越强越高,传染性越强(应同肝功能一起检查)(应同肝功能一起检查). 胶体金(colloidal gold)也称金溶胶(goldsol),是金盐被还原成原子金后形成的金颗粒悬液。胶体金.vHBsAg, HBeAg检测试纸条采用双抗体夹心法,试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的多克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。HBsAb检测试纸条采用双抗原夹心法,试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的乙肝表面抗原和控制区(C)的相应抗体。.14双抗体夹心法G区:金标特异性抗体(兔型)C区:羊抗兔IgT区:特异性抗体 吸水纸标本标本阳性结果阳性结果.v测试时,血清/血浆标本滴入试剂板加样处,

6、随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的待测物质,在测试区内(T)出现一条红色条带,则是阳性结果。如标本中不含有相应的待测物质,则测试区内(T)将没有红色条带,则是阴性结果。无论相应的待测物质是否存在于标本中,一条红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的红色条带是判定是否有足够标本,层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂的内控标准。.vHBeAb, HBcAb检测试纸条采用竞争抑制法,试纸条含有被事先固定于膜上测试区(T)的单克隆抗体和控制区(C)的相应抗体。测试时,血清/血浆标本滴入试剂板加样处,随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体,则同膜上测试区(T

7、)的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体,预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)的单克隆抗体全部结合。强阳性标本,测试区内(T)将没有红色条带,弱阳性标本,测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带,阴性标本,测试区内(T)将会出现明显的红色条带。.17竞争法标本标本G区:金标特异性抗体(兔型)C区:羊抗兔IgT区:标准抗原 吸水纸阳性结果阳性结果.18标本标本G区:金标特异性抗体(兔型)C区:羊抗兔IgT区:标准抗原 吸水纸阴性结果阴性结果.v无论相应的抗体是否存在于标本中,一条红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的红色条带是判定是

8、否有足够标本,层析过程是否正常的标准,同时也作为试剂的内控标准。.v标本收集标本收集:标本收集后应尽快分离出血清或血浆以避免溶血。检测时应尽量使用新鲜的标本。标本若不能及时送检,可在2-8冷藏3天。长期保存需冷冻于-20,忌反复冻融。.v操作步骤操作步骤:在进行测试前必须先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和血样标本恢复至室温(20-30)。v1.从原包装铝箔袋中取出试剂板,在小时内应尽快地使用。v2.用吸管吸取血清/血浆标本,逐滴(每孔2-3滴)加入试剂板的五个加样孔中。v3.等待红色条带的出现,测试结果应在15分钟时读取。20分钟后判定无效。.v检验结果判定:阳性(+):两条红色条带出现,

9、一条位于测试区(T)内,另一条位于质控区(C)。阳性结果表明:标本中含有待测物质。v阴性(-):仅质控区(C)出现一条红色条带,在测试区(T)内无红色条带出现。阴性结果表明:标本中检测不出待测物质。v无效:质控区(C)未出现红色条带,表明不正确的操作过程或试纸条已变质损坏。在任何情况下,应重新测试。如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系。v注意:测试区(T)内的红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是,在规定的观察时间内,不论该色带颜色深浅,即使只有非常弱的色带也应判为阳性结果。.v强阳性(+):仅质控区(C)出现一条红色条带,在测试区(T)内无红色条带出现。阳性结果表明:标本中含有待测抗体。v弱阳性(+):质控区(C)出现一条红色条带,在测试区(T)内有非常弱的红色条带出现。弱阳性结果表明:标本中含有少量待测抗体。v阴性 (-):两条红色条带出现,一条位于测试区(T)内,另一条位于质控区(C

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